Розшифровка аналізу методом ІФА. Що таке імуноферментний аналіз? Коли буде готовий аналіз

З прогресом сучасної медицини вдається проводити більш поглиблену діагностику за підозри на ті чи інші патології у пацієнта. Одним із інформативних методів лабораторного дослідження став ІФА аналіз, який проводять методом забору венозної крові. Тобто для пацієнта нічого не змінюється. А ось лаборант-аналізатор ІФА проводить складну техніку дослідження забраного біоматеріалу. У тому, що таке аналізи ІФА і які тонкощі застосування ІФА методу як діагностичного, розбираємося в матеріалі нижче.

Що таке імуноферментний аналіз?

Вироблення антитіл провокують самі антигени, що проникли в організм людини. При вступі в «битву» за здоров'я організму антитіла як би позначають антигени, що при дослідженні крові і бачить лаборант. Тобто у забраному біоматеріалі можна відстежити не тільки наявність інфекції, а й її сліди вже після того, як організм одужав.


Таким чином, призначаючи імуноферментний аналіз крові пацієнту, лікар може відстежити давність інфекції, ступінь її прогресування або виявити наявність імунітету до тієї чи іншої інфекції.

Процес ІФА діагностики виглядає таким чином:

  • Забрана венозна кров наводиться в лабораторії стан сироватки крові;
  • Потім лаборант використовує спеціальний лоток з осередками, у кожному з яких є всі необхідні антигени. Досить просто капнути в кожен осередок сироватку крові та відстежити реакцію імуноглобулінів (антитіл) на антигени. Про наявність «потрібної» реакції свідчить зміна кольору матеріалу, що досліджується. Надалі лаборант вивчає оптичну густину досліджуваного середовища.
  • Аскаридоз та ентеробіоз (аскариди та гострики);
  • Трихінельоз;
  • Описторгосп в гострій та хронічній формах;
  • Лямбліоз;
  • Амебіоз;
  • Токсоплазмоз;
  • Лейшманіоз у будь-якій формі.

Важливо: імуноферментний аналіз буває як якісним, і кількісним. У першому випадку лаборант лише підтверджує чи спростовує наявність шуканої речовини у крові. У другий випадок у результаті аналізу вказують його концентрацію в організмі пацієнта.

Недоліки методу

При всіх перевагах такого способу діагностики варто розуміти, що імуноферментний аналіз крові - не спосіб знаходження причини хвороби пацієнта, а лише метод підтвердження передбачуваного лікарем діагнозу. А з огляду на те, що дослідження є досить недешевим, використовувати його потрібно з розумом. При цьому результати дослідження має трактувати лише кваліфікований спеціаліст.


Розшифровка результатів

Після того як ми розібрали абревіатуру ІФА і що це таке з'ясували, чи варто перейти до трактування результатів. Тут важливо розуміти, що й аналіз проводили якісний, то результат буде лише позитивним чи негативним. Тобто діагностика чи підтверджує підозри лікаря щодо певного діагнозу, чи спростовує їх. У цьому випадку в бланку стоятимуть символи "+" або "-" відповідно.


Важливо: негативний результат аналізу який завжди свідчить про відсутність інфекції. Справа в тому, що антитіла до антигенів можуть формуватися протягом 14 днів після інфікування і цілком ймовірно, що вони ще не сформовані.

Якщо ж проводиться кількісний аналіз, тут визначається вид антитіл, їх кількість і стадія активності. Зокрема, при такій діагностиці визначають антитіла (імуноглобуліни) IgG та IgM, які формуються в різні періоди прогресування інфекції. Найпоширенішими варіантами результатів у цьому випадку є:

  • Підвищений IgМ та повна відсутність IgG. Така картина свідчить про недавнє інфікування та гостру фазу перебігу патології.
  • Підвищена активність імуноглобулінів обох видів (IgМ та IgG). Говорить про давнє та хронічне перебіг інфекційного процесу.
  • Активність IgG та повна відсутність IgМ. Інфікування було не менш як півроку тому і зараз вірус перебуває в затяжній хронічній стадії.
  • Відсутність антитіл IgG та IgA. Результат не визначено.
  • Відсутність антитіл IgM, IgA та IgG. Свідчить про відсутність імунітету до певної інфекції.
  • Активність антитіл IgG, IgM та IgA говорить про загострення хронічного процесу.

Крім виявлення типів антитіл, лаборант у спеціальній графі бланка вказує і їх кількість на об'єм крові. Пам'ятайте, розібравшись у тому, що таке метод ІФА, не тлумачте результати самостійно. Отримані результати з точністю може інтерпретувати тільки лікар, що залежить від передбачуваного діагнозу, що вибудовується на підставі клінічної картини у пацієнта.

Іноді лікарі призначають аналізи ІФА, що це таке знають далеко не всі. ІФА розшифровку має таку – імуноферментний аналіз крові. Таке дослідження крові допомагає зрозуміти, як організм бореться із хворобами інфекційного спектру та продемонструвати фазу захворювання. Імуноферментне дослідження допомагає в оцінці захисної діяльності крові, виявленні імунодефіциту при патологіях, пов'язаних з інфекціями, гормональних проблем тощо.

Аналіз крові ІФА працює з матеріалом, який забирається із вени. Крім цього, доступний для дослідження вміст склоподібного тіла, рідина зі спинного мозку, мазки з уретри або цервікального каналу. Для імуноферментного аналізу ІФА у вагітних жінок можуть забирати рідину, якою оточений плід.

При цьому безпосередньо кров ІФА може перевірятися з використанням різних технік. Є прямий, непрямий спосіб, конкуренція та блокування. При зараженні організму якимось хвороботворним агентом, який називається антигеном, імунітет починає виробляти специфічні антитіла, наприклад, гепатит. Ці антитіла спрямовані на те, щоби «розібратися» з чужорідними агентами. Що таке антитіла? Це спеціальні білки, які можуть вступати у зв'язок з антигенами і утворювати комплекси імунологічної спрямованості, які називаються антиген-антитіло. Саме виявлення цих комплексів і відповідає ІФА діагностика.Щоб виявити антиген, до отриманого зразка крові додаються антитіла або виконується зворотна процедура.

ІФА позитивний результат будується на реакції імунітету та ферментів. Під дією першої агенти інфекцій та клітинні елементи зв'язуються, друга допомагає візуалізувати результат першої. Імунна реакція передбачає антитільну та антигенну зв'язку. Внаслідок цього процесу і формується комплекс імунної спрямованості. Усі клітини своєї поверхні мають антиген. Імунною клітиною здійснюється захоплення підозрілою, а антиген, який закріплений на поверхні, проходить процедуру порівняння з інформацією, яка завантажена в пам'ять. Якщо є збіги описи, то клітина повертається додому, якщо ж ні, то відбувається зв'язок, за створення якого відповідає антитіло, яке кріпиться до поверхні.

Ферментативна реакція тим часом дозволяє речовинам перетворитися на нові. На матеріал виконується дія ферментом. У цьому ферментальне різницю забезпечується різними субстратами. Продукт, який став наслідком цієї реакції, вирушає визначення кількості збудника, визначення якого грунтується на щільності розчинного забарвлення.

Особливості методу

Імуноферментний аналіз крові призначається, коли необхідно діагностувати алергію, хвороби, що мають вірусне походження. Є й аналіз ІФА на сифіліс та низку інших інфекцій, передача яких відбувається при незахищеному статевому контакті. Така діагностика стає дедалі популярнішою порівняно з ПЛР. Справа в тому, що ПЛР передбачає роботу з мазками. На відміну від ПЛР, результати ІФА можуть бути отримані при кров'яних перевірках.

Крім цього, аналіз крові методом ІФА може призначатися, коли потрібно встановити наявність імунодефіциту, діагностувати онкологію, дати оцінку тому, наскільки ефективно лікування, визначити гормональний рівень та пройти передопераційне обстеження у комплексі.

Якщо порівнювати дослідження методом ІФА, наприклад, з ПЛР, можна виявити низку переваг. Основним є можливість повної діагностики навіть на ранніх стадіях розвитку. Крім цього, результати ІФА допомагають у визначенні конкретної стадії захворювання, на якому рівні знаходиться його розвиток.

ІФА аналіз у порівнянні з ПЛР має більш високу ефективність, крім того, здавати його можна під час вагітності, щоб виявити ЗПСШ. Той, хто здав цей аналіз, може дізнатися про концентрацію ТТГ у сироватці крові. Це дуже важливо, щоб перевірити, якою є реакція щитовидної залози, чи присутні збої в її роботі.

Додатковими достоїнствами, втім, їх має і полімеразна ланцюгова реакція, є швидкість дослідження, а значить, швидке отримання результатів. Достойно оцінюють лікарі та точність результатів. Якщо йдеться про ЗПСШ, то рівень сягає 98 відсотків, як і у випадку з концентрацією ТТГ.

Звісно, ​​без недоліків не обходиться. Однак у цьому випадку йдеться про непрямі особливості тесту. Зокрема, йдеться про те, що не можна виключити можливі помилки щодо норм. Іноді аналіз, який здавала абсолютно здорова дівчина, може продемонструвати хибнопозитивний результат, або негативний у протилежному випадку. Проте класифікація методів психологічного дослідження найчастіше пов'язує такі недоліки з неправильною підготовкою чи порушенням техніки, з якою виконувався забір матеріалу.

Особливості виконання

При ІФА аналізі здебільшого здається кров. Перед здаванням крові важливо витримати щонайменше восьмигодинне голодування, виключити прийом низки медичних препаратів, які впливають результат аналізу. Йдеться про антигістамінні медикаменти та гормональні препарати, що впливають на роботу щитовидки. Крім цього, виключений має бути алкоголь не менше ніж за добу. Забезпечте відсутність куріння не менше ніж за годину до крові. Спотворення результату можливе і при прийомі наркотичних речовин.

Перш ніж перейти до розшифровки, варто згадати, які методи вимірювання використовуються для такого тесту. В результаті аналізу будуть вказуватись антитіла або імуноглобуліни Ig. Під ними розуміються ті самі специфічні білки, про які раніше йшлося. За вироблення їх відповідають В-лімфоцити, як тільки в організм потрапляють віруси, бактерії чи грибки. Виділяється п'ять видів імуноглобулінів, що позначаються латиницею.

Відмінності їх пов'язані з різною молекулярною формою та масою. У них різний період напіврозпаду, по-різному бере участь або не приймається в інфекційних процесах. Варіюються і терміни, у яких їх можна виявити з моменту, як відбулося інфікування.

Якщо класифікувати імуноглобуліни, використовуючи як основу молекулярну вагу, то найбільші показники у IgM. Особливістю такого типу імуноглобулінів є можливість проходження через плацентарний бар'єр. Якщо IgM виявляється в аналізі у новонародженої дитини, йдеться про наявність інфекції у плода.

У переважній більшості крові в людини містяться імуноглобуліни IgG, найменше IgE. Говорячи про роботу в рамках інфекційних процесів, особливе значення варто приділяти варіантам A, M, G. IgE виступає як маркер алергічної реакції. IgD виявляється тільки в тканинах лімфовузлів та мигдаликів. Це важливо з погляду створення імунітету місцевого рівня.

Крім цього, в аналізі визначаються антигени. Під ними розуміються речовини високомолекулярного типу, відомі своїм органічним походженням. Зокрема, йдеться про збудників захворювань інфекційного та іншого спектру. Крім цього, маються на увазі і речовини, що сигналізують про різні зміни клітин, які неминучі за цілого ряду хвороб. Також вказується і імунний комплекс, який демонструє комплекс антиген-антитіло, яким бере участь у імунному процесі.

Зазвичай термін виготовлення залежить від конкретної лабораторії, до якої ви звернулися. Ряд лабораторій може надати результати протягом дня-двох, іншим потрібен тиждень. Затримки можуть бути пов'язані з необхідністю накопичити певну кількість сироватки.

Вплив на результати та розшифровка

Незважаючи на те, що ІФА вважається одним із найбільш точних методів перевірки, похибки таки трапляються. Вплинути на правильність результатів може процедура взяття матеріалу, неправильне його транспортування та зберігання матеріалу. Прийом медикаментів, як зазначалося вище, присутність прихованих захворювань. Порушення обміну речовин чи імунодефіцит теж дозволять отримати правильні показники. У період до року у новонароджених теж можуть бути не зовсім вірні показники. Пов'язано це з тим, що в організмі є материнські антитіла.

Говорячи про розшифровку, в бланках аналізу використовується позитивний або негативний знак, яким позначаються результати обчислення кожного з імуноглобулінних класів. Як можливих варіантів виступатимуть такі.

Відсутність виявлених IgG, IgA та IgM говорить про повне одужання. Негативний результат таких компонентів як IgM, IgA, IgG – це відсутність імунітету до інфекції.

Поєднання позитивного і негативного результату IgG, IgA в комплексі з позитивним IgM говорить про присутність в організмі інфекції в гострій формі. Позитивний результат IgG, що комбінується негативними показниками за IgA та IgM, відповідає поствакцинальному періоду або придбання імунітету в результаті перенесеної інфекції.

Поєднання позитивного або негативного результату IgG, IgA та негативного результату IgM говорить про присутність інфекції в хронічному її перебігу. Позитивний результат за трьома компонентами: IgG, IgM, IgA означає загострення інфекції, яка перебувала у хронічній формі перебігу. Крім безпосередньо уточнення антитілових класів, у рамках розшифровки аналізу ІФА лікар отримує інформацію про їх кількісні показники. Важливо підкреслити, що за розшифровку повинен відповідати лікар. Справа в тому, що поєднання деяких компонентів може наштовхнути його на думку про отриманий хибний результат, що призведе до повторної здачі. Самостійна розшифровка в такому разі марна.

Як проводиться дослідження методом ІФА

Механізм реакції

В основі імуноферментного аналізу лежить імунна реакція антигену з антитілом, а приєднання до антитіл ферментної мітки дозволяє враховувати результат реакції антиген-антитіло за появою ферментативної активності або зміни її рівня.

Перша реакція відбувається між визначеним Ig (Ab) та очищеним антигеном збудника (Ag), фіксованим до поверхні лунок імунологічного планшета.

Для виявлення утворених імунних комплексів проводять другу імунологічну реакцію, в якій як антиген виступає специфічний Ig, а в якості антитіл до нього - коньюгат, що являє собою Ig (Ab) до відповідного Ig людини, мічений ферментом-пероксидазою (K)

Далі відбувається ферментативна реакція, що каталізується ферментною частиною молекули коньюгата. Субстратом даної реакції служить безбарвна речовина - хромоген, який у ході реакції утворює забарвлену речовину. Інтенсивність забарвлення в лунці певним чином залежить від кількості імуноглобулінів, що містяться в пробі.

Підрахунок результатів

Проведення імуноферментного аналізу

Для серодиагностики використовуються 96 лункові полістирольні планшети, на стінках осередків яких заздалегідь адсорбується антиген. Досліджувана сироватка вноситься в комірку планшета. При цьому гомологічні антигени антитіла прикріплюються до нього. Антитіла, що не прикріпилися, видаляються промиванням. Далі в осередки вносять антитіла проти імуноглобулінів (антитіл) людини, мічені ферментом. Якщо в досліджуваній сироватці були визначені антитіла, то вони на цьому етапі виступлять у ролі антигенів, з якими прореагують мічені антитіла. Додавання після промивання хромогенної речовини (барвника) дозволить врахувати реакцію по фарбуванню, що розвивається в осередках. Інтенсивність забарвлення при цьому пропорційна кількості ферменту, а отже кількості антитіл. для кожної тест-системи є свої показники обліку результатів та показники норми та патології на які треба орієнтуватися при інтерпретації результатів.

Які інфекції можна виявити методом ІФА

В основному в сучасній венерології застосовується для діагностики сифілісу (в комплексі з іншими реакціями), ВІЛ-інфекції, вірусних гепатитів. Має обмежене значення для діагностики хламідійної інфекції, цитомегаловірусної інфекції та інших герпетичних інфекцій. рівня гормонів, автоантитіл і різних маркерів онкологічних захворювань.

Як інтерпретувати результати ІФА

Дослідження наявності та рівня антитіл різних класів у деяких випадках допомагає визначити стадії інфекційного процесу

Стадія захворювання

IgM

IgA

IgG

Первинна фаза
(2 тижні від інфікування)

Первинна фаза
(2,5 – 3 тижні від інфікування)

Первинна фаза
(3-4 тижні від інфікування)

Загострення хронічної фази
(2 тижні від початку загострення)

Хронічна фаза

Минула (вилікувана інфекція)

Одужання

зниження титру у 2-4 рази після успішного лікування

зниження титру у 4-8 разів через 1-1.5 міс після успішного лікування

Негативний результат

На жаль, така важлива перевага ІФА як кількісне визначення антитіл не має великого значення в практичній роботі - тобто. не дозволяє точно встановити діагноз і не впливає на дозування та термін призначення лікарських засобів.

Яка роль метод ІФА у діагностиці сифілісу

Метод ІФА в діагностиці сифілісу був вперше застосований в 1975. В даний час він широко застосовується для серологічної діагностики сифілісу в Росії і використовується як підтверджує тест на сифіліс. Зазвичай проводять дослідження, що виявляє так звані сумарні антитіла до антигенів блідої трепонеми (IgM і хоча в окремих випадках можливе і визначення тільки "ранніх" антитіл класу М.ІФА при сифілісі стає позитивним після 3 тижня з моменту інфікування і залишається позитивним досить тривалий час навіть після лікування (іноді все життя). ІФА немає. У більшості випадків проводиться лише якісне визначення ІФА - тобто. лише позитивний чи негативний результат, хоча й кількісне визначення.

Імуноферментний аналіз(або скорочено ІФА) – це лабораторне дослідження, яке допомагає поставити точний діагноз, виявити приховані хвороби, визначити схильність до тих чи інших захворювань, а також контролювати ефективність призначеної терапії. Під час дослідження у сироватці крові пацієнта виявляються антигени, характерні для конкретних збудників, та антитіла до них.

В чому суть

Щоб зрозуміти принцип проведення ІФА, необхідно згадати, як працює імунна система організму, що таке «антиген» і «антитіла», і які функції вони виконують.

Антиген – це молекула, яка несе певну інформацію про клітину. Якщо в організм потрапляє чужорідний антиген, антитіла (або імуноглобуліни (Ig) у відповідь на появу в організмі чужорідного мікроорганізму зв'язуються з ним і упізнають, чи це свій чужий. При сигналі «чужий», антитіла починають знищувати потенційно небезпечний об'єкт. Така взаємодія «антиген -антитіло» називається імунним комплексом. На ньому і ґрунтується метод ІФА.

Показання

Аналіз широко застосовується для діагностики різноманітних захворювань. І що особливо цінно, це дослідження досить точно діагностує захворювання, які протікають в організмі приховано, без симптомів.

З його допомогою можна виявити:

  • інфекційні захворювання, що передаються статевим шляхом (хламідіоз, уреаплазмоз, мікоплазмоз, сифіліс, герпес, ВІЛ тощо);
  • токсоплазмоз, туберкульоз, гепатити, кір тощо;
  • аутоімунні проблеми;
  • онкологію;
  • статеві гормони;
  • гормони щитовидної залози;
  • алергію.

ІФА дозволяє виявити навіть маркери серцевих захворювань. Крім того, його призначають і для оцінки ефективності курсу лікування, що проводиться, а також перед деякими видами хірургічних втручань.

Підготовка

Кров для дослідження береться з вени натще, бажано, вранці.

Напередодні слід утриматися від алкоголю, солодких напоїв, кави та великої вечері. Крім того, на результати показників може вплинути прийом певних лікарських засобів, тому необхідна консультація з лікарем.

За 4 години до проведення слід виключити куріння.

Імуноферментний аналіз крові в ВІН КЛІНІК

Міжнародний медичний центр ВІН КЛІНІК оснащений власною лабораторією з міжнародним сертифікатом контролю якості. Тут досвідчені та кваліфіковані фахівці проводять різноманітні аналізи (понад 1000 найменувань).

Серед переваг даного методу можна виділити те, що він вже на ранніх етапах розвитку хвороби виявляє її. Чутливість тесту складає 90%. Дослідження точно показує динаміку інфекційного процесу, що дозволяє фахівцеві відстежувати ефективність терапії. Весь процес проведення повністю автоматизований, що унеможливлює вплив так званого «людського фактора».

Додатково до того, високоточне обладнання дозволяє отримати достовірні результати дослідження за мінімально короткий проміжок часу.

Розшифрувати результати Ви зможете того ж дня із лікарем. На основі їх лікар вибере тактику лікування, яка підходить саме Вам.

ВІН КЛІНІК: За понад 25 років роботи нас обрали мільйони людей. Приєднуйтесь!

Лікарі

Адміністратор зв'яжеться з Вами для підтвердження запису. ММЦ «ВІН КЛІНІК» гарантує повну конфіденційність Вашого звернення.



Випадкові статті

Вгору