Diagnóstico microbiológico de disenteria e cólera. Como fazer o teste de disenteria

Microbiologia da disenteria

A disenteria é uma doença infecciosa caracterizada por intoxicação geral do corpo, diarreia e uma lesão peculiar da membrana mucosa do intestino grosso. É uma das doenças intestinais agudas mais comuns no mundo. A doença é conhecida desde a antiguidade pelo nome de “diarréia sanguinolenta”, mas sua natureza acabou sendo diferente. Em 1875, o cientista russo F.A. Lesh isolou uma ameba de um paciente com diarreia com sangue. Entamoeba histolítica, nos 15 anos seguintes, estabeleceu-se a independência desta doença, para a qual foi mantido o nome amebíase.

Os agentes causadores da disenteria propriamente dita são um grande grupo de bactérias biologicamente semelhantes, unidas no gênero Shigella. O patógeno foi descoberto pela primeira vez em 1888 por A. Chantemes e F. Vidal; em 1891 foi descrito por AV Grigoriev, e em 1898 K. Shiga, a partir de soro obtido de um paciente, identificou o patógeno em 34 pacientes com disenteria, comprovando finalmente o papel etiológico dessa bactéria. Porém, nos anos seguintes, outros agentes causadores da disenteria foram descobertos: em 1900 - por S. Flexner, em 1915 - por K. Sonne, em 1917 - por K. Stutzer e K. Schmitz, em 1932 - por J. Boyd, em 1934 - D. Grande, em 1943 - A. Sax. Atualmente gênero Shigella inclui mais de 40 sorotipos. Todos eles são bastonetes gram-negativos curtos e imóveis que não formam esporos ou cápsulas, que crescem bem em meios nutritivos regulares e não crescem em meios de fome com citrato ou malonato como única fonte de carbono; não formam H 2 S, não possuem urease; a reação de Voges-Proskauer é negativa; glicose e alguns outros carboidratos são fermentados para formar ácido sem gás (exceto para alguns biótipos Shigella flexneri: S. manchester E S. Newcastle); Via de regra, não fermentam lactose (com exceção de Shigella Sonne), adonitol, salicina e inositol, não liquefazem gelatina, geralmente formam catalase e não possuem lisina descarboxilase e fenilalanina desaminase. O conteúdo de G + C no DNA é 49 – 53% em mol. Shigella são anaeróbios facultativos, a temperatura ótima para crescimento é 37 °C, não crescem em temperaturas acima de 45 °C, o pH ideal do ambiente é 6,7 - 7,2. As colônias em meio denso são redondas, convexas, translúcidas; em caso de dissociação, formam-se colônias ásperas em forma de R. O crescimento no MPB na forma de turbidez uniforme, formas ásperas formam um sedimento. Culturas recém-isoladas de Shigella Sonne geralmente formam colônias de dois tipos: pequenas redondas convexas (fase I), grandes planas (fase II). A natureza da colônia depende da presença (fase I) ou ausência (fase II) de um plasmídeo com peso molecular de 120 MD, o que também determina a virulência de Shigella Sonne.

A classificação internacional de Shigella é baseada em suas características bioquímicas (Shigella não fermentadora de manitol, fermentadora de manitol, fermentadora lenta de lactose) e características da estrutura antigênica (Tabela 37).

Em Shigella foram encontrados antígenos O de especificidade diferente: comuns à família Enterobactérias, genéricos, específicos de espécie, grupo e tipo, bem como antígenos K; Eles não possuem antígenos N.

Tabela 37

Classificação do gênero de bactérias Shigella

A classificação leva em consideração apenas antígenos O específicos de grupo e tipo. De acordo com essas características, o gênero Shigellaé dividido em 4 subgrupos, ou 4 espécies, e inclui 44 sorotipos. No subgrupo A (tipo Shigella disenteriae) incluiu Shigella, que não fermenta manitol. A espécie inclui 12 sorotipos (1 – 12). Cada sorotipo possui seu próprio tipo específico de antígeno; as conexões antigênicas entre os sorotipos, bem como com outras espécies de Shigella, são fracamente expressas. Para o subgrupo B (tipo Shigella flexneri) incluem Shigella, que geralmente fermenta o manitol. As Shigella desta espécie são sorologicamente relacionadas entre si: contêm antígenos específicos do tipo (I – VI), pelos quais são divididos em sorotipos (1 – 6), e antígenos de grupo, que são encontrados em diferentes composições em cada sorotipo e pelo qual os sorotipos são divididos em subsorotipos. Além disso, esta espécie inclui duas variantes antigênicas - X e Y, que não possuem antígenos típicos, mas diferem em conjuntos de antígenos de grupo. Sorotipo S. flexneri 6 não possui subsorotipos, mas é dividido em 3 tipos bioquímicos de acordo com as características da fermentação da glicose, manitol e dulcitol (Tabela 38).

Tabela 38

Biótipos S. flexneri 6

Observação. K – fermentação com formação apenas de ácido; CG – fermentação com formação de ácido e gás; (–) – sem fermentação.

O antígeno lipopolissacarídeo O em todas as Shigella Flexner contém o antígeno do grupo 3, 4 como a principal estrutura primária, sua síntese é controlada por um gene cromossômico localizado próximo ao locus his. Os antígenos específicos do tipo I, II, IV, V e os antígenos do grupo 6, 7, 8 são o resultado da modificação dos antígenos 3, 4 (glicosilação ou acetilação) e são determinados pelos genes dos profagos conversores correspondentes, o local de integração dos quais está localizado na região lac-pro do cromossomo Shigella.

Surgiu no país na década de 80. Século XX e um novo subserotipo que se generalizou S. flexneri 4(IV:7, 8) difere do subsorotipo 4a (IV:3, 4) e 4b (IV:3, 4, 6), surgiu de uma variante S. flexneriY(IV:3, 4) devido à lisogenização pelos seus profagos conversores IV e 7, 8.

Para o subgrupo C (tipo Shigella boydii) incluem Shigella, que geralmente fermenta o manitol. Os membros do grupo são sorologicamente diferentes uns dos outros. As conexões antigênicas dentro da espécie são fracamente expressas. A espécie inclui 18 sorotipos (1 – 18), cada um dos quais possui seu próprio tipo principal de antígeno.

No subgrupo D (tipo Shigella sonnei) incluíram Shigella, que geralmente fermentam o manitol e são capazes de fermentar lentamente (após 24 horas de incubação e posteriormente) lactose e sacarose. Visualizar S. sonei inclui um sorotipo, mas as colônias das fases I e II possuem seus próprios antígenos específicos do tipo. Para a classificação intraespecífica de Shigella Sonne, dois métodos foram propostos:

1) dividindo-os em 14 tipos e subtipos bioquímicos de acordo com sua capacidade de fermentar maltose, ramnose e xilose; 2) divisão em tipos de fagos de acordo com a sensibilidade a um conjunto de fagos correspondentes.

Esses métodos de tipagem têm significado principalmente epidemiológico. Além disso, Shigella Sonne e Shigella Flexner são tipificadas para o mesmo propósito com base em sua capacidade de sintetizar colicinas específicas (colicinogenotipagem) e sensibilidade a colicinas conhecidas (colicinotipagem). Para determinar o tipo de colicinas produzidas por Shigella, J. Abbott e R. Chenon propuseram conjuntos de cepas padrão e indicadoras de Shigella, e para determinar a sensibilidade de Shigella a tipos conhecidos de colicinas, um conjunto de cepas colicinogênicas padrão de P. Frederick é usado.

Resistência. Shigella tem uma resistência bastante elevada a fatores ambientais. Eles sobrevivem em tecido de algodão e papel por até 30 a 36 dias, em fezes secas - até 4 a 5 meses, no solo - até 3 a 4 meses, na água - de 0,5 a 3 meses, em frutas e vegetais – até 2 semanas, em leite e produtos lácteos – até várias semanas; a uma temperatura de 60 °C morrem em 15 – 20 minutos. Sensível a soluções de cloramina, cloro ativo e outros desinfetantes.

Fatores de patogenicidade. A propriedade biológica mais importante da Shigella, que determina sua patogenicidade, é a capacidade de invadir células epiteliais, multiplicar-se nelas e causar sua morte. Este efeito pode ser detectado usando um teste ceratoconjuntival (a introdução de uma alça de uma cultura de Shigella (2–3 bilhões de bactérias) sob a pálpebra inferior de uma cobaia causa o desenvolvimento de ceratoconjuntivite seroso-purulenta), bem como pela infecção de culturas celulares ( efeito citotóxico) ou embriões de galinha (sua morte), ou por via intranasal em camundongos brancos (desenvolvimento de pneumonia). Os principais fatores de patogenicidade da Shigella podem ser divididos em três grupos:

1) fatores que determinam a interação com o epitélio da mucosa;

2) fatores que garantem resistência aos mecanismos de defesa humoral e celular do macroorganismo e capacidade de reprodução da Shigella em suas células;

3) a capacidade de produzir toxinas e produtos tóxicos que determinam o desenvolvimento do próprio processo patológico.

O primeiro grupo inclui fatores de adesão e colonização: seu papel é desempenhado pelos pili, proteínas da membrana externa e LPS. A adesão e a colonização são promovidas por enzimas que destroem o muco - neuraminidase, hialuronidase, mucinase. O segundo grupo inclui fatores de invasão que promovem a penetração da Shigella nos enterócitos e sua reprodução neles e nos macrófagos com manifestação simultânea de efeito citotóxico e (ou) enterotóxico. Essas propriedades são controladas pelos genes de um plasmídeo com peso molecular de 140 MD (que codifica a síntese de proteínas da membrana externa que causam invasão) e pelos genes cromossômicos de Shigella: kcp A (causa ceratoconjuntivite), cyt (responsável pela destruição celular ), bem como outros genes ainda não identificados. A proteção da Shigella contra a fagocitose é fornecida pelo antígeno K de superfície, antígenos 3, 4 e lipopolissacarídeo. Além disso, o lipídio A da endotoxina Shigella tem efeito imunossupressor: suprime a atividade das células de memória imunológica.

O terceiro grupo de fatores de patogenicidade inclui endotoxinas e dois tipos de exotoxinas encontradas em Shigella - Shiga e exotoxinas semelhantes a Shiga (SLT-I e SLT-II), cujas propriedades citotóxicas são mais pronunciadas em S.disenteriae 1. Toxinas Shiga e semelhantes a Shiga também foram encontradas em outros sorotipos S.disenteriae, eles também são formados S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC e algumas salmonelas. A síntese dessas toxinas é controlada pelos genes tóxicos dos fagos conversores. As enterotoxinas do tipo LT são encontradas em Shigella Flexner, Sonne e Boyd. A sua síntese de LT é controlada por genes plasmídicos. A enterotoxina estimula a atividade da adenilato ciclase e é responsável pelo desenvolvimento da diarreia. A toxina Shiga, ou neurotoxina, não reage com o sistema adenilato ciclase, mas tem efeito citotóxico direto. As toxinas Shiga e semelhantes a Shiga (SLT-I e SLT-II) têm um peso molecular de 70 kDa e consistem nas subunidades A e B (esta última de 5 pequenas subunidades idênticas). O receptor de toxinas é um glicolipídeo da membrana celular.

A virulência de Shigella Sonne também depende de um plasmídeo com peso molecular de 120 MD. Controla a síntese de cerca de 40 polipeptídeos da membrana externa, sete deles associados à virulência. Shigella Sonne, possuindo este plasmídeo, forma colônias de fase I e é virulenta. As culturas que perderam o plasmídeo formam colônias de fase II e carecem de virulência. Plasmídeos com peso molecular de 120–140 MD foram encontrados em Shigella Flexner e Boyd. O lipopolissacarídeo de Shigella é uma endotoxina forte.

Características da epidemiologia. A fonte de infecção são apenas humanos. Nenhum animal na natureza sofre de disenteria. Em condições experimentais, a disenteria só pode ser reproduzida em macacos. O método de infecção é fecal-oral. Rotas de transmissão – água (predominante para Shigella Flexner), alimentos, especialmente papel importante pertence ao leite e produtos lácteos (a via predominante de infecção para Shigella Sonne), e contato domiciliar, especialmente para a espécie S.disenteriae.

Uma característica da epidemiologia da disenteria é uma mudança na composição de espécies de patógenos, bem como biótipos Sonne e sorotipos Flexner em certas regiões. Por exemplo, até o final dos anos 30. Século XX para uma partilha S.disenteriae 1 foi responsável por até 30-40% de todos os casos de disenteria, e então esse sorotipo começou a ocorrer cada vez menos e quase desapareceu. No entanto, nas décadas de 1960-1980. S.disenteriae reapareceu na arena histórica e causou uma série de epidemias que levaram à formação de três focos hiperendêmicos - na América Central, África Central e Sul da Ásia (Índia, Paquistão, Bangladesh e outros países). As razões para a mudança na composição de espécies dos patógenos da disenteria estão provavelmente associadas a mudanças na imunidade coletiva e nas propriedades das bactérias da disenteria. Em particular, o retorno S.disenteriae 1 e sua ampla distribuição, que causou a formação de focos hiperendêmicos de disenteria, está associada à aquisição de plasmídeos que causaram resistência a múltiplas drogas e aumento de virulência.

Características de patogênese e clínica. Período de incubação para disenteria 2 a 5 dias, às vezes menos de um dia. A formação de um foco infeccioso na membrana mucosa da parte descendente do intestino grosso (sigmóide e reto), onde penetra o patógeno da disenteria, é de natureza cíclica: adesão, colonização, introdução de Shigella no citoplasma dos enterócitos, sua intracelular reprodução, destruição e rejeição de células epiteliais, liberação de patógenos no lúmen do intestino; depois disso, começa o próximo ciclo - adesão, colonização, etc. A intensidade dos ciclos depende da concentração de patógenos na camada parietal da membrana mucosa. Como resultado de ciclos repetidos, o foco inflamatório cresce, as úlceras resultantes, conectando-se, aumentam a exposição da parede intestinal, resultando no aparecimento de sangue, caroços mucopurulentos e leucócitos polimorfonucleares nas fezes. As citotoxinas (SLT-I e SLT-II) causam destruição celular, enterotoxinas – diarreia, endotoxinas – intoxicação geral. O quadro clínico da disenteria é amplamente determinado pelo tipo de exotoxina produzida em maior medida pelo patógeno, pelo grau de seu efeito alergênico e pelo estado imunológico do corpo. No entanto, muitas questões da patogênese da disenteria permanecem obscuras, em particular: as características do curso da disenteria em crianças dos primeiros dois anos de vida, as razões para a transição da disenteria aguda para crônica, o significado da sensibilização, o mecanismo de imunidade local da mucosa intestinal, etc. O mais típico manifestações clínicas A disenteria é causada por diarreia, fissuras frequentes: em casos graves, até 50 ou mais vezes ao dia, tenesmo (espasmos dolorosos do reto) e intoxicação geral. A natureza das fezes é determinada pelo grau de dano ao intestino grosso. A disenteria mais grave é causada por S.disenteriae 1, mais facilmente - disenteria de Sonne.

Imunidade pós-infecciosa. Como mostraram as observações dos macacos, depois de sofrer de disenteria, permanece uma imunidade forte e bastante duradoura. É causada por anticorpos antimicrobianos, antitoxinas, aumento da atividade de macrófagos e linfócitos T. A imunidade local da mucosa intestinal, mediada por IgAs, desempenha um papel significativo. No entanto, a imunidade é específica do tipo; não ocorre imunidade cruzada forte.

Diagnóstico laboratorial. O método principal é bacteriológico. O material para pesquisa são as fezes. Esquema de isolamento de patógenos: inoculação em meios de diagnóstico diferencial Endo e Ploskirev (em paralelo em meio de enriquecimento seguido de inoculação em meios Endo e Ploskirev) para isolar colônias isoladas, obter uma cultura pura, estudar suas propriedades bioquímicas e, levando em consideração estas últimas, identificação utilizando soros aglutinantes de diagnóstico polivalentes e monovalentes. Os seguintes soros comerciais são produzidos.

1. Para Shigella, que não fermenta manitol:

Para S.disenteriae 1 E 2

Para S.disenteriae 3 – 7(polivalente e monovalente),

Para S.disenteriae 8 – 12(polivalente e monovalente).

2. Para Shigella fermentando manitol:

para antígenos típicos S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

agrupar antígenos S. flexneri 3, 4, 6, 7, 8– polivalente,

para antígenos S. boydii 1 – 18(polivalente e monovalente), a antígenos S. sonei Fase I, fase II,

para antígenos S. flexneri I–VI+ S. sonei– polivalente.

Para identificar rapidamente Shigella, recomenda-se o seguinte método: uma colônia suspeita (lactose-negativa em meio Endo) é subcultivada em meio TSI (Inglês. ferro triplo de açúcar) – ágar três açúcares (glicose, lactose, sacarose) com ferro para determinar a produção de H2S; ou a um meio contendo glicose, lactose, sacarose, ferro e ureia. Qualquer organismo que decomponha a uréia após 4 a 6 horas de incubação é provavelmente um membro do gênero Proteu e pode ser excluído. Um microrganismo que produz H2S ou que possui uma articulação formadora de urease ou ácido (fermenta lactose ou sacarose) pode ser excluído, embora cepas produtoras de H2S devam ser investigadas como possíveis membros do gênero. Salmonela. Nos demais casos, a cultura cultivada nesses meios deve ser examinada e, caso fermente glicose (mudança na cor da coluna), isolada em sua forma pura. Ao mesmo tempo, pode ser estudado em reação de aglutinação vítrea com anti-soros apropriados ao gênero Shigella. Se necessário, outros testes bioquímicos são realizados para verificar a pertença ao gênero. Shigella, e também estudar mobilidade.

Para detectar antígenos no sangue (inclusive como parte do CEC), urina e fezes, podem ser utilizados os seguintes métodos: RPGA, RSK, reação de coaglutinação (na urina e fezes), IFM, RAGA (no soro sanguíneo). Esses métodos são altamente eficazes, específicos e adequados para diagnóstico precoce.

Para diagnóstico sorológico podem ser utilizados: RPHA com os kits de diagnóstico de eritrócitos correspondentes, método imunofluorescente (modificação indireta), método Coombs (determinação do título anticorpos incompletos). Um teste de alergia com disenterina (uma solução de frações proteicas de Shigella Flexner e Sonne) também tem valor diagnóstico. A reação é considerada após 24 horas, sendo considerada positiva na presença de hiperemia e infiltrado com diâmetro de 10–20 mm.

Tratamento. A atenção principal é dada à restauração do metabolismo normal do sal de água, nutrição racional, desintoxicação, terapia antibiótica racional (levando em consideração a sensibilidade do patógeno aos antibióticos). Um bom efeito é alcançado pelo uso precoce de um bacteriófago de disenteria polivalente, especialmente comprimidos com revestimento de pectina, que protege o fago da ação do suco gástrico HCl; No intestino delgado, a pectina se dissolve, os fagos são liberados e exercem seu efeito. Para fins preventivos, o fago deve ser administrado pelo menos uma vez a cada três dias (período de sua sobrevivência no intestino).

O problema da prevenção específica. Para criar imunidade artificial contra a disenteria, foram utilizadas várias vacinas: de bactérias mortas, químicas, alcoólicas, mas todas se mostraram ineficazes e foram descontinuadas. As vacinas contra a disenteria de Flexner foram criadas a partir de Shigella Flexner viva (mutante, dependente de estreptomicina); vacinas ribossômicas, mas também não encontraram ampla aplicação. Portanto, o problema da prevenção específica da disenteria permanece sem solução. A principal forma de combater a disenteria é melhorar o sistema de abastecimento de água e esgotos, garantir regimes sanitários e higiénicos rigorosos nas empresas alimentares, especialmente na indústria leiteira, nas instituições infantis, locais públicos e na manutenção da higiene pessoal.

Disenteria é uma infecção dolorosa acompanhada de diarreia com liberação de sangue, pus e muco, dor abdominal e sintomas de intoxicação geral, ocorrendo com derrota predominante cólon, causado por diferentes espécies do gênero Shigella(bactérias da disenteria).

Patógenos da disenteria pertence ao departamento Gracilicutes, família Enterobactérias, família Shigella.
Disenteria , chamado Shigella disenteriae, é mais grave que as doenças causadas por outras Shigella, pois além da endotoxina, que causa inflamação intestinal, esse tipo de bactéria produz uma forte exotoxina que atua como neurotoxina

Disenteria bacteriana , ou shigelose, é uma doença infecciosa causada por bactérias do gênero Shigella,

Disenteria.Morfologia e propriedades tintoriais.
Shigella são bastonetes gram-negativos com extremidades arredondadas, com 2-3 mícrons de comprimento e 0,5-7 mícrons de espessura, não formam esporos, não possuem flagelos e são imóveis. Villi são encontrados em muitas cepas tipo geral e bebeu sexualmente. Algumas Shigella possuem uma microcápsula.

Disenteria. Cultivo.
Os bacilos da disenteria são anaeróbios facultativos. Eles não exigem meios nutritivos e crescem bem a uma temperatura de 37 °C e um pH de 7,2-7,4. Em meios densos formam pequenas colônias transparentes, em mídia líquida- turbidez difusa. O caldo de selenita é mais frequentemente usado como meio de enriquecimento para o cultivo de Shigella.

Disenteria.Atividade enzimática.
Shigella tem menos atividade enzimática que outras enterobactérias. Eles fermentam carboidratos para formar ácido. Um sinal importante O que permite a diferenciação da Shigella é a sua relação com o manitol: S. dysenteriae não fermenta o manitol, os representantes dos grupos B, C, D são positivos para o manitol. Os mais bioquimicamente ativos são S. sonnei, que pode fermentar lentamente (em 2 dias) a lactose. Com base na relação de S. sonnei com ramnose, xilose e maltose, distinguem-se 7 variantes bioquímicas.

Disenteria.Estrutura antigênica.
Shigella possui um antígeno O, sua heterogeneidade permite distinguir sorovares e subserovares dentro de grupos; Alguns membros do gênero exibem antígeno K.

Disenteria.Fatores de patogenicidade.
Todos os bacilos da disenteria formam endotoxina, que tem efeito enterotrópico, neurotrópico e pirogênico. Além disso, S. dysenteriae - Shigella Grigoriev-Shiga - secretam uma exotoxina que tem efeito enterotóxico, neurotóxico, citotóxico e nefrotóxico no corpo, o que perturba o metabolismo água-sal e a atividade do sistema nervoso central, levando à morte de células epiteliais do intestino do cólon, danos aos túbulos renais.

A formação de uma exotoxina está associada a um curso mais grave de disenteria causada por esse patógeno. A exotoxina também pode ser produzida por outras espécies de Shigella. Foi descoberto um fator de permeabilidade de RF, que causa danos a veias de sangue. Fatores de patogenicidade também incluem proteína invasiva, facilitando sua penetração nas células epiteliais, bem como nos pili e nas proteínas da membrana externa responsáveis ​​pela adesão, e em uma microcápsula.

Disenteria.Resistência.
Shigella apresenta baixa resistência a diversos fatores. S. sonnei, que em água da torneira duram até 2,5 meses; em águas abertas sobrevivem até 1,5 meses. S. sonnei pode não apenas sobreviver por muito tempo, mas também se reproduzir em produtos, especialmente laticínios.

Disenteria.Epidemiologia.
A disenteria é uma infecção antroponótica: a fonte são os doentes e os portadores. O mecanismo de transmissão das infecções é fecal-oral. As vias de transmissão podem ser diferentes - na disenteria de Sonne predomina a via alimentar, na disenteria de Flexner - água, na disenteria de Grigoriev-Shiga a via de contato e domiciliar é típica.

Disenteria encontrado em muitos países do mundo. Nos últimos anos, houve um aumento acentuado na incidência desta infecção. Pessoas de todas as idades são afetadas, mas crianças de 1 a 3 anos são mais suscetíveis à disenteria. O número de pacientes aumenta em julho-setembro. Tipos diferentes Shigella está distribuída de forma desigual em regiões individuais.

Disenteria.Patogênese.
Shigella entra no trato gastrointestinal pela boca e atinge o cólon. Possuindo tropismo por seu epitélio, os patógenos se ligam às células com a ajuda de pili e proteínas da membrana externa. Graças ao fator invasivo, eles penetram nas células, ali se multiplicam e com isso as células morrem.

Ulcerações se formam na parede intestinal, no lugar das quais se formam cicatrizes. A endotoxina, liberada quando as bactérias são destruídas, causa intoxicação geral, aumento da motilidade intestinal e diarréia. O sangue das úlceras resultantes entra nas fezes. Como resultado da ação da exotoxina, observa-se um distúrbio mais pronunciado do metabolismo água-sal, atividade do sistema nervoso central e danos renais.

Disenteria.Quadro clínico.
O período de incubação dura de 1 a 5 dias. A doença começa de forma aguda com um aumento da temperatura corporal para 38-39 ° C, aparecem dores abdominais e diarreia. Há uma mistura de sangue e muco nas fezes. A disenteria de Grigoriev-Shiga é a mais grave.

Disenteria.Imunidade.
Após uma doença, a imunidade é específica da espécie e da variante. É de curta duração e frágil. Muitas vezes a doença se torna crônica. Doenças repetidas foram observadas mesmo dentro de uma estação.

Disenteria.Laboratório diagnóstico.
As fezes do paciente são tomadas como material de teste. A base do diagnóstico é o método bacteriológico, que permite identificar o patógeno, determinar sua sensibilidade aos antibióticos e realizar a identificação intraespecífica (determinar a variante bioquímica, sorovar ou colicinogenovar). Em caso de curso prolongado de disenteria, pode ser utilizado como método sorológico auxiliar, que consiste no diagnóstico de AR, RNGA (aumentando o título de anticorpos quando a reação se repete, o diagnóstico pode ser confirmado).

Disenteria.Tratamento.
Pacientes com formas graves de disenteria de Grigorieva-Shish e Flexner são tratados com antibióticos de amplo espectro com consideração obrigatória do antibiograma, uma vez que entre Shigella muitas vezes existem não apenas formas resistentes a antibióticos, mas também formas dependentes de antibióticos. Nas formas leves de disenteria, não são utilizados antibióticos, pois seu uso leva à disbacteriose, que agrava o processo patológico, e à interrupção dos processos de recuperação da mucosa do cólon.

Disenteria.Prevenção.
O único medicamento que pode ser usado em focos de infecção para fins profiláticos é o bacteriófago da disenteria. A prevenção inespecífica desempenha o papel principal.

A prevenção inespecífica envolve o adequado arranjo sanitário e higiênico da vida das pessoas, fornecendo-lhes água e alimentos de qualidade.

No ambiente do paciente, devem ser tomadas medidas para prevenir a propagação do patógeno.

UDC 616.935-074(047)

SOU.Sadykova

Universidade Médica Nacional do Cazaquistão

nomeado em homenagem a S.D. Asfendiyarov, Almaty

Departamento de Doenças Infecciosas e Tropicais

O diagnóstico confiável de disenteria é uma das tarefas urgentes da vigilância de AEI. Um diagnóstico preciso da disenteria bacteriana é importante para o tratamento correto e oportuno do paciente e para a implementação das medidas antiepidêmicas necessárias. Os dados apresentados na revisão mostram que, dada a prevalência generalizada da disenteria, a falta de sensibilidade e o aparecimento tardio de resultados positivos de muitos métodos de diagnóstico, é aconselhável desenvolver o potencial diagnóstico para a detecção desta infecção.

Palavras-chave: diagnóstico, disenteria, método de linfócitos de ligação ao antígeno.

O reconhecimento da infecção por shigella na prática clínica encontra dificuldades significativas devido a fatores objetivos, que incluem a patomorfose clínica da disenteria, aumento no número formas atípicas doenças, a existência de um número significativo de doenças de natureza infecciosa e não infecciosa que apresentam manifestações clínicas semelhantes à disenteria. Em metade dos casos, o diagnóstico de “disenteria clínica” esconde doenças não reconhecidas de etiologia diferente.

As maiores dificuldades enfrentam o médico durante o exame inicial do paciente antes de receber os resultados dos métodos diagnósticos paraclínicos. O reconhecimento da disenteria também é difícil na presença de doenças concomitantes do trato gastrointestinal.

Desde o início do uso do diagnóstico laboratorial etiológico da disenteria, vários métodos foram propostos e testados. Existem muitas classificações de métodos para diagnóstico etiológico de infecções. Metodologicamente, a classificação proposta por B.V. é a mais justificada. Justiceiro. Em relação ao diagnóstico de disenteria, os princípios da classificação metodologicamente fundamentada foram utilizados por B.V. Karalnik, N.M. Nurkina, B.K. Erkinbekova..

Os métodos laboratoriais para o diagnóstico de disenteria incluem bacteriológico (isolamento e identificação do patógeno) e imunológico. Estes últimos incluem métodos imunológicos in vivo (teste de alergia de Tsuverkalov) e in vitro. Os métodos imunológicos in vitro têm uma vantagem indiscutível sobre o teste de Tsuverkalov - eles não estão associados à introdução de antígenos estranhos no corpo.

A maioria dos pesquisadores ainda acredita que a pesquisa bacteriológica, que inclui o isolamento do agente causador da doença em cultura pura com sua posterior identificação por características morfológicas, bioquímicas e antigênicas, é o método mais confiável para o diagnóstico da infecção por shigelose. A frequência de isolamento de Shigella nas fezes de pacientes com diagnóstico clínico a “disenteria aguda”, segundo diversos autores, varia de 30,8% a 84,7% e até 91,1%. Uma variação tão significativa entre diferentes autores depende não apenas de fatores objetivos que influenciam a eficácia da pesquisa bacteriológica, mas também do rigor do diagnóstico (ou exclusão) da “disenteria clínica”. A eficácia da pesquisa bacteriológica é influenciada por fatores objetivos como as características do curso da doença, o método de coleta e entrega do material ao laboratório, a qualidade dos meios de cultura, a qualificação do pessoal, o momento do contato do paciente com os profissionais de saúde, o uso de antimicrobianos antes de levar material para pesquisa. Quantitativo exame microbiológico fezes na disenteria aguda mostra que para qualquer formas clínicas infecção, a liberação mais massiva de patógenos ocorre nos primeiros dias da doença, e a partir do 6º e, principalmente, do 10º dia de doença, a concentração de Shigella nas fezes diminui significativamente. TA. Avdeeva constatou que o baixo teor de Shigella e o acentuado predomínio de microrganismos não patogênicos nas fezes praticamente excluem a possibilidade de detecção bacteriológica de bactérias da disenteria.

Sabe-se que a confirmação bacteriológica da infecção por shigella é mais frequentemente possível quando se examinam os pacientes justamente nos primeiros dias da doença - a coprocultura do patógeno na grande maioria dos casos é isolada pela primeira vez durante o primeiro exame. Resultados positivos do exame bacteriológico são observados apenas nos primeiros 3 dias de doença em 45–49% dos pacientes, nos primeiros 7 dias – em 75%. Tillett e Thomas também consideram o período de exame dos pacientes fator importante, que determina a eficácia do método bacteriológico para o diagnóstico de disenteria. De acordo com T.A. Avdeeva, nos primeiros dias da doença, a liberação mais intensa do patógeno é observada na disenteria de Sonne, menos intensa na disenteria de Flexner e menor na disenteria de Flexner VI; V datas atrasadas doença, altas concentrações persistem por mais tempo na disenteria de Flexner, por um período de tempo mais curto - Shigella Sonne, e por menos tempo - Shigella Flexner VI.

Assim, embora o exame bacteriológico das fezes seja o método mais confiável para diagnosticar a infecção por shigelose, as desvantagens significativas são as limitações da sua eficácia listadas acima. É importante apontar também as limitações do diagnóstico precoce pelo método bacteriológico, em que a duração da análise é de 3 a 4 dias. Devido a estas circunstâncias, a utilização de outros métodos de diagnóstico laboratorial é de grande importância prática. Outro método microbiológico para diagnosticar disenteria também se baseia na detecção de Shigella viva. Esta é uma reação de aumento do título de fago (PTR), baseada na capacidade de fagos específicos de se multiplicarem exclusivamente na presença de microrganismos vivos homólogos. Um aumento no título do fago indicador indica a presença dos micróbios correspondentes no ambiente. Julgamento valor diagnóstico RSF para infecção por shigella foi realizado por B.I. Khaimzon, T.S. Vilkomirskaia. RSF tem uma sensibilidade bastante alta. A comparação das concentrações mínimas de Shigella nas fezes capturadas pelo método bacteriológico (12,5 mil bactérias em 1 ml) e RSF (3,0 - 6,2 mil) indica a superioridade do RSF.

Como a frequência de resultados positivos de RNF depende diretamente do grau de contaminação das fezes, o uso do método também dá maior efeito nos primeiros dias da doença e nas formas mais graves. processo infeccioso. Porém, a maior sensibilidade do método determina suas vantagens especiais em relação ao exame bacteriológico nas fases tardias da doença, bem como no exame de pacientes com formas de infecção leves, assintomáticas e subclínicas, com baixa concentração do patógeno nas fezes. O RSF também é utilizado no exame de pacientes que tomaram medicamentos antibacterianos, uma vez que estes reduzem drasticamente a frequência de resultados positivos do método de pesquisa bacteriológica, mas têm um efeito muito menor na eficácia do RSF. A sensibilidade do RSF não é absoluta devido à existência de cepas de Shigella resistentes a fagos: a proporção de cepas resistentes a fagos pode variar amplamente - de 1% a 34,5%.

A grande vantagem do RSF é a sua alta especificidade. Durante exames de pessoas saudáveis, bem como de pacientes com doenças infecciosas de outras etiologias, foram observados resultados de reações positivas apenas em 1,5% dos casos. RSF é um método adicional valioso para diagnosticar a infecção por shigella. Mas hoje este método raramente é utilizado devido à sua complexidade técnica. Outros métodos são imunológicos. Com a ajuda deles, uma resposta imune específica do patógeno é registrada ou os antígenos do patógeno são determinados usando métodos imunológicos.

Devido à gravidade dos processos alérgicos infecciosos específicos durante a infecção pela shigelose, inicialmente foram utilizados métodos de diagnóstico alergológico, que incluíam o teste de alergia intradérmica com disenterina (IDT). O medicamento “disenterina”, que é um alérgeno específico da Shigella desprovido de substâncias tóxicas, foi obtido por D.A. Tsuverkalov e foi usado pela primeira vez em ambiente clínico ao realizar um teste intradérmico por L.K. Korovitsky em 1954. De acordo com E.V. Golyusova e M.Z. Trokhimenko, na presença de disenteria aguda prévia ou acompanhante de doenças alérgicas com manifestações cutâneas (eczema, urticária, etc.). resultados positivos de VPD são observados com muito mais frequência (paraalergia). Análise dos resultados do VPD em períodos diferentes a disenteria aguda mostra que uma alergia específica ocorre já nos primeiros dias da doença, atinge sua gravidade máxima entre o 7º e o 15º dia e depois desaparece gradualmente. Resultados de reação positivos foram obtidos no exame de pessoas saudáveis ​​com idade entre 16 e 60 anos em 15–20% dos casos e em pessoas com idade entre 3 e 7 anos – em 12,5% dos casos. Ainda mais frequentemente, resultados positivos inespecíficos de VPD foram observados em pacientes com doenças gastrointestinais - em 20–36% dos casos. A introdução do alérgeno foi acompanhada pelo desenvolvimento de uma reação local em 35,5 - 43,0% dos pacientes com salmonelose, em 74 - 87% dos pacientes com enterocolite coli-0124. Um argumento sério contra o uso generalizado de VPD na prática clínica foi o seu efeito alergênico no corpo. Considerando o exposto, podemos dizer que este método não é muito específico. O teste de Tsuverkalov também não é específico da espécie. Os resultados de reações positivas foram igualmente frequentes em várias formas etiológicas de disenteria.

Além da DVP, também foram utilizadas outras reações diagnósticas, com graus variados de validade, consideradas alérgicas, por exemplo, a reação de leucocitólise alergênica (ALC), cuja essência era dano específico ou destruição completa de neutrófilos sensibilizados ativa ou passivamente após contato com o antígeno correspondente. Mas essa reação não pode ser atribuída a métodos de diagnóstico precoce, uma vez que a frequência máxima de resultados positivos foi observada nos dias 6 a 9 da doença e foi de 69%. A reação leucêmica alergênica (ALE) também foi proposta. Baseia-se na capacidade dos leucócitos de um organismo sensibilizado se aglomerarem quando expostos a um alérgeno homólogo (disenterina). Devido à falta de comprovação dos mecanismos exatos de tais testes e à insuficiente correspondência de seus resultados com a etiologia da doença, esses métodos, após um curto período de uso na URSS, não se difundiram posteriormente.

A detecção de antígenos de Shigella no corpo é equivalente em termos de diagnóstico ao isolamento do patógeno. As principais vantagens dos métodos de detecção de antígenos sobre a pesquisa bacteriológica, que justificam seu uso clínico, é a capacidade de detectar não apenas microrganismos viáveis, mas também microrganismos mortos e até destruídos, o que é de particular importância no exame de pacientes durante ou logo após um curso de terapia antibacteriana.

Um de melhores métodos O diagnóstico expresso de disenteria foi um estudo de imunofluorescência de fezes (método Coons). A essência do método é detectar Shigella tratando o material de teste com soro contendo anticorpos específicos marcados com fluorocromos. A combinação de anticorpos marcados com antígenos homólogos é acompanhada por um brilho específico dos complexos, detectado em microscópio fluorescente. Na prática, são utilizadas duas variantes principais do método de Koons: direto, em que se utiliza soro contendo anticorpos marcados contra antígenos de Shigella, e indireto (dois estágios), utilizando soro não marcado com fluorocromo (ou a fração globulina do anti- Soro de Shigella) na primeira etapa. Na segunda etapa, um soro marcado com fluorocromo é utilizado contra as globulinas do soro anti-Shigella utilizado na primeira etapa. Estudo comparativo O valor diagnóstico das duas variantes do método imunofluorescente não revelou grandes diferenças na sua especificidade e sensibilidade. Na prática clínica, o uso deste método é mais eficaz no exame de pacientes em datas iniciais doença, bem como em formas mais graves de infecção. Uma desvantagem significativa do método de imunofluorescência é a sua falta de especificidade. A razão mais importante para a falta de especificidade da reação de imunofluorescência é a afinidade antigênica das Enterobacteriaceae. tipos diferentes. Portanto, este método é considerado um guia para o reconhecimento da infecção por shigella.

Várias reações são usadas para detectar antígenos de Shigella sem microscopia. Esses métodos permitem detectar antígenos de patógenos nas fezes de 76,5 - 96,0% dos pacientes com disenteria confirmada bacteriologicamente, o que indica uma sensibilidade bastante elevada. É mais aconselhável usar métodos especificados precisamente nas fases posteriores da doença. A maioria dos autores avalia bastante a especificidade desses métodos diagnósticos. No entanto, F.M. Ivanov, que utilizou o RSC para detectar antígenos de shigella nas fezes, obteve resultados positivos ao examinar pessoas saudáveis ​​​​e pacientes com infecções intestinais de outras etiologias em 13,6% dos casos. Segundo o autor, a utilização do método é mais adequada para identificação de antígenos específicos na urina, uma vez que a frequência de reações positivas inespecíficas neste último caso é muito menor. A utilização de vários métodos de pesquisa permite detectar antígenos de Shigella na urina da grande maioria dos pacientes com disenteria confirmada bacteriologicamente. A dinâmica de excreção de antígenos na urina apresenta algumas peculiaridades - a detecção de substâncias antigênicas em alguns casos é possível já desde os primeiros dias da doença, mas com maior frequência e consistência é possível no 10º - 15º dia e até mais tarde. De acordo com B.A. Godovanny et al, a proporção de resultados positivos para detecção de antígenos de Shigella na urina (SAC) após o 10º dia de doença é de 77% (o valor correspondente para exame bacteriológico de fezes é de 47%). Em conexão com esta circunstância, o teste de urina para a presença de antígenos patogênicos é um método adicional valioso para disenteria, principalmente para fins de diagnóstico tardio e retrospectivo.

De acordo com N.M. Nurkina, se o imunorreagente de anticorpo for obtido de soros policlonais, resultados de indicação positivos são possíveis se antígenos relacionados estiverem presentes na amostra. Por exemplo, com um diagnóstico de eritrócitos de soro altamente ativo contra S.flexneri VI, o antígeno S.flexneri I-V também é detectado, uma vez que Shigella de ambas as subespécies possui um antígeno de espécie comum. Os antígenos de Shigella podem ser determinados durante o período da doença, tanto no soro sanguíneo quanto nas secreções.

Lee Won Ho et al. Foi demonstrado que a frequência de detecção de antígenos de Shigella e sua concentração no sangue e na urina são maiores nos primeiros dias da doença e que a concentração de antígenos detectados é maior nos casos moderados da doença do que nos leves.

CM. Omirbayeva propôs um método de indicação do antígeno de Shigella, baseado na utilização de eritrócitos formalinizados como sorvente de antígenos do extrato fecal em estudo, seguido de aglutinação com soros imunes. A avaliação da especificidade deste método, em nossa opinião, requer pesquisas adicionais, uma vez que os extratos fecais contêm quantidades significativas de antígenos de outras bactérias que não são o agente causador desta doença intestinal.

Vários pesquisadores propõem o imunoensaio enzimático como método de diagnóstico rápido da disenteria aguda, que, segundo muitos autores, é considerado altamente sensível e altamente específico. Nesse caso, o nível mais alto de antígeno é detectado nos dias 1-4 da doença. Apesar das vantagens óbvias do ELISA, que incluem alta sensibilidade, possibilidade de contabilidade quantitativa instrumental rigorosa e facilidade de configuração da reação, o uso generalizado deste método é limitado devido à necessidade de equipamentos especiais.

Para aumentar a sensibilidade e especificidade de vários métodos sorológicos para detecção de antígenos, recomenda-se o uso de anticorpos monoclonais, fragmentos de imunoglobulinas, anticorpos sintéticos, coloração com prata LPS e outras melhorias tecnológicas.

Muitas vezes não é possível detectar o antígeno de um agente infeccioso mesmo quando se utilizam reações altamente sensíveis para detectar antígenos de patógenos em substratos biológicos do corpo, uma vez que uma parte significativa das substâncias antigênicas é aparentemente encontrada na bioamostra na forma de complexos imunes no corpo. Ao examinar pacientes com disenteria aguda confirmada bacteriologicamente, foram observados resultados positivos na determinação do antígeno pelo RSC, segundo alguns dados, apenas em 18% dos casos.

TELEVISÃO. Remneva et al. Eles propõem usar ultrassom para desintegrar complexos de anticorpos com partículas de patógenos e, em seguida, determinar o antígeno do patógeno no RSC no frio. O método foi utilizado para diagnosticar disenteria e amostras de urina de pacientes com infecções intestinais agudas foram utilizadas como material de pesquisa.

A utilização da reação de precipitação para detecção de antígeno na disenteria aguda não se justifica devido à sua baixa sensibilidade e especificidade. Acreditamos que a especificidade de qualquer método para indicação de antígenos de Shigella pode ser significativamente aumentada pelo uso de anticorpos monoclonais para Shigella.

A reação de coaglutinação também é um dos métodos para o diagnóstico rápido da shigelose, assim como de antígenos de patógenos de diversas outras infecções. No caso da shigelose, os antígenos do patógeno podem ser determinados desde os primeiros dias da doença durante todo o período agudo, bem como dentro de 1 a 2 semanas após a cessação da excreção bacteriana. As vantagens da reação de coaglutinação são a facilidade de fabricação do diagnóstico, configuração da reação, custo-benefício, rapidez, sensibilidade e alta especificidade.

Ao realizar diagnósticos para determinar os antígenos de Shigella desde o início da doença, é mais eficaz, segundo muitos autores, examinar as fezes dos pacientes. À medida que a doença progride, a capacidade de detectar antígenos de Shigella na urina e na saliva diminui, embora sejam encontrados nas fezes com quase a mesma frequência que no início da doença. Deve-se levar em consideração que nos primeiros 3-4 dias da doença é um pouco mais eficaz testar a presença de antígeno nas fezes no RPGA. No meio da doença, RPHA e RNAb são igualmente eficazes e, a partir do 7º dia, o RNAb é mais eficaz na busca do antígeno de Shigella. Estas características devem-se à destruição gradual das células de Shigella e dos seus antigénios no intestino do paciente durante o curso da doença. Os antígenos de Shigella excretados na urina são relativamente menores em tamanho do que os antígenos nas fezes. Portanto, é aconselhável examinar a urina em RNAt. Na urina das mulheres, ao contrário da urina dos homens, devido à provável contaminação fecal, os antígenos de Shigella são detectados com igual frequência usando RPHA e RNAb.

Embora o antígeno seja detectado com muito mais frequência (94,5 - 100%) nas amostras fecais das quais a Shigella pode ser isolada do que nas amostras das quais a Shigella não é isolada (61,8 - 75,8%), com bacteriologia e sorologia paralelas (para antígeno) no estudo de amostras fecais de pacientes com disenteria, em geral, a shigella foi isolada apenas em 28,2 - 40,0% das amostras, e o antígeno foi detectado em 65,9 - 91,5% das amostras. É importante enfatizar que a especificidade da espécie do antígeno detectado corresponde sempre à especificidade dos anticorpos séricos, cujo título aumenta tanto quanto possível na dinâmica. Ao focar em um título diagnóstico condicional de anticorpos, às vezes podem ser observadas discrepâncias na especificidade de tais anticorpos e do antígeno detectado. Esta discrepância deve-se à insuficiente fiabilidade diagnóstica de uma única determinação da actividade de anticorpos séricos. Neste caso, o diagnóstico etiológico deve ser feito com base na especificidade do antígeno detectado.

O método PCR para a tarefa de identificar diretamente os sinais de um patógeno se aproxima dos métodos de indicação de antígenos. Permite determinar o ADN do agente patogénico e baseia-se no princípio da replicação natural do ADN, incluindo o desenrolar da dupla hélice do ADN, a divergência das cadeias de ADN e a adição complementar de ambas. A replicação do DNA não pode começar em nenhum ponto, mas apenas em certos blocos iniciais - seções curtas de fita dupla. A essência do método é que, ao marcar com tais blocos uma seção de DNA específica apenas para uma determinada espécie (mas não para outras espécies), é possível reproduzir (amplificar) esta seção específica muitas vezes. Os sistemas de teste baseados no princípio da amplificação do DNA, na maioria dos casos, permitem detectar bactérias e vírus patogênicos para o homem, mesmo nos casos em que sua detecção não pode ser detectada por outros métodos. A especificidade dos sistemas de teste PCR (com a escolha correta de primers específicos do táxon, a exclusão de resultados falso-positivos e a ausência de inibidores de amplificação em bioensaios) permite, em princípio, evitar problemas associados a antígenos de reação cruzada, garantindo assim muito alta especificidade. A determinação pode ser realizada diretamente em material clínico contendo um patógeno vivo. Mas, apesar de a sensibilidade da PCR poder atingir um limite matematicamente possível (detecção de 1 cópia do molde de DNA), o método não é utilizado na prática de diagnóstico de shigelose devido ao seu custo relativamente alto.

Na prática clínica generalizada, os mais difundidos entre os métodos de pesquisa sorológica são aqueles baseados na determinação do nível e da dinâmica dos anticorpos séricos contra o agente suspeito da doença.

Alguns autores determinaram anticorpos para Shigella em coprofiltrados. Os coproanticorpos aparecem muito antes dos anticorpos séricos. A atividade dos anticorpos atinge o máximo nos dias 9 a 12 e, nos dias 20 a 25, eles geralmente não são detectados. R. Laplane et al sugerem que isto se deve à destruição de anticorpos no intestino sob a acção de enzimas proteolíticas. Os coproanticorpos não podem ser detectados em pessoas saudáveis.

W. Barksdale et al, T.N. Nikolaeva et al. relatam aumento na eficiência de decifração do diagnóstico e identificação de convalescentes por meio da determinação simultânea de soro e coproanticorpos.

A detecção de aglutininas em títulos diagnósticos é possível com disenteria confirmada bacteriologicamente apenas em 23,3% dos pacientes. A sensibilidade limitada da AR também se manifesta em títulos insuficientemente elevados de aglutininas detectadas com sua ajuda. Há evidências indicando sensibilidade desigual da AR em diversas formas etiológicas de infecção por shigelose. De acordo com A.A. Klyuchareva, anticorpos em títulos de 1:200 e superiores são detectados usando AR apenas em 8,3% dos pacientes com disenteria de Flexner e ainda mais raramente na disenteria de Sonne. Os resultados de reações positivas não são apenas mais frequentes, mas também em títulos mais elevados observados na disenteria Flexner I-V e Flexner VI do que na disenteria de Sonne. Os resultados positivos para AR aparecem a partir do final da primeira semana da doença e são registrados com mais frequência na segunda ou terceira semana. Os primeiros 10 dias de doença representam 39,6% de todos os resultados de reações positivas. De acordo com A.F. Podlevsky et al., as aglutininas em títulos diagnósticos são detectadas na primeira semana da doença em 19% dos pacientes, na segunda semana - em 25% e na terceira - em 33% dos pacientes.

A frequência de resultados positivos de AR e o nível de títulos de anticorpos detectados com sua ajuda dependem diretamente da gravidade da infecção por Shigella. De acordo com V.P. Zubareva, o uso de antibioticoterapia não reduz a frequência de resultados positivos da AR, porém, quando os antibióticos são prescritos nos primeiros 3 dias da doença, as aglutininas são detectadas em títulos mais baixos.

A AR tem especificidade limitada. Ao examinar pessoas saudáveis, foram obtidos resultados positivos para AR em 12,7% dos casos e reações de grupo foram observadas em 11,3% dos casos. Devido à relação antigênica das bactérias Flexner I-V e Flexner VI, as reações cruzadas são especialmente observadas nas formas etiológicas correspondentes de infecção por shigella.

Com o advento de métodos mais avançados para o sorodiagnóstico da infecção por shigella, a AR perdeu gradativamente sua importância. O valor diagnóstico da reação de aglutinação (“reação disentérica de Vidal”) (AR) para disenteria é avaliado de forma ambígua por vários pesquisadores, porém, os resultados do trabalho da maioria dos autores indicam a sensibilidade e especificidade limitadas deste método.

Na maioria das vezes, a reação de hemaglutinação indireta (passiva) (IPHA) é usada para determinar anticorpos. Estudos detalhados do valor diagnóstico da reação de hemaglutinação passiva (RPHA) para infecção por shigella foram realizados por A.V. Lullu, L.M. Shmuter, TV Vlokh e vários outros pesquisadores. Seus resultados nos permitem concluir que o RPGA é um dos mais maneiras eficazes diagnóstico sorológico de disenteria, embora não isento de algumas desvantagens comuns inerentes aos métodos deste grupo.

Um estudo comparativo da sensibilidade na disenteria RPGA e na reação de aglutinação mostra a grande superioridade do primeiro método. De acordo com AV Lullu, os títulos médios de RPHA nesta doença excedem os títulos médios de AR em 15 vezes (no auge da doença em 19-21 vezes), anticorpos em níveis elevados (1:320 - RPHA) são detectados quando usado 4,5 vezes mais frequentemente do que no título (1:160 ao realizar uma reação de aglutinação). Com disenteria aguda confirmada bacteriologicamente, uma reação RPHA positiva em títulos diagnósticos é observada ao examinar 53-80% dos pacientes.

As hemaglutininas são detectadas a partir do final da primeira semana da doença, a frequência de detecção e o título de anticorpos aumentam, atingindo o máximo no final da segunda e terceira semana, após o que seu título diminui gradativamente.

Existe uma clara dependência da frequência de resultados positivos de RPGA e dos títulos de hemaglutinina com a gravidade e natureza do curso da infecção por Shigella. Estudos relevantes mostraram que com formas de infecção apagadas e subclínicas, resultados positivos de RPGA foram obtidos com menos frequência do que com disenteria aguda clinicamente significativa (52,9 e 65,0%, respectivamente), enquanto apenas 4 responderam em títulos de 1:200 - 1:400 .2% dos soros (na forma clinicamente pronunciada - 31,2%) e nas formas prolongada e crônica, resultados positivos de RPGA foram observados em 40,8% dos pacientes, inclusive no título de 1:200 - apenas 2,0%. Existem também relatos de diferentes sensibilidades do RPHA em certas formas etiológicas de infecção por shigelose. De acordo com L. M. Schmuter, os títulos mais elevados de hemaglutininas são observados na disenteria de Sonne e significativamente mais baixos na disenteria Flexner I-V e Flexner VI. O tratamento antibacteriano iniciado nas fases iniciais da doença, ao reduzir a duração e a intensidade da irritação antigênica, pode provocar o aparecimento de hemaglutininas no soro sanguíneo em títulos mais baixos.

Assim como a reação de aglutinação, a RPGA nem sempre permite reconhecer com precisão a forma etiológica da infecção por shigella, que está associada à possibilidade de reações de grupo. As reações cruzadas são observadas principalmente na disenteria do tipo Flexner - entre a disenteria Flexner I-V e Flexner VI. A resposta imune humoral em muitos pacientes é fraca. A possibilidade de aglutinação cruzada devido a antígenos comuns não pode ser excluída. No entanto, as vantagens deste método incluem a simplicidade da reação, a capacidade de obter resultados rapidamente e a eficiência diagnóstica relativamente alta. Uma desvantagem significativa deste método é que o diagnóstico não pode ser estabelecido antes do 5º dia da doença, os títulos máximos de anticorpos diagnósticos podem ser determinados até a 3ª semana da doença, portanto o método pode ser classificado como “retrospectivo”.

Para fins de diagnóstico de disenteria, propõe-se também a determinação do nível de complexos imunes circulantes específicos representados pelo antígeno O de S. sonnei, combinado com um anticorpo específico, usando uma “versão sanduíche” indireta de um imunoabsorvente ligado a enzima devido à sua alta sensibilidade e especificidade, porém recomenda-se que o método seja utilizado somente entre o 5º e o 8º dia de doença.

Em pacientes com disenteria, desde o início da doença, é detectado um aumento específico na atividade bacteriofixadora do sangue devido à atividade de ligação ao antígeno dos eritrócitos. Nos primeiros 5 dias de ACI, a determinação da atividade de ligação ao antígeno dos eritrócitos permite estabelecer a etiologia da doença em 85-90% dos casos. O mecanismo deste fenômeno não é bem compreendido. Pode-se presumir que sua base é a ligação do complexo imune antígeno-anticorpo pelos eritrócitos através de seus receptores C3b (em primatas, incluindo humanos) ou receptores Fcγ (em outros mamíferos).

Entre os métodos relativamente novos para registrar uma resposta imune específica em nível celular, chama a atenção a determinação de linfócitos ligantes de antígeno (ABLs) que reagem com um antígeno específico e taxonomicamente significativo. A detecção de ASL é realizada por vários métodos - aglutinação pareada de linfócitos com antígeno, imunofluorescência, RIA, adsorção de linfócitos em colunas contendo antígeno, adesão de células mononucleares em capilares de vidro, reação indireta de formação de roseta (IRRO). Deve-se notar que tais métodos altamente sensíveis para registrar ASL, como ELISA e RIA, adsorção de linfócitos em colunas contendo antígenos, são tecnicamente relativamente complexos e nem sempre estão disponíveis para uso generalizado. Os trabalhos de vários autores mostraram a alta sensibilidade e especificidade do RNRO para detecção de ASL em várias doenças. Vários pesquisadores identificaram uma estreita relação entre o conteúdo de ASL no sangue de pacientes com várias patologias e a forma, gravidade e período da doença, sua transição para prolongada ou forma crônica.

Alguns autores acreditam que ao determinar o nível de ASL na dinâmica da doença, pode-se avaliar a eficácia da terapia. A maioria dos autores acredita que se tiver sucesso, a quantidade de ASL cai, e se a eficácia do tratamento for insuficiente, registra-se um aumento ou estabilização deste indicador. Relata-se que através da determinação do ASL é possível quantificar a sensibilização a antígenos teciduais e bacterianos, bem como a antibióticos, o que possui importante valor diagnóstico. O método ASL tem sido utilizado de forma limitada para o diagnóstico de disenteria.

A possibilidade de detecção precoce da ASL, já nos primeiros dias após a infecção, é muito importante para o diagnóstico precoce e tratamento oportuno, necessários ao clínico.

Assim, os dados apresentados na revisão mostram que, dada a prevalência generalizada da disenteria, a falta de sensibilidade e o aparecimento tardio de resultados positivos de muitos métodos diagnósticos, é aconselhável desenvolver o potencial diagnóstico para a detecção desta infecção. Os dados obtidos em muitas doenças infecciosas sobre a alta eficiência do método ASL e o aparecimento precoce de seu resultado positivo determinam as perspectivas de estudo e utilização desse método para shigelose.

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SOU.Sadykova

Diagnóstico laboratorial de disenteria

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Tү comө zder: diagnóstico, disenteria, antígenobaylanystyrushy adis.

SOU.Sadycova

Diagnóstico laboratorial de disenteria

Retomar: O diagnóstico confiável da diarreia é uma das questões mais importantes para controlar a infecção intestinal exata. O diagnóstico exato da diarreia bacteriose tem significado vital para o tratamento correto e preciso de um paciente e também para tomar as medidas antiepidêmicas necessárias. Os dados indicados no inquérito, tendo em conta a diarreia generalizada, mostram a falta de sensibilidade e a ocorrência tardia de resultados positivos de muitos métodos de diagnóstico. É essencial desenvolver imediatamente o potencial diagnóstico para definir a infecção.

Palavras-chave: diagnóstico, disenteria, método de linfócitos de ligação ao antígeno.

A disenteria é uma infecção intestinal grave caracterizada por início agudo. Diagnóstico microbiológico a disenteria envolve o isolamento do patógeno das fezes do paciente, inoculando-o em um meio nutriente especial. A doença deve ser diferenciada de outras doenças e intoxicações intestinais. O diagnóstico precoce e o tratamento oportuno ajudarão a evitar complicações.

A importância do diagnóstico oportuno

Reconhecer a disenteria na prática não é tão fácil porque existem doenças infecciosas e não infecciosas com manifestações clínicas semelhantes. Uma característica dos patógenos da disenteria (Shigella) é a capacidade de alterar a resistência aos medicamentos antibacterianos. Um diagnóstico tardio da doença levará à infecção de um grande número de pessoas. O uso inadequado de antibióticos é a causa da resistência bacteriana, levando a infecções em massa e epidemias com resultados fatais. A fonte de infecção são pacientes e portadores de bactérias que secretam microrganismos patogênicos com matéria fecal. O período de incubação da disenteria é de 2 a 3 dias.

Sintomas clínicos da doença

• Febre repentina com temperatura corporal de 40 graus ou mais.
• Diarréia mais de 10 vezes ao dia.
• Aparecimento de sangue, muco e, em casos raros, pus nas fezes.
• Perda de apetite até ausência completa.
• Nausea e vomito.
• Corte no abdômen e hipocôndrio direito.
• Dor no reto.
• Desidratação.
• Língua seca com saburra branca.
• Arritmia.
• Pressão arterial reduzida.
• Distúrbios da consciência.

Procedimentos de diagnóstico

O diagnóstico da doença inclui geralmente aceito e métodos especiais, estabelecendo não só o diagnóstico final, mas também avaliando o nível de disfunção dos órgãos digestivos. Na disenteria, o diagnóstico é feito com base no quadro epidemiológico da doença, nos sintomas clínicos e nos estudos. O principal diagnóstico laboratorial é a análise microbiológica das fezes, que identifica até 80% dos patógenos. O método sorológico não é realizado antes do 5º dia de doença, esse tipo de estudo complementa, mas não substitui, a análise microbiológica. Outros métodos:

• O exame coprológico é um método clínico simples e acessível que detecta muco, estrias sanguíneas, hemácias, neutrófilos (até 50 no campo de visão) e células epiteliais alteradas.
• Sigmoidoscopia - permite monitorar o processo de cicatrização. Não deve ser usado em crianças.
• O método de teste de alergia é um método auxiliar baseado na realização de um teste de alergia cutânea com disenterina (método Tsuverkalov).

Análise geral de sangue

As células imunológicas destroem os patógenos da disenteria nos intestinos, e casos graves da doença ocorrem quando as bactérias invadem os gânglios linfáticos e subsequentemente entram na corrente sanguínea. Um exame de sangue para disenteria avalia a condição do paciente e permite uma resposta oportuna a possíveis complicações. Um aumento na taxa de hemossedimentação é um indicador laboratorial que caracteriza o grau de inflamação. A disenteria também causa um aumento na concentração de neutrófilos e monócitos em banda.

Como doar fezes para coprograma?

Para confirmar a doença, é realizado um exame de fezes. Coprograma - ampliado teste de laboratório, que avalia o funcionamento do trato gastrointestinal, a velocidade e eficiência da digestão e do funcionamento intestinal. Os métodos laboratoriais para examinar as fezes revelam características físicas e Propriedades quimicas fezes, composição, presença de organismos estranhos e inclusões. Requisitos para coleta de fezes:

• O material é retirado após o ato natural de defecar.
• A coleta é feita em recipiente especial.
• É proibido levar material biológico obtido como resultado de um enema para testar disenteria nas fezes.
• Antes do estudo é proibido o uso de suplementos de ferro, colocar supositórios retais, tome laxantes e beba bebidas alcoólicas.

Diagnóstico microbiológico

Diagnóstico bacteriológico - coleta de matéria fecal e posterior semeadura de fezes em meio nutriente especial. O surgimento de colônias bactéria patogênica(Shigella) após cultura, confirma a suspeita diagnóstica. A análise bacteriológica da disenteria determina com precisão o patógeno, seu tipo, subespécie e suscetibilidade aos agentes antibacterianos, o que permite escolher o medicamento certo para o tratamento.

O material testado são fezes com impurezas estranhas, obtidas naturalmente ou com tubo especial para sigmoidoscopia. Um esfregaço é retirado de crianças com um esfregaço especial (esfregaço VD ou esfregaço intestinal). A sensibilidade aos medicamentos é estabelecida colocando colônias de Shigella junto com vários antibióticos. Se a atividade vital dos microrganismos continuar perto do comprimido com antibiótico, o medicamento não é utilizado para tratamento; se os microrganismos morrerem, é prescrito tratamento com esse antibiótico.

Testes sorológicos para disenteria

Em caso de resultados negativos ou duvidosos do exame bacteriológico, utiliza-se o método sorológico. Um antígeno bacteriano é detectado nas fezes do paciente e anticorpos específicos são detectados no plasma. O título de anticorpos pode ser determinado pelo método RIGA, às vezes pelo método RPGA ou RA. Uma suspensão de uma colônia diurna de Shegella é usada como antígeno. A desvantagem do método é que resultados confiáveis ​​são obtidos apenas 5 dias após o início da doença, quando a concentração de anticorpos atinge o nível desejado.

Sigmoidoscopia

Pelo fato do agente causador da disenteria afetar o intestino grosso, a sigmoidoscopia é um método diagnóstico significativo, mas não decisivo. O diagnóstico consiste na inserção de um retoscópio no ânus, equipado com um dispositivo que fornece ar. Ao inchar, a cavidade intestinal fica acessível para exame. Este método ajuda a avaliar o grau de dano ao epitélio intestinal. Na disenteria, as paredes intestinais tornam-se hiperêmicas como resultado da vasodilatação. Erosão e hemorragia ocorrem em algumas seções. A sigmoidoscopia não requer preparo, mas o procedimento não é realizado se houver fissuras anais ou patologias do ânus.

O exame bacteriológico é o método principal e mais comum no diagnóstico da disenteria. A presença de bactérias disenteria nas fezes dá diagnóstico clínico cem por cento de precisão. Em alguns casos, com formulários apagados, os dados do exame bacteriológico são decisivos. O método bacteriológico é utilizado não apenas para diagnosticar diversas formas de disenteria, mas também para determinar a cessação da excreção bacteriana por convalescentes, para identificar fontes de infecção, para detectar contaminação de objetos ambientais, produtos alimentícios e água.

O diagnóstico laboratorial geralmente aceito da disenteria, baseado na identificação dos micróbios da disenteria por propriedades bioquímicas e antigênicas, nem sempre detecta sua presença. As diferentes frequências de isolamento de patógenos da disenteria dependem em grande parte do método de coleta e envio do material para cultura, do dia da coleta desde o início da doença, da frequência do estudo, da qualidade do meio e do conservante e do método de pesquisa . É necessário reconhecer como incorreta a prática de coleta de fezes para pesquisa durante a antibioticoterapia, pois reduz drasticamente a inoculabilidade do patógeno.

Com a utilização de métodos diagnósticos laboratoriais mais racionais, o número de confirmações bacteriológicas de disenteria aumenta cada vez mais e chega a 70-80%.

Para aumentar a taxa de semeadura de Shigella, são utilizados meios nutritivos com adição de antibióticos. Com a adição de tetraciclina e cloranfenicol, a taxa de semeadura de Shigella aumenta 2,3 vezes.

A taxa de disseminação nas fezes patológicas é significativamente maior do que nas fezes normais. A dependência da semeadura do estado anatômico da mucosa retal e do segmento distal do cólon sigmóide foi estabelecida. A taxa máxima de semeadura é observada na forma catarral-ulcerativa. Porém, de acordo com nossos dados, dos 163 pacientes examinados por sigmoidoscopia, 37,4% apresentaram excreção bacteriana mesmo com mucosa normal.

Observamos 373 pacientes com disenteria confirmada bacteriologicamente. Micróbios de Sonne foram isolados de 64,7% dos pacientes, bacilos Flexner - de 25,4%, bacilos de Newcastle - de 3,4%, Boyd - Novgorod III - de 1,4% das crianças (Fig. 13). Alguns pacientes (5,1%) foram internados no hospital já com infecção mista, e neles foram detectados alternadamente diferentes tipos de micróbios (principalmente Sonne e Flexner). Em 3 pacientes, 2 tipos de micróbios de disenteria foram semeados simultaneamente a partir de uma amostra fecal - Flexner e Sonne (em 2 casos), Sonne e Newcastle (em 1 caso). As culturas subsequentes produziram 1 espécie de patógeno da disenteria. As culturas bacteriológicas no hospital foram realizadas de 4 a 7 vezes por mês. Um total de 4.810 estudos foram realizados. A análise dos estudos bacteriológicos mostrou que uma única cultura foi observada em 23,7% dos pacientes, enquanto na disenteria de Sonne - em 26,5% dos casos, na disenteria causada pelo micróbio Flexner - em 27,9% dos casos. O isolamento repetido de micróbios Sonne 2 ou mais vezes foi observado em 73,5% dos pacientes, micróbios Flexner - em 72,1% das crianças. Em 5,3% dos pacientes foi observada liberação prolongada de micróbios, de 9 a 16 vezes. A duração da disenteria causada por Shigella Sonne e Flexner, segundo nossos dados, não difere muito. Os micróbios Sonne foram isolados repetidamente dentro de 1-6 meses em 72,0% dos pacientes. por 7 a 12 meses - em 23,2%, mais de um ano - em 4,8% dos pacientes. A liberação repetida de micróbios Flexner dentro de 1-6 meses foi observada em 85,7% dos pacientes, de 7 a 12 meses - em 6,1%, mais de um ano - em 8,2% das pessoas.

Ressalta-se que nos anos subsequentes após mudanças na organização da internação com exclusão da possibilidade de reinfecção, a criação de grupos para convalescentes dependendo do tipo de patógeno, tal isolamento prolongado e persistente de micróbios da disenteria, segundo para nossos dados, foi observado com muito menos frequência. No entanto, mesmo na década de 70, o isolamento prolongado de Shigella em crianças com uma forma leve de disenteria apagada, segundo M. E. Sukhareva et al., foi observado por seis meses a 1 ano e 3 meses em 7,7% das crianças, segundo E. .V. Golyusova et al., - em 8,8% dos pacientes (dentro de um ano).

Ao estudar o curso clínico da disenteria com alteração do patógeno em 26 pacientes, observamos apenas em 10 crianças sintomas leves da doença; em 16 crianças, a alteração do tipo de patógeno disentérico não foi acompanhada sintomas clínicos doenças. Um estudo bacteriológico de crianças que tiveram uma mudança no tipo de patógeno mostrou que o corpo foi rapidamente libertado do patógeno. Em 20 de 26 crianças, um novo tipo de micróbio da disenteria (e em 17 crianças o novo tipo era o micróbio Flexner) foi semeado 1 a 3 vezes durante 1-2 meses, das quais em 12 crianças - apenas uma vez. Um estudo do curso do processo de disenteria com infecção por disenteria mista mostrou que a presença de 2 e às vezes 3 tipos de patógeno da disenteria não causa curso severo doenças.

Para determinar antígenos específicos nas fezes, são utilizados o teste de inibição da aglutinação do heme passivo (PHA) e o teste de aglutinação do heme indireto (IHA). Para mais alta sensibilidade RTPGA em comparação com o método bacteriológico e a possibilidade de detecção de antígeno em baixas concentrações de micróbios é indicada por L. I. Kalitseva e outros. L. P. Zueva observa que de 206 pacientes com disenteria, o diagnóstico de disenteria foi confirmado em 29,6% dos casos pelo método bacteriológico, e com auxílio de RNGA - em 40,3%. Demora 4 horas para encenar esta reação em vez de 3-4 dias com o método bacteriológico.

A reação de aglomeração de carbono (CAR) pode ser utilizada como método acelerado, específico e altamente sensível para o diagnóstico de disenteria. A facilidade de realização do RMA torna-o promissor para implementação na prática. Estudos que testaram a RUA no diagnóstico de disenteria e coinfecção revelaram alta especificidade e dependência da duração da doença.

Nos últimos anos, muitas cidades do país desenvolveram um método de pesquisa luminescente utilizando soros fluorescentes específicos. A principal vantagem deste método é a capacidade de obter uma resposta rapidamente, em 4 a 6 horas. Todas as cepas típicas de bactérias da disenteria exibem um brilho verde-amarelo brilhante quando coradas com soros fluorescentes homólogos; cepas atípicas brilham fracamente. Quando corado com soros fluorescentes heterólogos, não há fluorescência específica. Os resultados positivos do método sorológico luminescente são observados 2 vezes mais frequentemente que o bacteriológico. No entanto, foi estabelecido que quando Sh. flexneri e Sh. Newcastle, devido às suas conexões sorológicas com outras enterobactérias, são detectadas reações inespecíficas. Este método usado com sucesso para detectar Sh. sonnei e especialmente durante exames em massa.

Para tipagem intraespecífica de Sh. sonnei tem sido utilizado nos últimos anos para determinar biótipos, fagótipos, colicinogenicidade e sensibilidade à colicina e, com seu uso simultâneo, aumenta o valor epidemiológico da tipagem de Shigella. A tipagem intraespecífica de Shigella é de grande importância no processo epidemiológico, pois permite estabelecer a fonte da infecção e as vias de sua disseminação.

A digitação de culturas microbianas, incluindo micróbios da disenteria, é realizada pelo método de microeletroforese descrito por K. I. Markov. A alta especificidade do método de microeletroforese, baseado na determinação das diferentes motilidades das células bacterianas em campo elétrico na presença de soros imunes, permite recomendá-lo para a diferenciação de patógenos de infecções intestinais, incluindo micróbios da disenteria.

A pesquisa coprológica é utilizada há muito tempo. O exame macro e microscópico das fezes revela muco, leucócitos, glóbulos vermelhos, células epiteliais e a presença de pus, que é característico do processo disentérico. Porém, o mesmo coprocitograma também pode ser detectado em doenças intestinais de outras etiologias. Além disso, para formas leves de disenteria, o coprograma fornece dados muito escassos. Em um estudo coprocitológico de 264 crianças com disenteria leve (foram feitos 588 coprogramas), apenas em 17 pessoas (6,4%) encontramos eritrócitos e leucócitos únicos em uma quantidade de 11 a 35 por campo de visão. Mesmo em 3 crianças com alterações patomorfológicas pronunciadas na membrana mucosa do reto e cólon sigmóide (hemorragia, erosão), a coprocitoscopia de 3 e 4 vezes não detectou elementos patológicos indicativos de inflamação no intestino.

Para estudar com mais precisão as alterações morfológicas na mucosa intestinal durante a disenteria, foi proposto um método de impressão digital microscópica. As impressões resultantes refletiram bem as alterações morfológicas e os fenômenos de fagocitose de bactérias por leucócitos neutrofílicos - micro e macrófagos. Isto reflete os processos de degeneração e regeneração da mucosa intestinal. O método é simples e pode ser utilizado não apenas para o diagnóstico de disenteria, principalmente na diferenciação do transporte bacteriano das formas subclínicas de disenteria, mas também pode servir como critério para a eficácia do tratamento.

Para obter uma resposta indicativa acelerada, são utilizados métodos auxiliares, como a reação com um hapteno e a reação de aumento do título de fago. A reação com hapteno é baseada na identificação de polissacarídeos específicos de micróbios da disenteria por meio de uma reação de precipitação. Porém, devido à sua inespecificidade, esta reação não é adequada para o diagnóstico de disenteria. Quanto à reação de aumento do título de fago (RTR), deve-se notar que ela é específica método de diagnóstico. Além disso, um resultado positivo de RSF é observado em fases posteriores da doença, quando não é possível isolar a bactéria da disenteria. No entanto, apesar da elevada especificidade do RNF e da capacidade de obter uma resposta dentro de 10-11 horas, a utilização prática desta reacção é limitada devido ao surgimento e crescimento de estirpes de micróbios disenteria resistentes a fagos.

A maioria dos autores relata o valor diagnóstico do teste intradérmico com o alérgeno de Tsuverkalov como teste adicional para o diagnóstico precoce da disenteria, especialmente suas formas leves, tanto em adultos quanto em crianças. Segundo O. S. Makhmudov et al., um teste intradérmico com disenterina de Tsuverkalov revelou-se positivo para disenteria aguda em crianças em 83,7% dos casos, para disenteria prolongada em 70,0% e para disenteria crônica em 54,7% dos casos, e com a idade, o número de amostras positivas e sua intensidade aumentaram. E. N. Belan utilizou com sucesso o teste de Tsuverkalov para identificar fontes ocultas de infecção em grupos de crianças, e L. O. Sakvarelidze utilizou-o na prática epidemiológica para identificar fontes de infecção. Ao mesmo tempo, deve-se notar que com a alta especificidade do teste intradérmico, ele não é específico da espécie - uma reação positiva é observada em pacientes com disenteria de Sonne usando um alérgeno obtido dos corpos da bactéria Flexner.

Na identificação de culturas, o teste ceratoconjuntival tornou-se mais utilizado. A cultura de teste é introduzida no saco conjuntival de uma cobaia, e se após 18-20 horas (às vezes após 2-3 dias) ocorrer conjuntivite aguda e ceratite, a cultura é classificada como Shigella, uma vez que outros micróbios do grupo intestinal não não dê essa reação.

As reações sorológicas incluem a reação de aglutinação (AR), a reação de hemaglutinação indireta (IRHA), a reação de fixação do complemento (FFR), a reação de bacteriólise, etc.

As principais divergências entre os autores quanto ao uso do teste de aglutinação para disenteria dizem respeito a questões de especificidade, sensibilidade para várias formas disenteria e a altura do título diagnóstico. A especificidade da reação de aglutinação é indicada por I. V. Ovsievskaya, S. K. Japaridze, O. S. Makhmudov e outros, mas não podemos concordar com os autores - defensores da espécie e até mesmo do tipo de especificidade da reação de aglutinação.

Ao estudar a especificidade de espécie e tipo da reação de aglutinação durante nosso estudo de 705 soros de 301 pacientes com disenteria com confirmação bacteriológica, descobriu-se que o título médio para o micróbio Flexner foi 1:271, para o micróbio Sonne - 1:53 . Num estudo com 209 soros de 87 pacientes com disenteria de Flexner, foi observada reação de aglutinação positiva em 69,4% dos casos. Destes, isolados com a cultura de Flexner - em 77,9% dos casos com título médio para o micróbio Flexner de 1:362, em 19,3% dos casos foram observadas reações em grupo (simultaneamente com a cultura de Flexner e Sonne) e apenas em 2,8% dos casos, foi registrada uma reação com o micróbio Sonne. Relações completamente diferentes foram observadas na disenteria de Sonne. Em um estudo com 450 soros de 196 pacientes, foi obtida reação de aglutinação positiva em 60,2% dos casos com título médio para o micróbio Sonne de 1:60 e para o micróbio Flexner - 1:214. Uma reação de aglutinação positiva isolada com cultura Sonne foi observada em 13,3% dos casos, enquanto a reação com o micróbio Flexner foi positiva em 52,4% dos casos, e simultaneamente com 2 culturas - em 34,3% dos casos.

Com base nos resultados obtidos, chegamos à conclusão de que na disenteria de Flexner a especificidade da espécie da reação de aglutinação é expressa de forma bastante clara, o que não pode ser dito sobre a disenteria de Sonn. No entanto, não identificamos a especificidade do tipo da reação de aglutinação na disenteria de Flexner. Uma reação de aglutinação detalhada com vários sorotipos do bacilo Flexner em 37 crianças com disenteria causada pelo micróbio Flexner mostrou que em 34 das 36 reações positivas elas eram de natureza grupal, dos quais em 12 casos a reação grupal foi apenas com cepas heterólogas. Tigres com tipo heterólogo foram expressos mais intensamente que títulos para cepas homólogas. A razão para as amplas reações sorológicas cruzadas é a complexidade da estrutura antigênica dos micróbios da disenteria. O antígeno primário determina a especificidade do tipo, enquanto os antígenos acessórios são comuns a muitos tipos. Segundo nossos dados, o título da reação de aglutinação varia dependendo do tipo de patógeno e da idade do paciente. A disenteria de Flexner apresenta os títulos mais elevados. Títulos elevados (1:800-1:1600) com o micróbio Flexner foram observados em 11,1% dos casos, com o micróbio Sonne - apenas em 0,2% dos casos. A análise dos dados mostrou que na disenteria aguda as aglutininas foram detectadas nos primeiros 7 dias do início da doença, atingindo o máximo na disenteria de Flexner no 9º ao 10º dia e na disenteria de Sonne no 20º ao 24º dia.

Nos casos de disenteria prolongada (foram realizados 136 estudos em 61 crianças), a reação de aglutinação foi positiva em 65,4% dos casos. Ao estudar 477 soros de 195 pacientes com disenteria crônica, foram encontradas aglutininas no título diagnóstico em 63,7% dos casos. Não estabelecemos diferença significativa na reação de aglutinação e sua intensidade dependendo da natureza do curso do processo de disenteria, porém, foi observado um título mais elevado de aglutininas no curso recorrente da disenteria crônica. Estudos sobre a reatividade imunológica de crianças mostraram que o corpo da criança nos primeiros meses de vida não tem capacidade suficiente para responder imunologicamente à introdução do antígeno da disenteria. Essa habilidade torna-se bastante pronunciada após um ano de vida. A reação de aglutinação foi positiva em 1/4 dos pacientes menores de um ano e com títulos mais baixos (o título médio foi 1:117), após um ano - em 3/4 dos pacientes e com títulos mais elevados (em crianças de 1 ano a 2 anos, o título médio foi de 1:320).

Estudamos a reação de aglutinação antes e depois do tratamento com vários antibióticos, vacina contra disenteria e método combinado em 230 crianças. Resumindo os dados obtidos, concluímos que após o uso de uma vacina contra disenteria e um método combinado de tratamento de crianças com disenteria crônica, o título médio de aglutininas aumenta 1,5 vezes. Também não notamos um efeito inibitório pronunciado da antibioticoterapia na reação de aglutinação.

Quando examinamos 256 crianças internadas com diagnóstico de bacilos de disenteria, 173 pessoas (67,6%) apresentaram reação de aglutinação positiva, o que ajudou a estabelecer nelas o processo disentérico.

Resumindo os dados apresentados nesta seção, pode-se notar que a reação de aglutinação em combinação com outros métodos pode ser utilizada no diagnóstico laboratorial da disenteria. No entanto, devido à falta de especificidade de espécie e tipo e à presença de reações de grupo, é impossível determinar o tipo e tipo de patógeno da disenteria utilizando a reação de aglutinação.

Altamente específica e mais sensível que a reação de Widal é a reação de hemaglutinação indireta (IRHA), que foi proposta em 1954 por Noether e Walker com o diagnóstico de eritrócitos.

O valor diagnóstico do RNGA está atualmente fora de dúvida. Ao usar RNGA em pacientes com disenteria confirmada bacteriologicamente, foi observado um aumento no título de anticorpos de 1:100-1:800 ou superior em 92,5-100% dos casos. Títulos mais elevados em comparação com a reação de Widal e, mais importante, a especificidade das espécies conferem a esta reação um valor particular, no entanto, em crianças pequenas a percentagem de resultados positivos é bastante baixa.

É impossível não levar em conta o certo significado diagnóstico de um método imunológico como a reação opsonofagocítica, que na dinâmica da doença, especialmente em combinação com outros métodos, é útil para estabelecer a etiologia do distúrbio intestinal. Os defensores da alta especificidade da reação fagocítica na disenteria são K. A. Telkova; IV Korshun; O. S. Makhmudov e outros.

Estudamos a reação opsonofagocítica em 123 crianças com disenteria, bem como em 27 crianças com pneumonia e outras doenças que não apresentavam distúrbios gastrointestinais e sem história de disenteria prévia.

Verificou-se que se em 24 crianças (de 27) do grupo controle o percentual de fagócitos era baixo e variava de 4 a 20 com baixo índice fagocitário de 0,12 a 0,96, então em 122 (99,2%) pacientes com disenteria ( em Em todas as crianças, a disenteria foi confirmada bacteriologicamente) o percentual de fagócitos variou de 26 a 80 com índice fagocitário de 1,0 a 4,5, dos quais 108 crianças apresentavam percentuais médios e altos de fagócitos (51-80), 86 pacientes com índice fagocítico índice superior a 2,0. Não identificamos a especificidade da espécie da reação opsonofagocítica. A atividade fagocítica dos leucócitos em todos os níveis, inclusive médio e alto, foi detectada não apenas em uma cepa homóloga, mas também em uma cepa heteróloga de cultura de disenteria. Segundo nossos dados, na disenteria aguda, já a partir do 6º dia de doença, notou-se um índice fagocitário com indicadores altos e médios, e a partir do 13º dia esses indicadores diminuíram, aproximando-se do normal e até baixo.

Ao estudar o índice fagocitário em pacientes com disenteria prolongada, porcentagens médias e altas de fagócitos estavam em 25 dos 29 pacientes para o micróbio Sonne e em 23 pacientes para o micróbio Flexner. Ao mesmo tempo, constatou-se que durante 2,5 meses de doença foi observada fagocitose de intensidade moderada. Com a recuperação (no 3º mês), o índice fagocitário diminuiu para intensidade moderada (normal). Ao examinar 68 pacientes com disenteria crônica, foi revelado que o índice fagocitário em níveis médio e alto estava em 72,0% dos pacientes para o micróbio Sonne e em 76,5% para o micróbio Flexner. Indicadores moderados foram registrados em 28,0-22,0% dos pacientes e baixos (apenas para o micróbio Flexner) - em 1,5% dos pacientes. A curva do índice fagocitário na disenteria crônica, dependendo da duração da doença, tem caráter ondulado dentro da intensidade média da fagocitose. Uma comparação das taxas médias de fagocitose dependendo da natureza do curso da disenteria crônica mostrou que a atividade fagocítica nas formas recorrentes e assintomáticas da doença é maior do que nas contínuas.

Para comparar diferentes indicadores imunológicos Em 120 crianças com disenteria, estudamos simultaneamente a reação de aglutinação e o teste opsonofagocítico. A análise dos dados obtidos mostrou que em crianças de todas as faixas etárias menores de 5 anos, a reação opsonofagocítica na disenteria aguda, prolongada e crônica é positiva 2 a 3,5 vezes mais frequentemente do que a reação de aglutinação. Isso nos permite concluir que o índice fagocitário pode ser utilizado como método adicional para confirmar o diagnóstico de disenteria.

Nos últimos anos, um novo método sorológico para o diagnóstico de disenteria tem sido utilizado - o método de imunofluorescência em uma modificação indireta para detectar anticorpos específicos para micróbios da disenteria nos soros dos pacientes. Um título de 1:40 ou superior é considerado diagnóstico. Ao examinar crianças com disenteria, LE Shikhina et al., estabeleceram uma reação de imunofluorescência positiva em 69,2% dos casos com nível máximo de anticorpos fluorescentes dentro de 1:60.

Como testes sorológicos adicionais para diagnóstico e estudo da patogênese, destaca-se a reação de bacteriólise imunológica, que se baseia na lise de micróbios pelo soro imune na presença de complemento. A reação é específica. Ao final da primeira semana de doença e posteriormente, os títulos de bacteriolisinas no sangue de pacientes com disenteria confirmada bacteriologicamente eram de 1:320-1:640, enquanto no soro de bacteriolisinas saudáveis, via de regra, não há bacteriolisinas ou, em alguns casos, seu título é 1:10-1:40.

Atualmente, um indicador de dano aos neutrófilos sanguíneos (BND) é utilizado como exame auxiliar no diagnóstico da disenteria, o que permite identificar a formação de sensibilização específica na disenteria. O teste PPN é mais sensível que o teste cutâneo. O método é bastante simples (basta 0,16 ml de sangue retirado de um dedo), inofensivo, pois é produzido in vitro (com disenterina), o resultado da reação pode ser obtido após 4-5 horas. Nas crianças com disenteria aguda foram observados valores médios e altos de PPN em 64 + 3,7% dos casos.

A sigmoidoscopia como método adicional valioso para o diagnóstico de disenteria bacilar é conhecida há meio século, mas tem sido utilizada na prática pediátrica nas últimas décadas.

Submetemos 153 crianças com formas leves e apagadas de disenteria com idades entre 1 e 6 anos (126 crianças menores de 3 anos) e 10 crianças com bactérias da disenteria a um estudo de sigmoidoscopia. Foram realizadas 322 sigmoidoscopias – antes do tratamento e antes da alta. Alterações morfológicas durante o exame de sigmoidoscopia foram encontradas em 66,7% dos pacientes com disenteria, principalmente na forma de proctosigmoidite catarral (em 71,6% das pessoas). Nessa forma de lesão, a membrana mucosa do reto e do cólon sigmóide estava hiperêmica, solta e vulnerável e havia muco turvo em forma de caroços na parede intestinal. Inflamação catarral-hemorrágica da mucosa foi detectada em 8,8% dos pacientes, processo catarral-erosivo - em 13,7% das crianças. Em todas as crianças com esta lesão foram observadas pequenas erosões superficiais únicas na profundidade de 7 a 17 cm. Em 5,9% dos pacientes foram detectadas alterações atróficas, nas quais a mucosa do reto e cólon sigmóide em algumas áreas era cinza pálido em cor, as dobras foram suavizadas, a elasticidade da mucosa foi em grande parte perdida. Descobrimos que alterações patológicas na mucosa intestinal durante a disenteria em crianças de 1 a 2 anos não são menos comuns do que em crianças mais velhas. O estudo do estado morfológico da membrana mucosa do reto e cólon sigmóide, dependendo do curso do processo disenterial, mostrou que alterações patológicas foram mais frequentemente observadas na disenteria aguda, apesar do quadro clínico turvo nesses pacientes. As alterações mais pronunciadas na disenteria aguda foram encontradas nas primeiras 2 semanas da doença. À medida que a doença progredia, as alterações inflamatórias na membrana mucosa do intestino grosso distal diminuíram, mas ainda em 10 crianças examinadas nos estágios finais da doença (após o 20º dia), foram observadas alterações bastante pronunciadas na mucosa na forma de proctosigmoidite catarral. Nos casos de disenteria prolongada e crônica, alterações patomorfológicas na membrana mucosa do intestino grosso distal foram detectadas em 63,6% dos pacientes (77 de 121). Alterações significativamente pronunciadas na mucosa na forma de proctite e proctosigmoidite catarral-erosiva e catarral-hemorrágica foram observadas principalmente em pacientes com disenteria crônica recorrente. Nas crianças com curso contínuo prevaleceram as alterações catarrais.

Não notamos relação pronunciada entre o tempo de normalização da mucosa do intestino distal e o método de tratamento. Em todos os casos, a recuperação da mucosa ficou significativamente aquém da recuperação clínica.

Um estudo sobre a questão da correspondência da natureza das fezes com o quadro da sigmoidoscopia mostrou que em 21,6% dos pacientes essa correspondência não foi observada. Dos 115 pacientes com fezes patológicas, 91 crianças apresentavam mucosa alterada (em 24 pacientes a mucosa era normal). Das 48 pessoas com fezes claras, foram encontradas alterações patomorfológicas na membrana mucosa do intestino distal em 11 pacientes. Nossa análise dos estudos de sigmoidoscopia não mostrou diferenças nas alterações patomorfológicas dependendo do tipo de patógeno.

A sigmoidoscopia é um método adicional valioso para distinguir o transporte saudável de bactérias da disenteria doenças pulmonares, formas apagadas de disenteria. Quando realizada com habilidade e cuidado, a sigmoidoscopia em crianças não causa complicações e é facilmente tolerada. No entanto, na prática pediátrica, a sigmoidoscopia é utilizada de forma limitada. Pode ser utilizado em crianças maiores de um ano e em fases mais avançadas da doença, desde que o médico tenha ampla experiência na avaliação de alterações visíveis.

A biópsia aspirativa da mucosa distal do cólon só passou a ser utilizada nos últimos anos. A biópsia é realizada durante a sigmoidoscopia com instrumentos especiais. O exame morfológico intravital é realizado tanto na disenteria aguda quanto na disenteria crônica. Este método é especialmente valioso para identificar formas leves e apagadas de disenteria. De acordo com A.P. Tarasova, G.I. Osinova, que realizou biópsia aspirativa em crianças com disenteria aguda, são observadas formas de inflamação catarral-hemorrágica com infiltração leve. Durante o período de recuperação clínica não foi observada normalização completa da mucosa.

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