Masinis kraujo paėmimas iš didelių gyvulių galvijai(galvijai) – tai daug darbo reikalaujanti ir gyvūną traumuojanti procedūra. Dėl probleminės Rusijos galvijų populiacijos būklės, atsižvelgiant į pagrindinius sergamumo tipus, šis darbas yra dažna ir neišvengiama procedūra, kuria siekiama pagerinti gyvūnų sveikatą.
Šiuo atžvilgiu neatidėliotinas uždavinys yra sukurti naujus, patikimus, netraumuojančius ir mažiausiai darbo reikalaujančius kraujo paėmimo iš galvijų metodus. Vakuuminių švirkštų - konteinerių naudojimas, kaip parodė praktika keliuose Rusijos Federacijos regionuose, gali radikaliai pakeisti kraujo paėmimo iš galvijų technologiją.
Kalbame ne tik apie kraujo paėmimo procedūros supaprastinimą, kas savaime yra svarbu, bet ir apie ženkliai sumažintą ikianalitinių klaidų procentą, padidinant procedūros saugumą, sumažinant gyvulių užsikrėtimo riziką, palaikomą primilžis po procedūros ir komplikacijų nebuvimas gyvūnams po kraujo paėmimo.
Nusistovėjęs kraujo paėmimo iš galvijų metodas
Be to, reikia paruošti stiklinius indus, pridėti antikoagulianto bendriesiems hematologiniams tyrimams, išskirti serumą ir pašalinti krešulį atliekant tyrimus, kuriems reikalingas serumas.
Nustatyto kraujo paėmimo iš metodo trūkumai jugulinė vena kraujo nuleidimo adata:
Adata įduriama 90° kampu, kol sustos iki 5-10 mm gylio.
Kraujo paėmimo naudojant saugias sistemas iš uodegos venos privalumai:
Jo praktinė veikla veterinarijos specialistams įgyvendinant antiepizootinių priemonių planą, taip pat neįtraukiant tam tikrų užkrečiamos ligos Būtina paimti gyvūnų kraujo mėginius. Šiuo atveju iš arklių, galvijų, kupranugarių, elnių, avių ir ožkų kraujas imamas iš viršutiniame kaklo trečdalyje esančios jungo venos. Adatos kraujui paimti turi būti sterilizuojamos virinant. Iš kiekvieno gyvūno imamas kraujas su atskira adata. IN pastaraisiais metais kraujas renkamas iš gyvūnų vakuuminiai vamzdeliai arba vienkartiniai švirkštai iš poodinės venos.
1. Kailis kraujo paėmimo vietoje kruopščiai nukirptas, oda dezinfekuojama 70% alkoholiu.
2. Imdamas kraują specialistas turi užtikrinti, kad kraujas vamzdelio sienele tekėtų srovele, o ne lašeliais. Kraujas, paimtas lašais ir suputotas, dažniau hemolizuoja ir dažnai pateikia neteisingus tyrimo rezultatus. Kraujo paėmimo metu veterinarijos gydytojas turi tai užtikrinti kraujas nepateko į lesyklą ir ant žemės. Tam paimdamas kraują iš venos veterinarijos gydytojas turi naudoti indą su dezinfekuojančiu skysčiu, į kurį nuleidžiama pirmoji kraujo dalis.
Kiaulių kraujas imamas iš ausies (adata ar švirkštu) arba iš uodegos galiuko. Prieš imant kraują, uodega nuplaunama muilu ir vandeniu bei dezinfekuojama 70% alkoholiu, tada žirklėmis nupjaunamas galiukas. Paėmus kraują, uodegos galiukas apdorojamas jodu, sutvarstomas arba uždedamas.
Paukščiams kraujas imamas iš sparno arba šukutės venos. Kai tik įmanoma, reikia paimti kraują. ryte, prieš šeriant gyvūną.
3. Apimtis: Dėl serologinis tyrimas iš didelių gyvūnų kraujas imamas kiekiais 7-10ml, o iš smulkių gyvūnų 2-4ml tūrio.
4. Paimtas kraujas pastovėti apie valandą 30-35 laipsnių temperatūroje Dėl koaguliacija ir po to nunešama į vėsią patalpą nusistovėti.
5. Pristatymo laikas: kraujo serumas turi būti pristatytas į veterinarijos laboratoriją, per pirmąją dieną. Ir į išskirtiniais atvejais ne vėliau kaip trečią dieną po jo išgėrimo!!!
6. Siunčiant serumą dideliu atstumu, ypač vasarą, taip turi būti konservuoti su 5% karbolio rūgšties tirpalu druskos tirpalas 1 ml karbolio rūgšties tirpalo kiekvienam 9 ml serumo arba 1-2 lašai tirpalo 1 ml serumo.
Išrūgas taip pat galima konservuoti džiovinimas. Kad išdžiūtų, serumas tepamas ant 5*5 cm filtravimo popieriaus 0,4 ml kiekiu ir laikomas išsklaidytoje šviesoje, kol visiškai išdžius. Po to ant kiekvieno popieriaus su džiovintu serumu pieštuku daromi atitinkami užrašai ir įvyniojami į pergamentinį popierių (kiekvienas mėginys atskirai), o po to supakuojamas į voką ir tokia forma siunčiamas į laboratoriją.
7. Serologiniam tyrimui į laboratoriją gali būti siunčiamas visas kraujas, ypač iš netoliese esančių ūkių, neatskiriant serumo, tačiau su sąlyga, kad kelionės metu jis nebus sukratytas ir nebus hemolizė.
8. Žymėjimas: ant kiekvieno pavyzdžio kraujo serumas arba kraujas rodo ją serijos numeris, gyvūno inventorinis numeris (gyvūno vardas, gyvūno savininko pavardė).
9. Dizainas:Į motyvacinis laiškas kraujo mėginiams, kurie reguliariai siunčiami serologiniams ar hematologiniams tyrimams, Pridedamas pavyzdžių sąrašas 2 egzemplioriais.Žr. priedą Nr.1. (doc)
10. Pakavimas ir transportavimas: Mėgintuvėliai su krauju ar serumu sandariai uždaromi steriliais kamščiais ir pateikiami siuntimui griežtai kontroliuojamu būdu. vertikali padėtis(įjungta priekinė pusė Ant siuntinio viršuje turi būti užrašas „Atsargiai – stiklas! ir „Viršus“). Žiemą kraujas ir serumas supakuojami ir siunčiami taip, kad jie nesušalo.
„Kraujo paėmimas iš gyvūnų“
Baigė: 341 grupės mokinys
Vadovas: Kanarų. G.P.
Kraujo paėmimas iš gyvūnų Kraujo paėmimas iš galvijų Kraujo paėmimas iš arklių ir mažų galvijų Kraujo paėmimas iš kiaulių Kraujo paėmimas iš šunų. Kraujo paėmimas iš triušio Kraujo paėmimas iš jūrų kiaulytės Kraujo paėmimas iš žiurkių ir pelių Kraujo paėmimas iš paukščių
10. Kraujo paėmimas Šaripovo valstiečių ūkyje. M.G.
KRAUJO GAVIMAS IŠ GYVŪNŲ
Norint paimti kraują iš gyvūnų, apdorojamas chirurginis laukas (karpymas arba skutimas). plaukų linija, įtrinkite odą alkoholiu ir eteriu, tada įpjaukite (pradurkite) kraujagyslė arba įkišti į ją adatą, anksčiau sterilizuotą (1 pav.). Kai tik įmanoma, reikėtų vengti priverstinai suvaržyti gyvūnus kraujo paėmimo metu. Norėdami gauti kraujo iš mažų gyvūnų ir paukščių, jie kartais griebiasi širdies skilvelių punkcijos.
Ryžiai. 1. Adatos kraujui paimti. A-G - nuo ausies ir piršto; D-J – iš venos.
1 – nuimamas Frank adatos peiliukas, 2 – galvutė, 3 – judama veržlė, 4 – gaidukas
Kraujo paėmimas iš galvijų
Be to, reikia paruošti stiklinius indus, įpilti antikoaguliantų bendro kraujo kiekio tyrimams, išskirti serumą, pašalinti krešulį tyrimams, kuriems reikalingas serumas.
Nustatyto kraujo paėmimo iš jungo venos flebotomijos adata metodo trūkumai:
Kraujo aptaškymas; (kraujo patekimas ant rankų, tiektuvų ir kitų aplinkos objektų). Didelė rizika išplisti ne tik gyvūnams, bet ir žmonėms pavojingomis infekcijomis; (tuberkuliozė, bruceliozė, galvijų leukemija). Poreikis sutramdyti gyvūną. Stresas gyvūnui, dėl kurio netenka pieno (daugiau nei 5%). Komplikacijos po kraujo paėmimo; (hematomos,). Paimtas kraujas yra nesterilus (t.y. užterštas).
S-Monovette naudojimas radikaliai pakeičia kraujo paėmimo būdą.
3. Kraujo paėmimas iš arklių ir smulkių galvijų.
Nedideli kraujo kiekiai arklių tyrimams paimami iš ausies venos ją perpjaunant arba praduriant injekcine adata. Išbėgęs kraujas įsiurbiamas į pipetę arba surenkamas ant laikrodžio stiklo, prieš tai nuplaunamas antikoaguliantu. Avims taip pat galima pradurti po oda esančią veną vidinis kampas akys.
Norint gauti didelį kiekį kraujo, jungo venos punkcija atliekama ties viršutinio ir vidurinio kaklo trečdalio riba. Pritvirtinus gyvūną kairės rankos nykščiu, vena užspaudžiama žemiau punkcijos vietos (didiems ir mažiems galvijams uždedamas guminis turniketas), o tada oda ir venos sienelė praduriama kraujo nuleidimu ar antpilu. adata. Adata įduriama prieš kraujotaką 45° kampu. Kraujas surenkamas į sterilų indą. Norint gauti kraują iš giliai gulinčių kraujagyslių (portalinių, kepenų, užpakalinių tuščiavidurių, bendrųjų mezenterinių, žandikaulių ir kt. venų), jos kateteriuojamos naudojant nailoninius arba tefloninius kateterius.
Ryžiai. 2. Kraujo paėmimas iš arklio iš jungo venos.
Didelių gyvūnų kraujui paimti naudojami automatiniai prietaisai. Jie turi skirtingą dizainą, tačiau juose būtinai yra korpusas, adatos laikiklis, laikikliai mėgintuvėliams ir smūgio mechanizmas su spyruokle.
Kraujo paėmimas iš kiaulės.
Kiaulėms nedidelis kraujo kiekis gaunamas skalpeliu perpjaunant didžiąją ausies veną. Centrinis kraujagyslės galas prie ausies šaknies suspaudžiamas pirštais. Norint gauti didelį kiekį kraujo, žirklėmis arba skalpeliu nupjaunama 1–1,5 cm ilgio uodegos gabalėlis, baigiantis kraujo nuleidimui, žaizda dezinfekuojama, o uodegos galiukas suspaudžiamas guminiu žiedu arba uždengtas tvarsčiu 1–2 dienas.
5. Kraujo paėmimas iš šunų.
Nedideli šunų ir kačių kraujo kiekiai gaunami perpjaunant ausies kraštą arba pradūrus minkštąją pėdos dalį. Norint gauti dideles kraujo dalis, punkcija į priekinę padikaulio veną, esančią ant išorinis paviršius blauzdos.
Gyvūnas paguldomas ant šono arba tvirtinamas garde; galūnės suspaudžiamos rankomis arba žemiau esančiu turnike kelio sąnarys. Adata pirmiausia perduriama oda, paskui venos sienelė. Kraujas įsiurbiamas į švirkštą.
6. Kraujo paėmimas iš triušių.
Nedideli kiekiai kraujo gaunami iš triušių perpjaunant arba praduriant veną, esančią plonojo ausies krašto išorėje. Gyvūnas apvyniojamas rankšluosčiu arba įdedamas į dėžutę su skylute galvai; ausis pirmiausia panardinama į šiltą vandenį arba nušluostoma
ksilenas (alkoholis).
Kraujo nuleidimo vieta taip pat gali būti krūtinės vena– v. thoracica externa, esanti krūtinės šone. Po apdorojimo chirurginis laukas(nuo alkūnkaulio gumburo iki trečiojo šonkaulio) vena suspaudžiama pirštu prie alkūnės. Adata įduriama prieš kraujotaką.
Kartais jie griebiasi širdies punkcijos. Adata įduriama į trečią tarpšonkaulinį tarpą kairėje, 3-4 cm atstumu nuo išorinio krūtinkaulio krašto. Vienu metu iš triušio galima paimti iki 15-20 ml kraujo.
Nedideli kraujo kiekiai iš jūrų kiaulyčių gaunami perpjaunant ausies kraštą arba praduriant gyvulio pėdą Frank adata.
Norint gauti didelį kiekį kraujo, atliekama jungo venos punkcija (po odos pjūvio ir kraujagyslių paruošimo) arba širdies punkcija. Adata įduriama kairiajame krūtinkaulio krašte, toje vietoje, kur aiškiai jaučiamas širdies plakimas. Injekcijos kryptis į vidų link vidurio linijos, punkcijos gylis 1,5-2 cm Vienu metu galima paimti iki 5-10 ml kraujo.
Norint gauti kraujo iš žiurkių ir pelių, įpjaunama ausis arba nupjaunamas uodegos galas. Didelėse žiurkėse kraują galima gauti pradūrus uodegos veną.
Uodega panardinama į šiltą vandenį, po to išdžiovinama marle ir pirštais suspaudžiama prie šaknies; Į indą įkišama plona adata. Kraujas įsiurbiamas į švirkštą.
Kraujo paėmimas iš paukščio.
Nedidelis viščiukų ir kalakutų kraujo kiekis gaunamas pjaunant arba skarifikuojant šukas (auskarus). Žąsų ir ančių pėdų mėsa pradurta. IN dideli kiekiai paukščių kraujas gaunamas iš pažastinės venos, esančios ant vidinis paviršius sparnas Plunksnos išpešiamos, vena toje vietoje pirštu suspaudžiama alkūnės sąnarys, punkcija daroma kampu alkūnės lygyje.
Pirmiausia galite atskleisti indą trumpu odos pjūviu. Dėl didelio paukščių kraujo krešėjimo, pradūrimo vieta nušluostoma krešėjimą stabdančiu skysčiu. Išsiskyrę kraujo lašai pipete supilami į buteliuką arba surenkami į centrifugos mėgintuvėlį su antikoaguliantu. Paėmus kraują, pradūrimo vieta kelioms minutėms užspaudžiama tamponu.
Žąsų, ančių ir kalakutų kraujas gali būti gaunamas iš vidinės padikaulio venos, esančios po oda, viduriniame padikaulio paviršiuje, arčiau jo padų krašto. Vienu metu iš vištų, žąsų, kalakutų galite paimti iki 10-15 ml, o iš balandžių – 1-1,5 ml kraujo.
Jei reikia, gaukite iš viščiukų arterinio kraujo griebtis punkcijos miego arterija(po poveikio anestezuotam paukščiui) arba kairiojo širdies skilvelio punkcijai. Punkcija daroma kairėje V formos krūtinkaulio įpjovoje, adata nukreipta į peties sąnarys priešingoje pusėje (viščiukams) arba 45° kampu į sieną krūtinė, į priekį (viščiukams).
Kraujo paėmimas Šaripovo valstiečių ūkyje. M.G.
Ūkis __________________ yra Volosovskio rajone, Besedos kaime. Ūkis užsiima ūkinių gyvūnų (naminių paukščių ir avių) auginimu.
Ūkyje kartą per mėnesį visi gyvuliai tikrinami dėl paslėptų ligų. Buvo pakviestas į šį renginį veterinarijos gydytojas Petuhovas. A. A ir Besedskio žemės ūkio kolegijos 341 grupės studentai. Kraujo paėmimui skirta 31 avis.
Prieš pradėdamas dirbti Petukhovas. A. A paruošė visus reikalingus instrumentus kraujo paėmimui:
Vienkartinės adatos;
Dezinfekuojantis alkoholis;
Vakuuminė lempa;
Žymeklis (skirtas ant mėgintuvėlio pasirašyti gyvūno numerį ir vardą).
Gyvūnų suvaržymo technika:
Gyvūnų fiksavimą atliko du mokiniai. Ant viršaus užkėlęs gyvūną studentas, kuris įrašinėjo galvos dalis, prispaudžia galvą prie kojos. O antrasis laikė gyvūną iš nugaros ir tuo pačiu prisegė gyvūno numerį prie kailio, kuris buvo užrašytas ant audinio gabalo.
Kraujo paėmimas iš gyvūno:
Imame kraują iš jugulinės venos; Vietą, kur turėtų būti pradurta, dezinfekuojame alkoholiu; Nykščiu paspauskite veną apatiniame kaklo trečdalyje. Dėl kraujo nutekėjimo vėlavimo vena išsipučia virvelės pavidalu; Infuzine adata praduriame odą ir venos sienelę. Adatą įkišame prieš kraujotaką 45° kampu. Iš adatos teka kraujas, vadinasi, patekome į veną. Tada pakeičiame mėgintuvėlį ir išimame pusę kraujo. Ištraukę adatą, dūrio vietą patepkite vata su dezinfekuojančiu alkoholiu. Po visos procedūros ant mėgintuvėlio pasirašome krauju, kur nurodome gyvūno numerį. Ateityje panaudotą vienkartinę adatą ir vatą išmesime.
kraujo gyvūnų leukocitų hemoglobinas
Kraujo paėmimo ir jo konservavimo sąlygos prieš laboratoriniai tyrimai turėti svarbu kai gaunami patikimi rezultatai. Šie rezultatai labai priklauso nuo kraujo paėmimo technikos ir naudojamų instrumentų. Organizmas skiria arterinį, veninį ir kapiliarinį kraują, kuris turi nedidelių citologinių ir biocheminių skirtumų. Dėl morfologiniai tyrimai Jiems naudojamas beveik vien kapiliarinis kraujas, o biocheminiuose – veninis.
Kapiliarinis kraujas imamas iš vidinio paviršiaus ausies kaklelis. Plaukai kraujo paėmimo vietoje nupjaunami, o injekcijos vieta nuvaloma vatos tamponu, sudrėkintu eterio alkoholiu. Įpurškimas atliekamas iki 2 mm gylio. Nuplaunamas pirmasis kraujo lašas, nes... jame yra atsitiktinių priemaišų ir limfos, o vėlesnės paimamos tyrimams. Labai svarbu, kad kraujas ištekėtų iš žaizdos nedarydamas spaudimo audiniams, kitaip susimaišo su limfa ir keičiasi ląstelinė bei biocheminė sudėtis. Kraujo tekėjimą galima pagreitinti iš anksto pašildžius injekcijos vietą šiltas vanduo arba sausos šilumos šaltinis (plaukų džiovintuvas, elektrinė lempa).
Venipunktūros metu vienu žingsniu praduriamas veną supantis audinys ir venos sienelė. Kraujo paėmimo adatos turi būti trumpo kampo ir pakankamai didelio skersmens, kad nepažeistumėte priešingos venos sienelės ir nepažeistumėte raudonųjų kraujo kūnelių. Pirmiausia adatos sterilizuojamos verdant 1 % natrio bikarbonato tirpale, o injekcijos vieta apdorojama taip pat, kaip ir kapiliariniam kraujui gauti.
Imant kraują iš jungo venos, adata įduriama ties viršutinio kaklo trečdalio perėjimo į vidurinį trečdalį riba. Norint pakankamai užpildyti veną ir sumažinti jos paslankumą, vena gumele ar pirštu suspaudžiama kaklo viduryje. Praduriant veną, adatą reikia laikyti rankoje taip, kad jos kryptis sutaptų su venos linija, o adatos nuolydis būtų nukreiptas į viršų, į galvą. Adata įduriama smailiu kampu – 20-30°. Kai adata patenka į veną, kraujas išteka.
Kraujas turi tekėti vamzdelio sienele, kad būtų išvengta raudonųjų kraujo kūnelių sunaikinimo, ir, jei reikia, nedelsiant sumaišyti su pakankamu kiekiu antikoagulianto.
Prieš išimant adatą iš venos, nuimama guminė juostelė, vena pirštu suspaudžiama virš injekcijos vietos, adata nuimama ir injekcijos vieta tamponu kurį laiką suspaudžiama, kad nesusidarytų hematoma. . Galiausiai venų punkcijos vieta dezinfekuojama jodo tinktūra ir pripildoma kolodium.
Priklausomai nuo tyrimo pobūdžio, paruošiamas tam tikras skaičius mėgintuvėlių. Stiklo indų sienelės gali keistis jonais su krauju ir pėdsakais plovikliai o pažeisti vamzdeliai veikia fermentų aktyvumą. Tai gali būti pašalinta, jei naudosite plastikinius, vienkartinius vamzdelius; Kai kurių tyrimų metu stiklinių vamzdelių sienelės yra padengtos parafino arba silikoninės alyvos sluoksniu.
Atsižvelgiant į tyrimo tikslus, analizuojamas visas kraujas, plazma arba serumas.
IN viso kraujo nustatyti morfologinius parametrus, taip pat gliukozės, ketoninių kūnų, vario, cinko, kobalto, mangano, seleno ir kt., t.y. medžiagos, tolygiai paskirstytos tarp plazmos ir raudonųjų kraujo kūnelių. Norint ištirti medžiagas, kurios netolygiai pasiskirsto tarp ląstelių ir skystosios kraujo dalies, reikia naudoti serumą arba plazmą. Pavyzdžiui, serume jie tiria viso baltymo ir jos frakcijos, likutinis azotas, karbamidas, laisvosios aminorūgštys, lipidai, cholesterolis, bilirubinas, kalcis, neorganinis fosforas, magnis, su baltymais surištas jodas (PBI), karotinas, vitaminai, fermentai ir kt. Plazmoje – atsarginis šarmingumas, natrio, kalio, neorganinio fosforo kiekis, magnio, karotino, vitaminų A, C ir kt.
Norint gauti viso kraujo ar plazmos mėginį, jis stabilizuojamas, t.y. Į mėgintuvėlį įpilamas antikoaguliantas. Antikoaguliantus geriausia naudoti tirpalų pavidalu.
Norint gauti serumą, mėgintuvėlius su krauju rekomenduojama įdėti į termostatą, kurio temperatūra kraujo paėmimo metu yra iki 38°C. Masinės gyvūnų apžiūros metu toks improvizuotas termostatas gali būti pakankamas nurodytos temperatūros vandens indas. Užbaigus kraujo paėmimą, sukrešėję mėginiai apjuosiami plona nerūdijančio plieno viela, kad serumas geriau atskirtų, ir 1-2 valandoms patalpinami į termostatą 37-38°C temperatūroje, kad serumas būtų galutinai atskirtas. Serumas nusausinamas ir centrifuguojamas 20 minučių 2000-3000 aps./min.
Plazmai gauti kraujas su antikoaguliantu centrifuguojamas 20-30 minučių 2000-3000 aps./min. Kraujo plazma nuo serumo skiriasi tuo, kad yra fibrinogeno.
Visas kraujas, plazma ir serumas trumpalaikiam saugojimui dedami į šaldytuvą (+2...+4°C), ilgalaikiam serumo laikymui reikalinga -20°C temperatūra.
Mėginių laikymo sąlygų pažeidimas gali sukelti analizės klaidų. Dėl ilgo serumo stovėjimo virš raudonųjų kraujo kūnelių gali pasikeisti daugelio komponentų koncentracija: kalio koncentracija, rūgštinės fosfatazės, aminotransferazių, laktatdehidrogenazės, hidroksibutirato dehidrogenazės aktyvumas, didėja gliukozės kiekis, sumažėja gliukozės kiekis. dėl glikolitinių procesų. Esant maždaug 20°C temperatūrai, visame kraujyje padidėja amoniako kiekis, daugelis fermentų, net esant šaldytuvo temperatūrai, greitai praranda savo aktyvumą (kreatino kinazė, rūgštinė fosfatazė), laktatdehidrogenazė, priešingai, greičiau praranda aktyvumą. žemos temperatūros.
Eritrocitų hemolizė, vykstanti surinkimo ar saugojimo metu, padidina kalio koncentraciją, rūgštinės fosfatazės, aminotransferazių, laktatdehidrogenazės ir hidroksibutirato dehidrogenazės aktyvumą. Netinkamas mėginių kratymas maišymo ar transportavimo metu taip pat gali sukelti raudonųjų kraujo kūnelių hemolizę.
Kai diriguoja specialus tyrimas turite atidžiai stebėti, kaip įgyvendinamos specialios kraujo mėginių ėmimo, konservavimo ir laikymo taisyklės, nurodytos metodų aprašyme.
1. Gyvūnų kraujo tyrimas
Specialūs kraujo tyrimo metodai taikomi tais atvejais, kai būtina ir įmanoma nustatyti diagnozę tyrimo lygmeniu morfologinės savybės ląstelės tepinėlyje arba jų funkcinių savybių pokyčiai veikiami įvairių veiksnių. Pirmuoju atveju tyrimai atliekami naudojant citocheminius dažus, kurie specifiškai reaguoja su tam tikrais ląstelių intarpais ar komponentais; ląstelės funkcinės savybės nustatomos kaip atsakas į fizikinį ir cheminį poveikį.
1.1 Kraujo paėmimo iš gyvūno taisyklės
Norint gauti patikimus rezultatus, svarbios kraujo paėmimo ir jo konservavimo sąlygos iki laboratorinių tyrimų pradžios. Šie rezultatai labai priklauso nuo kraujo paėmimo technikos ir naudojamų instrumentų. Organizmas skiria arterinį, veninį ir kapiliarinį kraują, kuris turi nedidelių citologinių ir biocheminių skirtumų. Morfologiniams tyrimams beveik išimtinai naudojamas kapiliarinis kraujas, o biocheminiams – veninis.
Kapiliarinis kraujas imamas iš vidinio ausies kaušelio paviršiaus. Plaukai kraujo paėmimo vietoje nupjaunami, o injekcijos vieta nuvaloma vatos tamponu, sudrėkintu eterio alkoholiu. Įpurškimas atliekamas iki 2 mm gylio. Nuplaunamas pirmasis kraujo lašas, nes... jame yra atsitiktinių priemaišų ir limfos, o vėlesnės paimamos tyrimams. Labai svarbu, kad kraujas ištekėtų iš žaizdos nedarydamas spaudimo audiniams, kitaip susimaišo su limfa ir keičiasi ląstelinė bei biocheminė sudėtis. Kraujo tekėjimas gali paspartėti, jei injekcijos vietą iš anksto pašildysite šiltu vandeniu arba sauso karščio šaltiniu (plaukų džiovintuvu, elektrine lempa).
Venipunktūros metu vienu žingsniu praduriamas veną supantis audinys ir venos sienelė. Kraujo paėmimo adatos turi būti trumpo kampo ir pakankamai didelio skersmens, kad nepažeistumėte priešingos venos sienelės ir nepažeistumėte raudonųjų kraujo kūnelių. Pirmiausia adatos sterilizuojamos verdant 1 % natrio bikarbonato tirpale, o injekcijos vieta apdorojama taip pat, kaip ir kapiliariniam kraujui gauti.
Imant kraują iš jungo venos, adata įduriama ties viršutinio kaklo trečdalio perėjimo į vidurinį trečdalį riba. Norint pakankamai užpildyti veną ir sumažinti jos paslankumą, vena gumele ar pirštu suspaudžiama kaklo viduryje. Praduriant veną, adatą reikia laikyti rankoje taip, kad jos kryptis sutaptų su venos linija, o adatos nuolydis būtų nukreiptas į viršų, į galvą. Adata įduriama smailiu kampu – 20–30°. Kai adata patenka į veną, kraujas išteka.
Kraujas turi tekėti vamzdelio sienele, kad būtų išvengta raudonųjų kraujo kūnelių sunaikinimo, ir, jei reikia, nedelsiant sumaišyti su pakankamu kiekiu antikoagulianto.
Prieš išimant adatą iš venos, nuimama guminė juostelė, vena pirštu suspaudžiama virš injekcijos vietos, adata nuimama ir injekcijos vieta tamponu kurį laiką suspaudžiama, kad nesusidarytų hematoma. . Galiausiai venų punkcijos vieta dezinfekuojama jodo tinktūra ir pripildoma kolodium.
Priklausomai nuo tyrimo pobūdžio, paruošiamas tam tikras skaičius mėgintuvėlių. Stiklo indų sienelės geba keistis jonais su krauju, o ploviklių pėdsakai ir pažeisti mėgintuvėliai veikia fermentų veiklą. Tai gali būti pašalinta, jei naudosite plastikinius, vienkartinius vamzdelius; Kai kurių tyrimų metu stiklinių vamzdelių sienelės yra padengtos parafino arba silikoninės alyvos sluoksniu.
Atsižvelgiant į tyrimo tikslus, analizuojamas visas kraujas, plazma arba serumas.
Visame kraujyje nustatomi morfologiniai parametrai, taip pat gliukozės, ketoninių kūnų, vario, cinko, kobalto, mangano, seleno ir kt., t.y. medžiagos, tolygiai paskirstytos tarp plazmos ir raudonųjų kraujo kūnelių. Norint ištirti medžiagas, kurios netolygiai pasiskirsto tarp ląstelių ir skystosios kraujo dalies, reikia naudoti serumą arba plazmą. Serume, pavyzdžiui, bendras baltymas ir jo frakcijos, likutinis azotas, karbamidas, laisvosios aminorūgštys, lipidai, cholesterolis, bilirubinas, kalcis, neorganinis fosforas, magnis, su baltymais susijęs jodas (PBI), karotinas, vitaminai, fermentai ir kt. yra tiriami Plazmoje – atsarginis šarmingumas, natris, kalis, neorganinis fosforas, magnis, karotinas, vitaminai A, C ir kt.
Norint gauti viso kraujo ar plazmos mėginį, jis stabilizuojamas, t.y. Į mėgintuvėlį įpilamas antikoaguliantas. Antikoaguliantus geriausia naudoti tirpalų pavidalu.
Norint gauti serumą, mėgintuvėlius su krauju rekomenduojama įdėti į termostatą, kurio temperatūra kraujo paėmimo metu yra iki 38°C. Masinės gyvūnų apžiūros metu toks improvizuotas termostatas gali būti pakankamas nurodytos temperatūros vandens indas. Užbaigus kraujo paėmimą, sukrešėję mėginiai apjuosiami plona nerūdijančio plieno viela, kad serumas geriau atskirtų, ir 1-2 valandoms patalpinami į 37–38°C temperatūros termostatą, kad serumas būtų galutinai atskirtas. Serumas nusausinamas ir centrifuguojamas 20 minučių 2000–3000 aps./min.
Plazmai gauti kraujas su antikoaguliantu centrifuguojamas 20–30 minučių 2000–3000 aps./min. Kraujo plazma nuo serumo skiriasi tuo, kad yra fibrinogeno.
Visas kraujas, plazma ir serumas trumpalaikiam saugojimui dedami į šaldytuvą (+2...+4°C), ilgalaikiam serumo laikymui reikalinga –20°C temperatūra.
Mėginių laikymo sąlygų pažeidimas gali sukelti analizės klaidų. Dėl ilgo serumo stovėjimo virš raudonųjų kraujo kūnelių gali pasikeisti daugelio komponentų koncentracija: kalio koncentracija, rūgštinės fosfatazės, aminotransferazių, laktatdehidrogenazės, hidroksibutirato dehidrogenazės aktyvumas, didėja gliukozės kiekis, sumažėja gliukozės kiekis. dėl glikolitinių procesų. Esant maždaug 20°C temperatūrai, visame kraujyje padidėja amoniako kiekis, daugelis fermentų, net esant šaldytuvo temperatūrai, greitai praranda savo aktyvumą (kreatino kinazė, rūgštinė fosfatazė), laktatdehidrogenazė, priešingai, greičiau praranda aktyvumą esant žemai temperatūrai. temperatūros.
Eritrocitų hemolizė, vykstanti surinkimo ar saugojimo metu, padidina kalio koncentraciją, rūgštinės fosfatazės, aminotransferazių, laktatdehidrogenazės ir hidroksibutirato dehidrogenazės aktyvumą. Netinkamas mėginių kratymas maišymo ar transportavimo metu taip pat gali sukelti raudonųjų kraujo kūnelių hemolizę.
Atliekant specialius tyrimus, reikia atidžiai stebėti, kaip įgyvendinamos specialios kraujo mėginių ėmimo, konservavimo ir laikymo taisyklės, nurodytos metodų aprašyme.
1.2 Eritrocitų nusėdimo greičio (ESR) nustatymas
Eritrocitų nusėdimo greitis (ESR) – nespecifinis laboratorinė vertė kraujas, atspindintis plazmos baltymų frakcijų santykį; pasikeitus AKS gali pasitarnauti netiesioginis ženklas dabartinis uždegiminis ar kt patologinis procesas. Tyrimas pagrįstas raudonųjų kraujo kūnelių, neturinčių gebėjimo krešėti, gebėjimu nusistovėti veikiant gravitacijai. Šunims AKS paprastai neviršija 2–5 mm/val., o katėms – 6–10 mm/val.
Metodo principas yra toks. Raudonųjų kraujo kūnelių savitasis svoris viršija plazmos savitąjį svorį, todėl jie lėtai nusėda vamzdelio dugne. Raudonųjų kraujo kūnelių nusėdimo greitį daugiausia lemia jų agregacijos laipsnis, ty jų gebėjimas sulipti. Dėl to, kad formuojantis agregatams mažėja dalelių paviršiaus ploto ir jų tūrio santykis, eritrocitų agregatų atsparumas trinčiai yra mažesnis nei bendras atskirų eritrocitų atsparumas, todėl didėja jų nusėdimo greitis. Eritrocitų agregacija daugiausia priklauso nuo jų elektrinių savybių ir kraujo plazmos baltymų sudėties. Paprastai raudonieji kraujo kūneliai turi neigiamą krūvį ir atstumia vienas kitą. Agregacijos laipsnis (taigi ir ESR) didėja didėjant vadinamųjų ūminės fazės baltymų – uždegiminio proceso žymenų – koncentracijai plazmoje. Visų pirma, fibrinogenas, C reaktyvusis baltymas, ceruloplazminas, imunoglobulinai ir kt. Priešingai, ESR mažėja didėjant albumino koncentracijai.
ESR nustatymas atliekamas Panchenkov metodu (kapiliare). Pagal Panchenkov metodą natrio citratas naudojamas kaip antikoaguliantas. Į kapiliarą paimama 2,5 μl citrato ir į tą patį kapiliarą paimama 7,5 μl kraujo arba į citratu pamirkytus mėgintuvėlius įpilama 7,5 μl kraujo, kraujas ir citratas sumaišomi mėgintuvėlyje, vėl paimama. į kapiliarą ir dedamas į specialų stovą 1 val. Pagal Westergreno metodą (in vitro).
5% natrio citrato tirpalas įtraukiamas į Panchenkov kapiliarą, sugraduotą 100 padalų iki "P" žymos ir perkeliamas į laikrodžio stiklą. Tada kraujas du kartus paimamas į tą patį kapiliarą iki „K“ ženklo ir abu kartus pučiamas ant laikrodžio stiklo. Kraujas, kruopščiai sumaišytas su natrio citratu, vėl įtraukiamas į kapiliarą iki „K“ ženklo. Kapiliaras dedamas į trikojį griežtai vertikaliai. Į ESR atsižvelgiama po 1 valandos, jei reikia – po 24 valandų ir išreiškiamas milimetrais.
Jau daugiau nei šimtą metų šis laboratorinis tyrimas buvo naudojamas kiekybinis įvertinimasįvairaus intensyvumo uždegiminiai procesai. Taigi dažniausiai ESR padidėjimas yra susijęs su uždegiminiais procesais, apsinuodijimu, infekcijomis, invazijomis, navikais, hematologiniais piktybiniais navikais, kraujo netekimu, traumomis ir chirurginėmis intervencijomis.
Nors uždegimas yra labiausiai bendra priežastis eritrocitų nusėdimo pagreitėjimas, AKS padidėjimą gali lemti ir kitos, įskaitant ne visada patologines, būkles.
Nepaisant nespecifiškumo, AKS nustatymas vis dar yra vienas populiariausių laboratorinių tyrimų, leidžiančių nustatyti uždegiminio proceso faktą ir intensyvumą.
1.3 Hemoglobino kiekio nustatymas
Hemoglobino kiekio nustatymas gyvūnų kraujyje yra vienas svarbiausių ir labiausiai paplitusių rodiklių. Hemoglobinui nustatyti dažniausiai analizuojami hemoglobino dariniai, susidarantys jo oksidacijos metu ir į geną pridedant įvairių cheminių grupių, dėl kurių pasikeičia geležies valentingumas ir tirpalo spalva.
Įgyvendinant federalinį išsilavinimo standartą, tai labai svarbu. Per dešimtmečius švietimo įstaigos sukūrė darbo sistemą...
Vadove aptariamos šalies ir užsienio autorių programos, naudojamos šiuolaikinėje...
Kaip dažnai mes matome šį pabaisą su ožio ragais, kai dėliojame Taro kortas. „Velnias“ yra pragaro ir mirties personifikacija...
Navigacija: Žemėlapio aprašymas ir istorija: Šalia kelio auga didelis ąžuolas, jo lapijoje paukščiai randa pastogę ir maisto...
Mieli forumo lankytojai, atveriu šią temą Patricko Walesos „Deviant Moon Tarot“ kaladės gerbėjams.
Toskanos užsakymas. Toskanos ordinas, vienas iš penkių Romos architektūros užsakymų. Pavadinimas siejamas su etruskų architektūra...
LIBRETAS. Jei jums patinka muzika (ką neabejotinai darote, nes jums reikėjo šios knygos), tikriausiai...
Religija: pagonybė Gimimas: 942 (0942) Mirė: žygis prie Dniepro Šeima: Rurikovičius Tėvas:...
Masaccio (iš tikrųjų Tommaso di Giovanni di Simone Cassai (Guidi), Tommaso di ser Giovanni di Guidi; gruodžio 21 d....
(Išleista Tel Avive 1958 m. Perduota su nedidelėmis santrumpos). žydai! Myli vienas kita,...
Paimkite kaušą ar puodą ir supilkite į jį pieną bei grietinėlę. Suberkite vanilinį cukrų (cukrų su vanilės sėklomis). Į...
Sveiki visi! Šiandien mūsų laukia labai skanus ir paprastas receptas – dešrelės tešloje orkaitėje. Ar tu jauti...
Avokadas yra vienas sveikiausių vaisių. Tai tikras vitaminų ir maistinių medžiagų sandėlis. O jis...
Kepta kiauliena yra idealus skanus ir sotus patiekalas, kuriuo galima pamaitinti visą šeimą. Meilužės...
Vadove aptariamos vietinių ir užsienio autorių programos, naudojamos darbe...
Kaip dažnai mes matome šį pabaisą su ožio ragais, kai dėliojame Taro kortas. „Velnias“ yra pragaro personifikacija...