В 2011 году на 12 неделе беременности сдавала анализы в ЖК г.Киева. И тут оказывается, что РВ дает +. Ничего не объясняя, меня направляют в кожвен диспансер по месту прописки (г. Кировоград). При этом, я, уже начитавшись всего в интренете, еду с твердым намерением, что не дам согласия на курс лечения антибиотиками. Муж у меня единственный мужчина, и он на все 100% здоров (каждый год проходит комиссию). Попала я к адекватному врачу, которая меня решила сразу обследовать, а не отправлять в стационар. Я сдавала и мазок -, микрореакция -, РВ+, РИФ -. При этом полностью обследовался и муж - все отрицательно. Она мне выдала справку, что это какая-то сероположительная реакция при беременности. И так я каждый месяц до родов ездила к ней на сдачу анализов. Все результаты у меня повторялись, как и в первый раз (один раз, правда, РВ дал ++). Не буду рассказывать, что я пережила за ту беременность, когда в Киеве меня не захотели ставить на учет, а по месту прописки смотрели, как на прокаженную. Но в роддоме, посмотрев справки, никто ничего не расспрашивал, и рожала я, как и все...
После родов возможности пересдать анализы в своем кожвене у меня не было (сразу уехали в Киев). С врачом договорились, что при первой возможности я заеду и сдам все снова. Но прошло 2 года. Я была уверенна, что все нормализуется и анализы станут отрицательными. Но так получилось (сдавала анализы в г. Курск), что снова РВ дает ++. Я в слезах снова в интернет, нашла такую информацию, что и вовремя лактации этот анализ может давать и ложноположительный результат. Грудью я закончила кормить (1г. 10 мес.) буквально за неделю до сдачи анализа. И вот неделю назад поехала в Кировоград. Сдала РВ ++++, РИФ и РПГА + (но сказала, что это принимают как отрицательные). Что делать, не знаю!!! Врач назначила повторные анализы, если снова будут такие результаты - нужно будет ехать в Харьков (там делают какой-то анализ, который все точно расставит по своим местам).
1. В чем может быть причина, что у меня так скачут результаты РВ?
2. Как могут повести себя эти анализы при следующих беременностях?
3. Могла ли я как-то переболеть сифилисом (даже не знаю, как могла заразиться), ничего не заметив (антибиотиками вообще не лечилась!)? При этом, у мужа все отрицательно.
4. Если действительно это сифилис, как мне поступить с дочкой - тоже нужно обследовать? Больше всего боюсь за ее здоровье!

Одним из важных исследований, которые проводят при плановых медицинских осмотрах, а также постановке беременной на учет является анализ крови на RW. Многие пациенты не знают, для чего он нужен.В этой статье пойдет речь о том, что это за анализ и когда его назначают.

Реакция Вассермана

Анализом на RW называется серологическое исследование крови для определения наличия или отсутствия антител к трепонеме бледной, которая является возбудителем такого опасного заболевания, как сифилис. Этот болезнетворный микроорганизм еще называется спирохетой. Он устойчив к окружающим условиям и существует до четырех дней вне организма.

Если в теле пациента находится трепонема, то иммунная система начинает вырабатывать антитела. Во время этого происходит разрушение эритроцитов. Это и определяет данное исследование.

Такой метод диагностики также дает возможность оценить, насколько давно наступило заражение, и выявить активность патогенного микроорганизма.

Основоположником способа является Август Вассерман, именно поэтому название этой диагностики носит его имя. Сделать анализ можно в любом медицинском учреждении.

Когда назначается анализ

В обязательном порядке кровь на РВ сдают в следующих случаях:

• при профилактических медицинских осмотрах;
• в период планирования беременности или во время вынашивания ребёнка;
• при необходимости лечения в условиях стационара.

Назначается диагностика и при подготовке к оперативному вмешательству.

Также важно своевременно сделать анализ, если у человека появились признаки, свидетельствующие о венерическом заболевании.

К клиническим проявлениям сифилиса у взрослых относятся следующие симптомы:

• увеличенные лимфатические узлы (особое внимание следует обратить на паховые лимфоузлы);
• специфические выделения из пениса или влагалища (с неприятным запахом и цветом);
• головные боли;
• головокружения;
• высокая температура тела;
• обильность выделений из половых путей;
• болезненность в костях и суставная боль;
• возникновение на кожных покровах, а также слизистых оболочках сыпи или язвочек.

Специалисты рекомендуют делать анализ при случайном половом акте без предохранения. Это объясняется тем, что сифилис длительное время может не иметь клинических симптомов, поэтому зараженный человек на начальных стадиях даже не подозревает о болезни.

Из-за того, что недуг длительное время имеет скрытый период течения, сдавать биоматериал и проводить этот метод исследования крови необходимо:

• лицам, работающим в сфере медицины;
• работникам общественного питания или образования;
• донорам, которые сдают кровь, сперму или плазму;
• пациентам с наркотической зависимостью;
• ВИЧ-инфицированным;
• лицам, страдающим алкогольной зависимостью;
• людям, которые имели контакты с пациентами, страдающими сифилисом.

При скрытом периоде патологии входящие в эти группы являют потенциальную опасность для окружающих.

Подготовка к исследованию

Чтобы результаты были точными и достоверными, важно знать, как правильно подготовиться к исследованию. Для этого медики рекомендуют придерживаться следующих правил:

1. За семь суток до сдачи крови важно не употреблять алкогольные напитки. Обычно при нарушении этой рекомендации анализ показывает положительную реакцию.
2. Перед сдачей биологического материал не разрешается принимать очень крепкие напитки (как кофе, так и чай).
3. За несколько часов до исследования отказаться от табакокурения.
4. Кровь правильно сдавать натощак. Поэтому берут ее ранним утром, чтобы интервал между приемом пищи и забором крови составлял не менее десяти часов.
5. За день до диагностики специалисты не советуют кушать жареные или жирные блюда.
6. Перед исследованием необходимо исключить любые психологические или физические нагрузки.
7. За несколько суток до выполнения процедуры пациент не должен принимать никаких лекарственных препаратов. Если это невозможно, то следует обязательно предупредить об использовании медикаментозных средств специалиста.

Нежелательно осуществлять процедуру после рентгенографии, ректального исследования, ультразвуковой диагностики или физиотерапевтических манипуляций. В противном случае лучше перенести исследование крови на другой день.

Техника выполнения

При данном исследовании забор крови осуществляется двумя путями:

• из вены;
• из пальца.

В первом случае после дезинфекции кожного покрова на локтевом сгибе с помощью медицинской иглы и шприца прокалывают вену. Кровь набирают в специальную пробирку с определенным реактивом.

При втором варианте подушечку безымянного пальца тщательно обрабатывают антисептическим раствором и делают прокол инструментом, который называется скарификатором. После этого кровь с помощью специального приспособления, подобного большой пипетке, набирают в пробирку.

Специалисты утверждают, что более информативным и достоверным является исследование венозной крови .

Длительность анализа составляет от пяти до пятнадцати минут.

После забора крови специалист, используя реактивы и специфические маркеры сифилиса, определяет реакцию и заносит её в бланк.

Расшифровка результата

При оформлении итогов исследования результаты могут быть нескольких вариантов:

• положительный;
• слабоположительный;
• отрицательный;
• ложноположительный.

Расшифровка результатов зависит от профессионализма и опытности специалиста, правильности подготовки к диагностике, а также от наличия определенных факторов, которые могут повлиять на исход.

Положительный результат

В случае если обнаруживаются антитела, которые вырабатывает иммунная система человека на возбудитель сифилиса, говорят положительном результате.

Положительная реакция сигнализирует о сифилисе разных форм и степени течения. Также такой результат определяется еще в течение одного года после лечения этой венерической болезни.

Данная реакция в бланке обозначается плюсами. Чем меньше плюсов, тем ниже вероятность инфицирования заболеванием.

Расшифровка результатов может быть следующей:

• резко положительный результат при четырёх плюсах;
• положительная реакция - три плюса;
• о слабоположительном результате свидетельствуют два плюсика в бланке;
• на неопределенную реакцию указывает только один плюс.

Таким образом, чем плюсов больше, тем вероятнее, что пациент болен сифилисом. В третьем и четвертом варианте необходимо повторное исследование крови.

Отрицательный результат

Если в расшифровке анализа стоит отрицательный результат, то это свидетельствует о том, что возбудитель заболевания не обнаружен. Это означает отсутствие сифилиса в организме.

Однако в некоторых случаях такая реакция может возникать при поздней третичной форме заболевания или указывать на ранний первичный сифилис.

Поэтому важно помнить, что достоверным результат может не быть, если у пациента стадия серонегативного окна, при которой инфицирование уже произошло, но антитела еще не выработались организмом.

Ложно- или слабоположительный результат

В некоторых случаях при расшифровке может определиться ложноположительная реакция, что указывает на недостоверный результат. Причинами такого варианта считаются:

• онкологические процессы, протекающие в организме;
• употребление наркотических веществ;
• злоупотребление спиртными напитками;
• вакцинация, сделанная накануне.

Наблюдается такая реакция при заболеваниях органов дыхания, печени или эндокринной системы, а именно при воспалении легких, туберкулезе, гепатите или сахарном диабете.

Возможна она и при артрите различного генеза, системном заболевании соединительной ткани.

Неточный результат анализа может давать прививка, которая была сделана за несколько дней до диагностики.

Часто определяется такой результат у женщин при беременности .

Слабоположительная реакция выясняется в редких случаях. Обычно такое явление возможно, когда у пациента начальная стадия болезни.

Диагностика при беременности

Проверку крови на сифилис необходимо делать при планировании беременности. Сдавать кровь на анализ женщинам при вынашивании ребёнка необходимо и при постановке на учет.

Кроме этого, исследование проводят в ходе течения беременности. Это объясняется тем, что в этот период инфицированная мать может заразить плод.

Часто у женщин в таком положении может быть ложноположительная реакция. Если такое явление наблюдается в расшифровке анализов, то проводят повторную процедуру.

Таким образом, анализ на RW является важной диагностикой сифилиса. Он позволяет определить стадию и форму течения этого опасного заболевания. Поэтому проводят анализ в обязательном порядке людям определенных категорий.

Ложноположительные серологические реакции на сифилис
False positive reaction to serological tests for syphilis

Что такое ложноположительные реакции на сифилис

Ложноположительные (False-positive reactions) серореакции на сифилис - положительные результаты тестов на сифилис при отсутствии заболевания.Ложноположительные реакции необходимо отличать от серопозитивности и серорезистентности после лечения сифилиса.В большинстве случаев ложноположительные реакции встречаются при проведении нетрепонемных тестов на сифилис (RPR) - приблизительно в 2-5 % случае от всех проведенных тестов (по данных некоторых авторов от 5 до 20%),гораздо реже ложноположительные реакции встречаются при проведении трепонемных тестов .Различают биологические ложноположительные реакции и ошибочные ложноположительные реакции,связанные с нарушением техники проведения тестов в лаборатории.

Какие причины ложноположительных реакций на сифилис

Ложноположительные нетрепонемные тесты

Основные причины биологических ложноположительных реакций связаны с тем,что при проведении нетрепонемных тестов определяются антитела к кардиолипину (основному компоненту липидов митохондрий, особенно сердечной мышцы - отсюда и название),который появляется в организме при разрушении тканей при некоторых заболеваниях и состояниях.Таким образом нетрепонемные тесты определяют так называемые реагиновые антитела,которые организм выработал не против возбудителя сифилиса - бледной трепонемы,а против последствий сифилитической инфекции.Однако реагиновые антитела вырабатываются не только к липидам разрушенных тканей,но и к липидам мембраны бледной трепонемы,но было выявлено более 200 антигенов,похожих по своему составу на липидный антиген бледной трепонемы.

Ложноположительные трепонемные тесты

Причины появления ложноположительных трепонемных тестов неизвестны.Процент их появления очень низок.Отмечено,что ложноположительные трепонемные тесты наиболее часто встречаются при системной красной волчанке и при болезни Лайма (боррелиозе).
Так как противотрепонемные антитела продуцируются клетками иммунологической памяти довольно долгое время, есть гипотезы о кратковременном контакте организма с бледной трепонемой,которое не привело к заражению сифилисом,но вызывало продукцию противотрепонемных антител.

Несомненно появление положительных нетрепонемных и трепонемных тестов при невенерических трепанематозах - это не рассматривается как ложноположительная биологическая реакция,но и не подтверждает наличие сифилиса.

Когда встречаются ложноположительные реакции на сифилис

Зарегистрированная частота ложноположительных результатов нетрепонемных тестов составляет по данных разных авторов от 5 до 20%.

Основные причины ложноположительных результатов нетрепонемных тестов

Наиболее частой причиной биологических ложноположительных нетрепонемных тестов является антифосфолипидный синдром (синдром Hughes) - аутоимунный процесс,наиболее часто встречающийся при коллагенозах (заболеваниях соединительной ткани) - системной красной волчанке (2.7%- 3.5%),дерматомиозите,склеродермии.

Среди других причин наиболее часто встречаются
Онкологические заболевания (например лимфома до 10%)
Туберкулез,особенно внелегочные формы (до 3%)
Энтеровирусные инфекции
Инфекционный мононуклеоз
Вирусные гепатиты
Болезнь Лайма (боррелиоз)
Пневмонии
Алкоголизм и наркомании
Некоторые заболевания кожи (например при псориазе до 1.1%)
Недавно (до 2-3 недель) проведенная вакцинация
Инфекции - малярия,ветряная оспа,корь
Эндо и миокардиты
Сахарный диабет (особенно на фоне парентеральной инсулинокомпенсации)
Подагра
Возраст старше 70 лет.

Что такое ложноположительные серореакции на сифилис у беременных

Одной из частой причин ложноположительных тестов на сифилис является беременность.Частота ложноположительных реакций при проведении нетрепонемных тестов у беременных по данных разных авторов составляет от 0.72% до 1.5%.Причины и механизм их возникновения полностью неясны,у определенной части беременных с ложноположительными нетрепонемными тестами выявляется АФС.Дифференциальную диагностику с биологически ложноположительными серореакциями у беременных проводят в следующих случаях:

• При противоречивых, нередко слабоположительных результатах серологических реакций
• При изолированной позитивности одного теста среди отрицательных других
• При колебаний результатов тестов в повторных исследованиях
• При отсутствии анамнестических указаний на сифилис у беременной и каких - либо объективных признаков сифилиса у половых партнеров

Что такое ложноотрицательные реакции на сифилис

Ложнонегативные (ложноотрицательные) результаты встречаются при высокой концентрации антител,что ингибирует агглютинацию (эффект прозоны), которого можно избежать с серийными разведениями сыворотки. В среднем частота ложноотрицательных результатов нетрепонемных тестов (VDRL) при вторичном сифилисе около 1%.
Ложнонегативные результаты нетрепонемных тестов надо отличать от отрицательных нетрепонемных тестов в различные периоды течения сифилиса,когда организм еще не выработал антител или когда количество антител значительно уменьшается в всвязи с сокращением количества липидного антигена.

Частота отрицательных нетрпонемных тестов в различные периоды сифилиса

Где можно получить еще информацию

Реакция Вассермана (RW) — это самая популярная иммунологическая реакция, применяемая для диагностики сифилиса , начиная со времени своего открытия в 1906 году. RW относится к группе реакций связывания комплемента (РСК) и основывается на способности сыворотки крови больного сифилисом образовывать комплекс с соответствующими антигенами. Современные методики РСК, применяемые для диагностики сифилиса, значительно отличаются по своим антигенам от классической реакции Вассермана, однако, термин «реакция Вассермана» за ними традиционно сохраняется.

В крови заразившегося человека появляются антитела, выработанные иммунной системой. В возбудителе заболевания — бледной трепонеме (Treponema pallidum), содержится антиген кардиолипин, который вызывает выработку антител, определяемых с помощью RW. Положительная реакция Вассермана как раз и свидетельствует о присутствии таких антител в крови человека и на этом основании делается вывод о наличии заболевания.

Показателем результата исследования в РСК служит реакция гемолиза. В реакции участвуют два компонента: эритроциты барана и гемолитическая сыворотка. Гемолитическую сыворотку получают путем иммунизации кролика эритроцитами барана. Её инактивируют в течение 30 минут при температуре 56°С. Результаты РСК оценивают в зависимости от наличия или отсутствия гемолиза в опытных пробирках. Наличие гемолиза объясняется тем, что если в испытуемой сыворотке отсутствуют сифилитические антитела, то реакция антиген-антитело не происходит, и весь комплемент идет на реакцию бараньи эритроциты-гемолизин. А если имеются специфические антитела, комплемент полностью уходит на реакцию антиген-антитело и гемолиза не происходит.

Все ингредиенты для реакции Вассермана берутся в одинаковом объеме — 0,5 или 0,25 мл. Для прочной фиксации комплемента на специфическом комплексе, смесь исследуемой сыворотки, антигена и комплемента помещают в термостат при температуре 37° на 45-60 мин. (I фаза реакции), после чего вносят гемолитическую систему, состоящую из бараньих эритроцитов и гемолитической сыворотки (II фаза реакции). Далее пробирки вновь помещают в термостат на 30-60 минут до наступления гемолиза в контроле, в котором антиген заменяют физиологическим раствором, а вместо исследуемой сыворотки вносят физиологический раствор. Антигены для реакции Вассермана выпускают в готовом виде с указанием титра и способа разведения.

Максимальную позитивность реакции Вассермана принято обозначать количеством крестов: ++++ (резко положительная реакция) — свидетельствует о полной задержке гемолиза; +++ (положительная реакция) — соответствует значительной задержке гемолиза, ++ (слабоположительная реакция) — свидетельство частичной задержки гемолиза, + (сомнительная реакция) — соответствует о незначительной вдержке гемолиза. Отрицательная RW характеризуется полным гемолизом во всех пробирках опыта.

Однако, иногда возможны и ложноположительные результаты — это связано с тем, что кардиолипин в некотором количестве содержится и в клетках человеческого организма. Иммунная система человека не создает антител против «собственного» кардиолипина, но из этого правила бывают и исключения, благодаря которым положительная реакция Вассермана возникает у совершенно здорового человека. Особенно часто это наблюдается после перенесенных тяжелых вирусных и прочих заболеваний — пневмонии, малярии, болезней печени и крови, при беременности, т.е. в моменты серьезного ослабления иммунитета.

Если врач подозревает у пациента ложноположительный результат на реакцию Вассермана, то он может назначить ему ряд дополнительных исследований, которые обычно применяются при диагностике заболеваний, передающихся половым путем.

Заболевания и случаи, при которых врач может назначить анализ крови на RW

Проведение процедуры сдачи анализа крови на RW

Кровь на RW сдается только натощак. Крайний прием пищи должен быть не позднее 6 часов до сдачи анализа. Медицинский работник усаживает пациента или укладывает на кушетку и осуществляет забор 8-10 мл крови из локтевой вены.

Если анализ необходимо сделать младенцу, то забор осуществляется из черепной или яремной вены.

Подготовка с сдаче анализа крови на RW

За 1—2 суток до сдачи анализа следует прекратить употребление спиртных напитков. Также не рекомендуется есть жирную пищу — она может исказить результат. В период подготовки к анализу следует воздержаться от приема препаратов наперстянки.

Противопоказания

Результат анализа будет ложным, если:

• человек болен инфекционным заболеванием или только переболел им,
• у женщины период менструации,
• беременная в последние недели перед родами,
• первые 10 дней после родов,
• первые 10 дней жизни младенца.

При первичном сифилисе реакция Вассермана становится положительной на 6-8 неделе течения заболевания (в 90 % случаев), при этом отмечается следующая динамика:

• в первые 15-17 дней после заражения реакция у большинства больных, как правило, отрицательная;
• на 5-6-й неделе заболевания примерно у 1/4 части больных реакция становится положительной;
• на 7-8-й неделе заболевания RW становится положительной у большинства.

При вторичном сифилисе RW положительна всегда. Вместе с другими серологическими реакциями (РПГА, ИФА, РИФ) позволяет не только выявить наличие возбудителя, но и выяснить приблизительный срок заражения.

При развитии сифилитической инфекции на 4-й неделе заболевания, после возникновения первичной сифиломы, реакция Вассермана переходит из отрицательной в положительную, оставаясь таковой и во вторичном свежем, и во вторичном рецидивном периоде сифилиса. В скрытом вторичном периоде и без лечения RW может переходить в отрицательную с тем, чтобы при наступлении клинического рецидива сифилиса вновь стать положительной. Поэтому, в скрытом периоде сифилиса отрицательная реакция Вассермана не свидетельствует о его отсутствии либо излеченности, а лишь служит благоприятным прогностическим симптомом.

При активных поражениях третичного периода сифилиса положительная RW встречается приблизительно в 3/4 случаев заболевания. Когда же активные проявления третичного периода сифилиса исчезают, она часто переходит в отрицательную. В этом случае отрицательная реакция Вассермана у больных не свидетельствует о том, что у них нет сифилитической инфекции.

При раннем врожденном сифилисе RW практически во всех случаях положительна и является ценным методом для верификации болезни. При позднем врожденном сифилисе результаты ее соответствуют таковым, полученным в третичном периоде приобретенного сифилиса.

Большое практическое значение имеет исследование реакции Вассермана в крови у больных сифилисом, подвергающихся лечению. У некоторых больных, несмотря на энергичную противосифилитическую терапию, реакция Вассермана не переходит в отрицательную — это так называемый серорезистентиый сифилис. В данном случае проводить бесконечно противосифилитическую терапию, добиваясь перехода положительной RW в отрицательную, не имеет смысла.

Из изложенного выше следует, что отрицательная реакция Вассермана, не всегда является признаком отсутствия сифилитической инфекции в организме.

Возможна положительная реакция Вассермана у людей при ряде других, не связанных с сифилисом заболеваниях и состояниях:

Всё перечисленное свидетельствует о том, что положительный результат реакции Вассермана, еще не является безусловным доказательством наличия сифилитической инфекции.

Восстановление после сдачи анализа

После сдачи анализа крови врачи рекомендуют правильное и сбалансированное питание, а также как можно больше жидкости. Можно позволить себе теплый чай и шоколад. Будет полезным воздержаться от физических нагрузок и ни в коем случае не принимать алкоголь.

Нормы

В норме в крови должен наблюдаться гемолиз — это считается отрицательной реакцией на сифилис (Реакция Вассермана отрицательная). Если же гемолиз отсутствует, оценивается степень реакции, которая зависит от стадии заболевания (помечается знаками «+»). При этом следует знать, что у 3-5% совершенно здоровых людей реакция может быть ложноположительной. В то же время, в первые 15-17 дней после заражения, реакция у больных людей может быть ложноотрицательной.

Реакция Вассермана (RW) используется уже более 100 лет и доказала свою эффективность в ранней диагностике сифилиса. Эта методика исследования крови достаточно проста, но в то же время очень надежна, что позволяет широко применять ее по всему миру в усовершенствованном виде. Современные активно используемые экспресс-тесты существенно отличаются от классической реакции Вассермана, но в них закладывается основной принцип этой методики, что позволяет часто давать им прежнее название.

Принципиальный подход

По своей сути, реакция Вассермана - это лабораторный анализ кровяной сыворотки, направленный на определение иммунологической реакции организма на проникновение в него возбудителя сифилиса. При заражении сифилисом происходит характерный процесс. Бледная трепонема (Treponema pallidum), содержит антиген кардиолипин. Кровяная сыворотка за счет наличия реагинов вступает в, так называемую, реакцию связывания комплемента (РСК) с образованием специфического комплекса с этим антигеном, т.е. антитела к трепонеме вступают в соединение с трепонемным антигеном.

Принцип реакции Вассермана основан на выявлении указанной реакции. Если человек заражен сифилисом, то в его крови обязательно появляются антитела к бледной трепонеме, что является физиологическим ответом иммунной системы. Для искусственного провоцирования специфической реакции в кровь вводится препарат, содержащий трепонемный антиген (кардиолипин). Одновременно вводится гемолитическая система для проведения реакции гемолиза, а для сорбции комплексов используется комплемент.

В случае когда возбудитель сифилиса уже проник в человеческий организм, начинается РСК, связывающая антитела в крови с введенным антигеном с образованием специфического комплекса. На эту реакцию расходуется весь вводимый антиген и комплемент. Если антител нет в крови пациента, то кардиолипин вступает в реакцию гемолиза с гемолитической системой, которая полностью его нейтрализует. Проводимый лабораторный анализ выявляет комплексы антитело-антиген, которые обнаруживаются визуально. Концентрация комплексов показывает интенсивность их образования и условно оценивается по количеству знаков (плюс): от (+) до (++++). Исследования на RW можно проводить на кровяной сыворотке или спинномозговой жидкости.

Реакционный состав

Для обеспечения RW в кровь исследуемого человека вводится специальная смесь, которая содержит 3 основных ингредиента: антиген, комплемент и гемолитическую систему. Главную реакцию Вассермана обеспечивает антиген, представляющий собой искусственно приготовленный антиген возбудителя. Он может готовиться в 2 вариантах: обработанная ультразвуком культура бледной трепонемы или кардиолипин, получаемый из бычьего сердца. Чаще всего используется второй вариант, когда препарат приготавливается путем тщательной очистки спиртового липидного экстракта, получаемого из мышечных тканей бычьего сердца. Для повышения активности антигена добавляют фосфолипид, лецитин и холестерин. Необходимая доза антигена обеспечивается разведением его в растворе хлорида натрия.

Гемолитическая система соединяет в себе гемолитическую сыворотку (гемолизин) и эритроциты из крови барана. Сыворотку получают из крови кроликов и ослов, а затем ее иммунизируют эритроцитами барана. Эритроциты выделяются из крови барана в возрасте 1-4 года, а забирается она из яремной вены. Комплемент приготавливается из кровяной сыворотки, получаемой из сердца морских свинок. Для проведения RW указанные ингредиенты берутся в равном количестве - по 0,25 или 0,5 мл.

Как проводится анализ крови

Кровь у пациента на анализ берется натощак или через 7-8 часов после приема пищи. Нельзя брать пробы в следующих обстоятельствах: повышенная температура тела, после недавно перенесенной болезни инфекционного характера, во время месячных у женщин, за 12-15 дней до родов у беременных женщин, сразу после родов, в течение суток после приема алкоголя. Не следует брать анализ у новорожденных детей в первые 2 недели жизни.

Кровь для проведения исследований отбирается из локтевой вены в объеме порядка 9-10 мл с соблюдением всех антисептических правил. У младенцев кровь берется путем надреза пятки специальным скальпелем. На проведение реакции проба должна поступить в течение 2 суток после отбора крови и при условии хранения при температуре не выше 3-4ºС.

Из крови пациента приготавливается сыворотка в следующем порядке. Кровь выдерживается при температуре 37ºС в термостате в течение 18-28 минут, а образовавшийся кровяной сгусток отделяется и поступает на центрифугу, где обрабатывается на скорости порядка 1000 об/мин в течение 14-16 минут. После такой процедуры над сгустком появляется прозрачная кровяная сыворотка, которая и забирается для дальнейших исследований. Если в сыворотке обнаруживаются эритроциты, то проводится повторное центрифугирование для их отделения. Окончательно выделенная сыворотка проходит инактивацию при 55-57ºС в течение 28-35 минут. Таким образом удаляется натуральный комплемент и нормализуется состояние глобулинов. Полностью подготовленная кровь хранится в холодильнике не более 7 дней.

Определение реакции Вассермана кровяной сыворотки осуществляется в 3 пробирках: во все пробирки наливается сыворотка, разведенная раствором хлорида натрия в пропорции 1:5, а затем в первую пробирку вводится 0,25 мл трепонемного антигена, во вторую - 0,25 мл кардиолипина, а в третью (контрольную) - 0,25 мл раствора хлорида натрия. Затем во все пробы вводится такое же количество комплемента. Необходимо отметить, что смешивание компонентов заранее не производится.

Следующий этап - первичная инкубация в термостате при температуре 36-38ºС в течение 46-55 минут. После тепловой обработки вводится гемолитический состав (по 0,5 мл в каждую пробирку) с перемешиванием путем встряхивания. Далее осуществляется окончательная инкубация в аналогичных условиях до полного завершения операции гемолиза. Внимательно оценивается наличие или отсутствие гемолиза. Оценку результатов реакции проводят путем сравнения с контрольными образцами. Для этой цели используется 2 дополнительные пробирки: в одну помещается кровь, в которой достоверно установлен возбудитель сифилиса, а в другую - кровь абсолютно здорового человека.

Исследование спинномозговой жидкости

Антитела к бледной трепонемы могут располагаться в спинномозговой жидкости, поэтому иногда исследования на реакцию Вассермана проводятся на пробах этой жидкости. Пробы исследуются одновременно в 3 вариантах: неразведенная спинномозговая жидкость, разведенная в соотношении 1:2 с раствором хлорида натрия и разведенная с тем же раствором в пропорции 1:5. Реакцию проводят аналогично с исследованием кровяных проб, т.е. с трепонемным антигеном и кардиолипином. Комплемент вводится по специальным титрам. Сама методика проведения реакции и оценка исследования спинномозговой жидкости не отличается от исследования на кровяной сыворотке.

Как оцениваются результаты

Нормой или отрицательным результатом реакции Вассермана (отсутствие заражения сифилисом) считается протекание реакции гемолиза. В этом случае в крови отсутствуют антитела к сифилитическому возбудителю, а все введенные антигены нейтрализуются гемолитической системой.

Положительный результат, т.е. наличие заражения, оценивается путем сравнительного анализа с контрольными образцами. Степень тяжести болезни или ее стадия обозначается количеством знаков "плюс":

• (+) или (1+): небольшая задержка гемолиза;
• (++) или (2+): слабо положительная реакция или частичная задержка гемолиза;
• (+++) или (3+): положительная реакция или значительная задержка гемолиза;
• (++++) или (4+): резко положительная реакция или полное отсутствие гемолиза.

Кроме того, существует такое понятие, как сомнительная реакция, обозначающаяся в виде (+/-). Такая реакция требует перепроверки и уточнения. При проведении оценки реакции Вассермана следует учитывать такой факт: у 4-6% здоровых людей наблюдается ложноположительный результат, а у зараженных людей (до 25%) может наблюдаться ложноотрицательный результат в течение 14-18 суток после инфицирования бледной трепонемой. Ложноотрицательные результаты меняются по мере развития болезни: после 4-6 недель болезни до 26% результатов становятся положительными, а к 8-9 неделе почти все они дают положительную реакцию.

Отрицательный результат в скрытом периоде второй фазы сифилиса не всегда свидетельствует об отсутствии болезни. При рецидиве сифилиса реакция становится положительной. После проведения лечебного курса отрицательный результат указывает только на благоприятную тенденцию, но требует перепроверки. Другая проблема оценки эффективности лечения - появление синдрома, так называемого серорезистентного сифилиса, когда после излечения реакция Вассермана все равно дает отрицательный результат.

Реакция Вассермана в большинстве случаев достаточно четко выявляет заражение сифилисом, однако в ряде случаев отрицательная реакция не дает гарантии отсутствия инфекции, также как и положительный результат может появиться и при отсутствии сифилиса.

В частности, ложноположительная реакция может возникнуть в следующих случаях:

Ложный результат может проявиться даже при употреблении жирной пищи непосредственно перед исследованиями.

Результаты реакции Вассермана нельзя расценивать как истину в последней инстанции. Они, скорее, дают импульс для проведения дополнительных обследований. Для этих целей в настоящее время применяются различные трепонемные тесты. К современным методикам экспресс-диагностики сифилиса относятся усовершенствованные аналоги реакции Вассермана: тест RPR, который дополняется трепонемными тестами РПГА.

Реакция Вассермана сыграла огромную роль в развитии диагностирования сифилиса на ранних стадиях. Однако ее результаты не всегда однозначно оценивают наличие болезни, в связи с чем в настоящее время применяются более совершенные способы, принцип функционирования которых взят из классической реакции Вассермана. Исследования данного типа, в основном, продолжают использоваться при контроле лечебного процесса, но могут применяться и для выявления сифилиса.