al hipotenzija, tachikardija, dusulys, cianozė. Sunkiais ligos atvejais galimas kraujavimas ir vėmimas, sumaišytas su krauju. Padidėja kepenys ir blužnis. Pažymima oligurija. Nuolat aukšta temperatūra išlieka 3–10 dienų. Periferiniame kraujyje - neutrofilinė leukocitozė su poslinkiu į kairę. Be aprašytų bendrųjų maro apraiškų, išsivysto ir atskiroms klinikinėms ligos formoms būdingi pažeidimai.

Odos forma yra reta (3–5%). Infekcijos įėjimo vartų vietoje atsiranda dėmė, tada papulė, pūslelė (fliktena), užpildyta seroziniu hemoraginiu turiniu, apsupta infiltruotos zonos su hiperemija ir edema. Fliktenai būdingas stiprus skausmas. Jį atidarius susidaro opa su tamsiu šašu ​​apačioje. Maro opa trunka ilgai ir gyja lėtai, suformuodama randą. Jei šią formą komplikuoja septicemija, atsiranda antrinių pustulių ir opų. Galimas regioninio bubo (odos buboninės formos) išsivystymas.

Buboninė forma yra labiausiai paplitusi (apie 80%) ir yra gana gerybinė. Nuo pirmųjų ligos dienų regioninių limfmazgių srityje atsiranda aštrus skausmas, kuris apsunkina judėjimą ir verčia pacientą užimti priverstinę padėtį. Pirminis bubo, kaip taisyklė, yra vienas, daugybiniai bubo pastebimi rečiau. Daugeliu atvejų pažeidžiami kirkšnies ir šlaunikaulio limfmazgiai, o kiek rečiau – pažasties ir kaklo limfmazgiai. Bubo dydis svyruoja nuo graikinio riešuto iki vidutinio dydžio obuolio. Ryškios savybės yra aštrus skausmas, tanki konsistencija, sukibimas su apatiniais audiniais, kontūrų lygumas dėl periadenito vystymosi. Bubo pradeda formuotis antrą ligos dieną. Jai vystantis, ant jo esanti oda parausta, blizga ir dažnai įgauna cianotišką atspalvį. Pradžioje tankus, vėliau suminkštėja, atsiranda svyravimas, kontūrai tampa neaiškūs. 10-12 ligos dieną atsidaro - fistulė ir išopėjimas. Esant gerybinei ligos eigai ir šiuolaikinei antibiotikų terapijai, stebima jos rezorbcija arba sklerozė. Dėl hematogeninio patogeno įvedimo gali susidaryti antriniai burbuliukai, kurie atsiranda vėliau ir yra mažo dydžio, mažiau skausmingi ir, kaip taisyklė, nesupūliuoja. Rimta šios formos komplikacija gali būti antrinės plaučių ar antrinės septinės formos išsivystymas, kuris smarkiai pablogina paciento būklę ir netgi sukelia mirtį.

Pirminis plaučių forma yra reta, epidemijų laikotarpiu 5–10% atvejų ir yra epidemiologiškai pavojingiausia ir sunkiausia klinikinė ligos forma. Prasideda aštriai, audringai. Dėl ryškaus apsinuodijimo sindromo nuo pirmųjų dienų atsiranda sausas kosulys, stiprus dusulys ir slegiantis skausmas krūtinėje. Tada kosulys tampa produktyvus, atsiranda skreplių, kurių kiekis gali svyruoti nuo kelių spragų iki didžiulių kiekių, retai jo visai nėra. Skrepliai iš pradžių yra putojantys, stikliniai, skaidrūs, vėliau įgauna kruviną išvaizdą, vėliau tampa grynai kruvini, juose yra didžiulis kiekis maro bakterijų. Dažniausiai būna skystos konsistencijos – vienas iš diagnostinių požymių. Fiziniai duomenys yra menki: šiek tiek sutrumpėja perkusijos garsas per pažeistą skiltį, auskultuojant nėra daug smulkių švokštimų, kurie aiškiai neatitinka bendros sunkios paciento būklės. Galutiniam laikotarpiui būdingas padidėjęs dusulys, cianozė, stuporas, plaučių edema ir ITS. Nukrenta kraujospūdis, padažnėja pulsas ir tampa siūliškas, širdies garsai nuslopsta, hipertermiją keičia hipotermija. Negydant liga baigiasi mirtimi per 2–6 dienas. Anksti pradėjus vartoti antibiotikus, ligos eiga yra gerybinė ir mažai skiriasi

Kas yra imunoblotas? Tai yra įprastas žmogaus virusinių infekcijų laboratorinės diagnostikos metodas. Tai laikoma vienu tiksliausių ir patikimiausių būdų nustatyti ŽIV buvimą. Savo patikimumu jis pranoksta net imunoblotų rezultatus, kurie laikomi nepaneigiamais ir galutiniais.

Bendra informacija

Imunoblotas - kas tai? Norint atpažinti ŽIV infekciją žmogui, būtina atlikti laboratorinį kraujo serumo tyrimą dėl antikūnų buvimo. Imunoblotavimo metodas taip pat vadinamas Western blot. Jis naudojamas žmogaus virusinėms infekcijoms nustatyti kaip papildomas ekspertinis metodas. Būtina patvirtinti ELISA – laboratorinį tyrimą, leidžiantį nustatyti ŽIV antikūnų buvimą kraujyje. Teigiamas ELISA testas dar kartą patikrinamas imunoblotingu. Jis laikomas jautriausiu, sudėtingiausiu ir brangiausiu.

Tikslas

Kas yra imunoblotas? Tai laboratorinis metodas, skirtas kraujo serume tirti, ar nėra antikūnų prieš virusą. Tyrimo metu specialistas pirmiausia atskiria viruso baltymus gelyje ir perkelia juos į nitroceliuliozės membraną. Imunoblotavimo procedūra skirta ŽIV aptikimui įvairiais etapais. Pirmajame etape išgrynintas virusas iš jo sudedamųjų dalių yra elektroforezuojamas, o jo sudėtyje esantys antigenai yra atskiriami pagal molekulinę masę.

Jis dauginasi gyvoje ląstelėje, įterpdamas į ją savo genetinę informaciją. Šiame etape žmogus tampa ŽIV viruso nešiotoju, jei buvo užsikrėtęs. Ligos specifika yra ta, kad ji gali nepasireikšti ilgą laiką. Virusas naikina limfocitus, todėl sumažėja žmogaus imunitetas, organizmas tampa nebepajėgus atsispirti infekcijoms. Jei ŽIV bus gydomas teisingai ir laiku, pacientas gyvens iki senatvės. Gydymo trūkumas neišvengiamai veda prie mirties. Nuo užsikrėtimo momento, bet be gydymo, maksimali gyvenimo trukmė yra ne daugiau kaip dešimt metų.

Ypatumai

Imunoblotinė analizė yra patikimas metodas, leidžiantis nustatyti, ar yra antikūnų prieš pirmojo ir antrojo tipo ŽIV antigenus. Jei žmogus yra užsikrėtęs, per dvi savaites atsiranda antikūnų, kuriuos galima aptikti daug vėliau. ŽIV ypatumas yra tas, kad antikūnų kiekis greitai didėja ir išlieka paciento kraujyje. Net jei jie yra, liga gali nepasireikšti dvejus ar daugiau metų. ELISA metodas ne visada tiksliai nustato ligos buvimą, todėl, jei fermento imunologinis tyrimas rodo teigiamą rezultatą, būtina patvirtinti rezultatus naudojant imunoblotą ir PGR.

Naudojimo indikacijos

Kas yra „imunoblotas“, jau išsiaiškinta, bet kam šis tyrimas skirtas? Imunoblotingo tyrimo priežastis yra teigiamas ELISA rezultatas. Pacientams, kuriems bus atlikta operacija, būtina atlikti fermentinį imuninį tyrimą. Be to, moterys, planuojančios nėštumą, taip pat visi, kurie yra pasimetę, turėtų būti tikrinami. Imunoblotavimas skiriamas ŽIV užsikrėtusiems pacientams, jei kyla abejonių dėl ELISA rezultatų. Šie nerimą keliantys simptomai gali būti priežastis kreiptis į gydytoją:

• staigus svorio kritimas;
• silpnumas, veiklos praradimas;
• žarnyno sutrikimas (viduriavimas), trunkantis tris savaites;
• kūno dehidratacija;
• karščiavimas;
• padidėję limfmazgiai ant kūno;
• kandidozės, tuberkuliozės, pneumonijos, toksoplazmozės vystymasis, herpeso paūmėjimas.

Prieš duodamas veninį kraują pacientui ruoštis nereikia. Jūs neturėtumėte valgyti 8-10 valandų prieš tyrimą. Dieną prieš kraujo davimą nerekomenduojama gerti alkoholinių ar kavos gėrimų, užsiimti sunkiu fiziniu krūviu, jausti nerimą.

Kur atlikti analizę?

Kur galiu išsitirti dėl ŽIV? ELISA ir imunoblotų tyrimai atliekami miesto privačiose klinikose, rezultatai pateikiami per 24 val. Galima ir skubi diagnozė. Valstybinėse gydymo įstaigose ELISA tyrimai ir imunoblotingas atliekami nemokamai, remiantis Rusijos Federacijos teisės aktais. Nėščios moterys, taip pat pacientai, gydomi ligoninėje ar atliekama operacija, privalo pasitikrinti dėl infekcinių ligų.

Kaip atliekamas tyrimas?

Kaip atliekama ELISA analizė? Teigiamas/neigiamas imunoblotas patvirtina arba paneigia fermento imunologinio tyrimo rezultatus. Tyrimo procedūra yra gana paprasta. Specialistas paima veninį kraują, kuris trunka ne ilgiau kaip penkias minutes. Paėmus mėginius, injekcijos vietą reikia dezinfekuoti ir uždengti juostele. Mėginiai imami nevalgius, todėl po procedūros nepakenks suvalgyti plytelę juodojo šokolado ar išgerti saldaus karšto gėrimo.

Norint gauti siuntimą nemokamai pasitikrinti valstybinėje gydymo įstaigoje, reikia apsilankyti pas bendrosios praktikos gydytoją. Apskritai imunoblotingas mėginių ėmimo metodu nesiskiria nuo kitų kraujo tyrimų. Tyrimo metodika paprasta. Jei žmogaus kraujyje yra viruso, organizmas pradeda gaminti antikūnus, kad jį sunaikintų. Kiekvienas virusas turi savo antigenų baltymų rinkinį. Šių antikūnų aptikimas yra imunoblotavimo technikos pagrindas.

Kaina

Kiek kainuoja analizė? ŽIV imunoblotas nėra pigus testas. Vidutiniškai atrankos tyrimas naudojant fermentų imunologinius metodus kainuoja nuo 500 iki 900 rublių. Imunoblotavimas yra patikrinimo tyrimas, kurio kaina yra nuo trijų iki penkių tūkstančių rublių. Sudėtingesni metodai yra daug brangesni. Pavyzdžiui, turėsite sumokėti apie 12 000 rublių.

Rezultato interpretacija

Dažniausi ŽIV infekcijos diagnozavimo metodai yra su fermentais susiję imunosorbento tyrimai ir imunoblotai. Jie naudojami imunodeficito viruso antikūnams nustatyti kraujo serume. Infekcijos buvimas paprastai patvirtinamas dviem tyrimais: patikra ir patvirtinamuoju. Tyrimo rezultatų aiškinimą turi atlikti gydytojas, kuris taip pat nustato diagnozę ir paskirs gydymą. Jei imunoblotas yra teigiamas, tai reiškia, kad žmogaus organizme yra virusas.

Teigiamas rezultatas neturėtų būti savarankiško gydymo priežastis, nes kiekvienas pacientas gali turėti skirtingą ligos vaizdą. Kokybinė analizė apima atranką ir patikrinimą. Jei pacientas neturi viruso, rezultatas nurodomas kaip „neigiamas“. Jei aptinkama atrankos metu, atliekamas papildomas patikros tyrimas. Imunoblotas yra tyrimas, kuris patvirtina arba paneigia patikrinimą. Jei bandymo juostelėje tam tikrose vietose (baltymų vietose) atsiranda tamsybių, nustatoma ŽIV diagnozė. Jei rezultatai abejojami, tyrimai atliekami per tris mėnesius.

Užsikrėsti imunodeficito virusu galite, jei laikysitės tam tikrų taisyklių: venkite atsitiktinių lytinių santykių, kontakto metu naudokitės prezervatyvu, nevartosite vaistų. Jei liga nustatoma nėščiai moteriai, svarbu griežtai laikytis gydančio gydytojo rekomendacijų ir nepamiršti pasitikrinti, ar nėra viruso.

Rusijoje dabartinė standartinė ŽIV infekcijos laboratorinės diagnostikos procedūra yra antikūnų prieš ŽIV nustatymasnaudojant fermentinį imuninį tyrimą po to patvirtinamas jų specifiškumas reakcijoje imunoblotingas.

Antikūnai prieš ŽIV atsiranda 90-95% užsikrėtusių žmonių per 3 mėnesius po užsikrėtimo, 5-9% - 6 mėnesius po užsikrėtimo ir 0,5-1% - vėliau. Ankstyviausias antikūnų aptikimo laikas yra 2 savaitės nuo užsikrėtimo momento.

Antikūnų prieš ŽIV aptikimas apima 2 etapus. Pirmajame etape Bendras antikūnų prieš ŽIV antigenus spektras nustatomas naudojant įvairius testus: su fermentais susietą imunosorbentą, agliutinacijos, kombinuotą, šukos, membranos filtravimo ar membranos difuzijos testus. Antrame etape Imunoblotavimas naudojamas antikūnams prieš atskirus viruso baltymus nustatyti. Leidžiama naudoti tik bandymo sistemas, turinčias Rusijos Federacijos sveikatos apsaugos ministerijos leidimą. Diagnostinės procedūros turėtų būti atliekamos tik pagal patvirtintas atitinkamų tyrimų naudojimo instrukcijas.

Kraujo surinkimas gaminamas iš kubitalinės venos į švarų, sausą mėgintuvėlį po 3-5 ml. Virkštelės kraują galima paimti iš naujagimių. Nerekomenduojama susidariusios medžiagos (viso kraujo) laikyti kambario temperatūroje ilgiau nei 12 valandų ir šaldytuve ilgiau nei 1 parą 4-8°C temperatūroje. Vykstanti hemolizė gali turėti įtakos tyrimo rezultatams. Serumas atskiriamas centrifuguojant arba cirkuliuojant krauju vamzdelio sienele Pasteur pipete arba stikline lazdele. Atskirtas serumas perpilamas į švarų (geriausia sterilų) tūbelę, buteliuką ar plastikinį indą ir tokioje formoje gali būti laikomas iki 7 dienų 4-8°C temperatūroje. Dirbant reikia laikytis saugos taisyklių, pateiktų 1990-07-05 „Antiepideminio režimo AIDS diagnostikos laboratorijose instrukcijos“ Nr.42-28/38-90.

Bendrų antikūnų prieš ŽIV nustatymas.

Gavus pirmąjį teigiamą rezultatą, analizė atliekama dar 2 kartus (su tuo pačiu serumu ir ta pačia testavimo sistema). Jei gautas bent vienas teigiamas rezultatas (du teigiami rezultatai iš trijų ELISA testų), serumas siunčiamas į etaloninę laboratoriją.

Etaloninėje laboratorijoje pirminis teigiamas serumas (tai yra, kuris davė du teigiamus rezultatus pirmoje bandymų sistemoje) pakartotinai tiriamas ELISA metodu antroje (skirtingoje) bandymų sistemoje, pasirinktoje patvirtinimui.

Jei antroje bandymų sistemoje gaunamas teigiamas tyrimo rezultatas, serumas turi būti tiriamas IB.

Jei antroje bandymų sistemoje gaunamas neigiamas rezultatas, serumas pakartotinai tiriamas trečiojoje bandymo sistemoje.

Jei tiek antroje, tiek trečioje tyrimų sistemoje gaunamas neigiamas tyrimo rezultatas, išduodama išvada apie antikūnų prieš ŽIV nebuvimą.

Jei trečioje tyrimo sistemoje gaunamas teigiamas rezultatas, serumas taip pat siunčiamas imunoblotiniam tyrimui.

Imunoblotingas.

Metodo principas – aptikti antikūnus prieš tam tikrus viruso baltymus, imobilizuotus ant nitroceliuliozės membranos. ŽIV-1 apvalkalo baltymai (env) paprastai vadinami glikoproteinais ("gp" arba "gp"), kurių molekulinė masė išreiškiama kilodaltonais (kd): 160 kd, 120 kd, 41 kd. ŽIV-2 glikoproteinų svoris yra 140 kd, 105 kd, 36 kd. ŽIV-1 pagrindinių baltymų (gag) (paprastai vadinamų baltymais - „p“ arba „p“) molekulinė masė yra atitinkamai 55 kd, 24 kd, 17 kd, o ŽIV-2 – 56 kd, 26 kd, 18 kd. ŽIV-1 fermentų (pol) molekulinė masė yra 66 kd, 51 kd, 31 kd, ŽIV-2-68 kd.

Imunoblotavimo rezultatai interpretuojami kaip teigiami, dviprasmiški arba neigiami.

Teigiamas(teigiami) laikomi mėginiais, kuriuose aptinkami antikūnai prieš 2 arba 3 ŽIV glikoproteinus.

Neigiamas(neigiami) yra laikomi serumais, kuriuose neaptikta jokių antikūnų prieš bet kurį ŽIV antigeną (baltymus).

Atsižvelgiama į mėginius, kuriuose yra antikūnų prieš vieną ŽIV glikoproteiną ir (arba) bet kuriuos ŽIV baltymus abejotinas(neapibrėžta arba neinterpretuojama).

Jei imunoblotuojant su ŽIV-1 antigenais gaunamas abejotinas rezultatas su antikūnais prieš pagrindinius baltymus (gag), atliekamas tyrimas su ŽIV-2 antigenais.

Jei gaunami teigiami imunoblotavimo rezultatai, daroma išvada apie antikūnų prieš ŽIV buvimą tiriamojoje medžiagoje.

Gavęs neigiamą testo rezultatą, informacijos saugos skyrius išduoda išvadą apie antikūnų prieš ŽIV nebuvimą.

Jei gaunamas neapibrėžtas rezultatas (jei neaptiktas p24 antigenas), pakartotiniai antikūnų prieš ŽIV tyrimai atliekami po 3 mėn.

ir toliau neapibrėžtais rezultatais dar po 3 mėnesių. Jei buvo aptiktas p24 antigenas, pakartotinis tyrimas atliekamas praėjus 2 savaitėms po pirmojo neapibrėžto rezultato.

Jei praėjus 6 mėnesiams po pirmojo tyrimo vėl gaunami neapibrėžti rezultatai, o pacientas neturi infekcijos rizikos veiksnių ir klinikinių ŽIV infekcijos simptomų, rezultatas vertinamas kaip klaidingai teigiamas. (Jei yra epidemiologinių ir klinikinių indikacijų, serologiniai tyrimai kartojami taip, kaip nurodyta).

Imuninis blotavimas naudojant rekombinantinius virusui specifinius polipeptidus „HIV Blot“ išsiskiria tuo, kad naudojami ne patys viruso baltymai, o rekombinantiniai polipeptidai – ŽIV antigenų analogai („Env1“, „Gag1“, „Poll“, „Env2“). ). Rekombinantinis polipeptidas „Env1“ iš karto aptinka antikūnus prieš ŽIV-1 gp120 ir gp41, „Gag1“ polipeptidą prieš p17 ir p24 antigenus, „Po11“ polipeptidą prieš p51 antigeną, „Env2“ polipeptidą prieš ŽIV-2. gp110 ir gp38 antigenai. Serumas, kuris reaguoja su Env1 arba Env2 arba abiem Env, laikomas teigiamu (dviguba 1 ir 2 tipo ŽIV infekcija). Reakcija tik su Poll ir Gag yra laikoma dviprasmišku rezultatu, tokiu atveju tolesnis stebėjimas yra panašus į dviprasmiškų (neapibrėžtų) klasikinio imunoblotingo, naudojant ŽIV lizatą, rezultatus.

Vaikų, gimusių iš ŽIV infekuotų motinų, serologinės ŽIV infekcijos diagnostikos ypatumai yra tai, kad tiek užsikrėtusiems, tiek neinfekuotiems vaikams per pirmuosius 6-12 gyvenimo mėnesių nustatomi motinos kilmės antikūnai prieš ŽIV, kurie vėliau gali išnykti. Kriterijus, nurodantis, kad vaikas yra užsikrėtęs ŽIV, yra antikūnų prieš ŽIV aptikimas sulaukus 18 mėnesių ir vyresni. Antikūnų prieš ŽIV nebuvimas 18 mėnesių vaikui, gimusiam iš ŽIV užsikrėtusios motinos, yra kriterijus, prieštaraujantis ŽIV infekcijai.

apibūdinimas

Nustatymo metodas Imunoblotas.

Tiriama medžiaga Kraujo serumas

Galimas vizitas į namus

Antibranduoliniai antikūnai yra autoantikūnų, kurie jungiasi su ribonukleino rūgštimis ir su jomis susijusiais baltymais, šeima. Jie atsiranda daugiau nei 90% pacientų, sergančių difuzinėmis jungiamojo audinio ligomis, taip pat dažnai stebimi sergant autoimuninėmis kepenų ligomis ir daugeliu kitų būklių. Iki šiol buvo apibūdinta apie 200 šios autoantikūnų šeimos atmainų, tačiau ne visos jos gali būti naudojamos klinikinėje praktikoje.

Antibranduolinių antikūnų imunoblotas leidžia vienu tyrimu vienu metu ištirti 15 pagrindinių antinuklearinių antikūnų tipų, o tai užtikrina pagrindinių sisteminių reumatinių ligų diferencinę diagnostiką. Kiekvienas autoantikūnų tipas, nustatytas naudojant imunoblotą, dažniausiai stebimas pacientams, turintiems būdingą klinikinį vaizdą, todėl autoantikūnų spektras leidžia ne tik diagnozuoti ligą, bet ir nustatyti tam tikrų klinikinių apraiškų išsivystymo riziką.

Antrame serologinio tyrimo etape patartina naudoti antibranduolinių antikūnų imunoblotą, jei kitų tyrimų rezultatas yra teigiamas, rodantis, kad paciento serume yra antibranduolinių antikūnų. Tokie tyrimai apima antibranduolinių antikūnų nustatymą (ELISA atranka), antibranduolinio faktoriaus (ANF) nustatymą ant Hep2 ląstelių (), antibranduolinių antikūnų ir antikūnų prieš ekstrahuojamą branduolinį antigeną (ENA).

Antinuklearinių antikūnų imunoblotavimo metodas diagnozuojant sistemines reumatines ligas pasižymi dideliu klinikiniu specifiškumu. Tačiau ne visada galima nustatyti antibranduolinių antikūnų specifiškumą, net ir esant dideliems ANF titrai (), nes daugelis antibranduolinių antikūnų antigenų vis tiek lieka neapibūdinti. Neigiamas imunobloto rezultatas šiuo atveju neatmeta sisteminių reumatinių ligų diagnozės. Daugelį antinuklearinių antikūnų galima aptikti naudojant imunoblotą – miozitui specifinių autoantikūnų grupę () ir imunoblotą – sklerodermijos autoantikūnų grupę ().

Literatūra

1. Lapinas S.V. Totolyanas A.A. Imunologinė laboratorinė autoimuninių ligų diagnostika / Leidykla "Žmogus", Sankt Peterburgas - 2010. 272 ​​p.
2. Nasonovas E.L., Aleksandrova E.N. Šiuolaikiniai reumatinių ligų laboratorinės diagnostikos standartai. Klinikinės rekomendacijos / BHM, M - 2006.
3. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantikūnai organų specifinėse autoimuninėse ligose: diagnostikos nuoroda/ PABST, Drezdenas – 2011. 300 p.
4. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantikūnai sisteminėse autoimuninėse ligose: diagnostikos nuoroda/ PABST, Drezdenas – 2007. 300 p.
5. Gershvin ME, Meroni PL, Shoenfeld Y. Autoantibodies 2nd ed./ Elsevier Science – 2006. 862 p.
6. Shoenfeld Y., Cervera R, Gershvin ME Diagnostic Criteria in Autoimune Diseases / Humana Press – 2008. 598 p.
7. Reagentų rinkinio instrukcijos.

Paruošimas

Pageidautina palaukti 4 valandas po paskutinio valgio, nėra jokių privalomų reikalavimų.

Naudojimo indikacijos

Tyrimas skirtas šių būklių diagnozei ir diferencinei diagnozei:

• sisteminė raudonoji vilkligė;
• poūmė odos vilkligė ir kitos odos vilkligės rūšys;
• mišri jungiamojo audinio liga;
• Sjögreno sindromas ir susijusios ligos;
• difuzinė ir lokalizuota sklerodermija, CREST sindromas;
• uždegiminės miopatijos (polimiozitas ir dermatomiozitas);
• nepilnamečių lėtinis artritas;
• autoimuninis hepatitas;
• pirminė tulžies cirozė ir sklerozuojantis cholangitas;
• šio tyrimo naudojimas nurodomas, kai nustatomi dideli antibranduolinio faktoriaus, antibranduolinių antikūnų, antikūnų prieš ekstrahuojamą branduolinį antigeną, antikūnų prieš DNR, antikūnus prieš nukleosomas ir antifosfolipidinius antikūnus.

Rezultatų interpretacija

Tyrimo rezultatų interpretacijoje pateikiama informacija gydančiam gydytojui ir tai nėra diagnozė. Šiame skyriuje pateikta informacija neturėtų būti naudojama savidiagnostikai ar savęs gydymui. Tikslią diagnozę gydytojas nustato naudodamas tiek šio tyrimo rezultatus, tiek reikiamą informaciją iš kitų šaltinių: ligos istoriją, kitų tyrimų rezultatus ir kt.

Matavimo vienetai: kokybinis testas, rezultatas pateikiamas „aptikta“ arba „neaptikta“ forma.

Kai aptinkama juosta, apibūdinanti bet kokio tipo antikūnų buvimą, juostos spalvos intensyvumas papildomai apibūdinamas pliusų ("kryžių") skaičiumi kiekvienam identifikuotam antikūnų tipui. Teigimo laipsnio padidėjimas netiesiogiai atspindi autoantikūnų turinį ir afinitetą.

Pamatinės reikšmės: antikūnai prieš Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kDa), SS-A (52 kDa), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENP-B, dsDNR, histoną, nukleozomą , Rib P, AMA-M2, Jo-1 neaptikta.

Autoantikūnų nustatymo rezultatas pateikiamas „kryžiukais“ kiekvienam atitinkamam antigenui. Seropozityvumo laipsnio padidėjimas netiesiogiai atspindi autoantikūnų kiekį ir afinitetą. Toliau pateikiamos seropozityvumo vertinimo rezultato parinktys:

1. Nebuvo aptikta jokių antikūnų.
2. +/- - ribinis rezultatas;
3. + – mažas autoantikūnų prieš specifinį antigeną kiekis;
4. ++ – vidutinis autoantikūnų prieš specifinį antigeną kiekis;
5. +++ – didelis autoantikūnų prieš specifinį antigeną kiekis.

Pagrindinės ligos, susijusios su antinuklearinių antikūnų nustatymu:

Skiriamieji bruožai:

• Reagentų rinkinyje „MPBA - Blot - HIV-1, HIV-2“ yra išgryninti lizato viruso baltymai ŽIV 1 ir peptidas - ŽIV-2 antigeninis determinantas gp36;
• Užtikrina antikūnų prieš ŽIV-1, ŽIV-1 O grupės, ŽIV 2 aptikimą vienoje juostelėje;
• Paprasta testų paruošimo ir atlikimo procedūra;
• Vidinė reakcijos kokybės kontrolė*
• Maksimalus analizės greitis (3 valandos);
• Mažas tiriamojo mėginio tūris - 20 µl;
• Nereikalauja papildomos įrangos tyrimams;
• Rinkinio kokybę garantuoja rusiškų ir tarptautinių standartų pavyzdžiai**

* Vidinę kokybės kontrolę užtikrina:

• vidinės kontrolės juostelės, leidžia kontroliuoti serumo ar plazmos mėginio įvedimą;
• kontrolinis neigiamas serumas (K-);
• kontrolinis teigiamas serumas (K+), leidžiantis identifikuoti juostelėje aptiktas juostas;
• kontrolinis silpnai teigiamas serumas (K+cl), kuris leidžia kontroliuoti reagento rinkinio jautrumą.

**Kokybės užtikrinimas:

MPBA-Blot-HIV-1, ŽIV-2 reagentų rinkinio charakteristikos buvo nustatytos tiriant mėginius iš atsitiktinės donorų imties, pacientų, kuriems diagnozuota ŽIV infekcija, komercines serokonversijos grupes, standartines paneles ir mėginius, kurie „galimai trukdo determinacija“ komponentai.

Reagentų rinkinys neduoda klaidingai teigiamų rezultatų tiriant standartinius skydo serumus, kuriuose nėra antikūnų prieš ŽIV 1,2 ir ŽIV-1 antigeną („AT (-) HIV Standard“, Nr. FSR 2007/00953, 2007-10-25 ). Specifiškumas – 100%.

Diagnostinis specifiškumas buvo nustatytas ištyrus atsitiktinę 200 donorų atranką iš įvairių kraujo centrų ir klinikų, kuriems anksčiau buvo patvirtinta, kad nėra ŽIV-1 ir ŽIV-2 infekcijos. Specifiškumas tiriant atsitiktinę donorų imtį buvo 100 %;

Reagentų rinkinio specifiškumas buvo nustatytas ištyrus 250 mėginių, įskaitant serumo ar plazmos mėginius, gautus iš nėščių moterų, hospitalizuotų pacientų, pacientų, sergančių hepatitu C ir E, ir mėginius su „potencialiai trukdančiais“ komponentais. Šiems mėginiams naudojant MPBA-Blot-HIV-1, ŽIV-2 rinkinį, klaidingai teigiamų rezultatų nebuvo aptikta.

Diagnostinis jautrumas buvo nustatytas naudojant:
- plazmos mėginiai iš Boston Biomedica, Inc. ŽIV-1 grupės (WWRB 301) iš skirtingų regionų, kuriuose yra skirtingų ŽIV-1 potipių: M grupės (A, B, C, D, E, F potipiai) ir O grupės; reagento rinkinio jautrumas buvo 100 %;

Reagentų rinkinio jautrumas buvo nustatytas atliekant tarptautinių serokonversijos plokščių tyrimą Boston Biomedica, Inc (SeraCare Life Sciences), kat. nrs. PRB 903, PRB 904, PRB 909, PRB 912, PRB 916, PRB 917, PRB 918, PRB 919, PRB 921, PRB 923, PRB 924, PRB 927, PRB 928, PRB 930.

Reagentų rinkinys aptinka antikūnus prieš ŽIV-1 standartinės grupės, kurioje yra antikūnų prieš ŽIV-1 („AT (+) HIV-1 Standard“, Nr. FSR 2007/00953, 2007 m. spalio 25 d.), serumuose, aptinka antikūnus prieš ŽIV-1. ŽIV-2 standartiniuose skydiniuose serumuose, kuriuose yra antikūnų prieš ŽIV-2 („AT (+) HIV-2 Standard“, Nr. FSR 2007/00953, 2007 m. spalio 25 d.). Jautrumas – 100%.

2011 m. liepos 13 d. registracijos liudijimas Nr. FSR 2010/07958 (galiojimas neribotas)

Junginys:

• Imunosorbentas. Baltos nitroceliuliozės membranos juostelės su atskirais ŽIV-1 baltymais (gp160, gp120, p66, p55, p51, gp41, p31, p24, p17) ant jų buvo sorbuotos elektrotransferiniu būdu ir užteptos ant juostelės su sintetiniu ŽIV-2 peptidu, analogu. gp36 baltymo ir anti-IgG-žmogaus (vidinė kontrolė) - 18 vnt.;
• K- – kontrolinis neigiamas serumas. Žmogaus kraujo serumas, kuriame nėra antikūnų prieš ŽIV-1,2, HCV, ŽIV antigeną, HBsAg, inaktyvuojamas kaitinant 560C temperatūroje; skaidrus šviesiai geltonas skystis - 1 mėgintuvėlis (0,08 ml). Sudėtyje yra konservantų: timerosalio ir natrio azido;
• K+ – kontrolinis teigiamas serumas. Žmogaus kraujo serumas, kuriame yra antikūnų prieš ŽIV-1,2 (titras ne mažesnis kaip 1:10000), neturintis HBsAg, ŽIV antigeno, antikūnų prieš HCV, inaktyvuojamas kaitinant 560C temperatūroje; skaidrus šviesiai geltonas skystis - 1 mėgintuvėlis (0,08 ml) Sudėtyje yra konservantų: timerosalio ir natrio azido;
• K+sl – kontrolinis silpnai teigiamas serumas. Žmogaus kraujo serumas, kuriame yra antikūnų prieš ŽIV-1,2 (titras ne didesnis kaip 1:200), neturintis HBsAg, ŽIV antigeno, antikūnų prieš HCV, inaktyvuojamas kaitinant 560C temperatūroje; skaidrus šviesiai geltonas skystis - 1 mėgintuvėlis (0,08 ml). Sudėtyje yra konservantų: timerosalio ir natrio azido;
• RPOKk (x10) - tirpalas mėginiams ir konjugatui skiesti. Koncentratas – Tris buferis, kuriame yra iš anksto apdorotas normalus ožkos serumas; nepermatomas pilkas skystis - 1 buteliukas (10 ml). Sudėtyje yra konservantų: timerosalio;
• PRk (x20) - plovimo tirpalas. Koncentratas – Tris buferis, kuriame yra Tween-20; skaidrus bespalvis skystis - 1 buteliukas (70 ml). Sudėtyje yra konservantų: timerosalio;
• Konjugatas. Ožkos anti-žmogaus IgG antikūnai, konjuguoti su šarmine fosfataze; skaidrus bespalvis skystis - 1 mėgintuvėlis (0,06 ml);
• Substratas (dažymasis tirpalas). 5-brom-4-fluorindolilfosfato (BCIP) ir nitromėlynojo tetrazolio (NBT) tirpalas; skaidrus šviesiai geltonas skystis - 1 butelis (50 ml);
• Milteliai imunoblotavimui. Nugriebto pieno milteliai - amorfiniai balti arba šviesiai geltoni milteliai - 5 pak. x 1g;
• Tabletė su dangteliu reakcijai nustatyti - 2 vnt.;
• Plastikiniai pincetai - 1 vnt.