Лабораторна діагностика бактеріальної дизентерії. Аналіз на дизентерію

Аналіз на дизентерію– це збірне поняття, яке включає загальноклінічні та специфічні методидослідження, які допомагають встановити не тільки остаточний діагноз шигельозу (більше сучасна назвадизентерії), але й оцінити ступінь порушень у різних системах органів в організмі.

Чоловік алкоголік?

Лабораторна діагностика дизентерії включає:

• загальноклінічні методи (традиційні дослідження крові та сечі);
• копрограму;
• біохімічні випробування;
• бактеріологічний метод;
• серологічні реакції;
• шкірно-алергічну пробу (рідко);
• Інструментальні дослідження.

Доцільність того чи іншого діагностичного дослідженнявизначається діючою лікарською документацією, саме протоколами надання медичної допомоги. Регламентується не лише складові діагностики шигельозів, а й кратність їхнього проведення. Ця деталь важлива для так званої декретованої групи, тобто людей, які працюють у харчовій промисловості та дитячих колективах – певна кількість негативних аналізів є основою допуску на роботу.

Загальноклінічні методи

Дослідження клітинного складу крові

Втомилися від вічних п'янок?

Багатьом знайомі ці ситуації:

• Чоловік зникає десь із друзями та приходить додому "на рогах"...
• Вдома зникають гроші, їх не вистачає навіть від зарплати до зарплати...
• Колись кохана людина стає злою, агресивною і починає розпускати руки.
• Діти не бачать батька тверезим, тільки вічно незадоволеного п'яницю.

Цей рутинний метод дослідження може бути досить інформативним саме при дизентерії, оскільки відбиває ступінь тяжкості захворювання. При легкому перебігу загальному аналізі крові може бути не виявлено будь-яких змін або вони будуть незначними. Навпаки, при тяжких формах захворювання, типові для бактеріальної інфекції акценти виражені дуже бурхливо.

При тяжких формах шигельозу можуть бути виявлені:

• значне збільшення абсолютної кількості лейкоцитів (тобто гіперлейкоцитоз);
• суттєвий зсув формули вліво, тобто збільшення абсолютної та відносної кількості паличкоядерних лімфоцитів, аж до появи юних форм;
• токсична зернистість нейтрофілів;
• підвищення швидкості осідання еритроцитів;
• зниження рівня кольорового показника та концентрації гемоглобіну, кількості червоних кров'яних тілець (еритроцитів), тобто класичні ознаки анемії.

Виражені зміни у загальному аналізі крові свідчать не тільки про тяжкий перебіг захворювання, але й про можливий розвиток ускладнень, таких як кишкова кровотеча.

З іншого боку, навіть виражені зміни у загальному аналізі крові мають неспецифічний характер, тобто можуть спостерігатися при багатьох інших захворюваннях, тому є підставою для того, щоб поставити остаточний діагноз.

Дослідження сечі

Тільки у разі дуже тяжкого перебігу захворювання спостерігаються зміни у загальному аналізі сечі, які є наслідком вираженої інтоксикації. До таких ознак відносять появу еритроцитів, велику кількість лейкоцитів і циліндрів, а також збільшення концентрації білка. З метою виключення можливої ​​патології сечовивідних шляхівслід повторити загальний аналіз сечі після стихання клінічної симптоматики дизентерії.

Копрограма

Аналіз калу відбивають усі зміни, типові для дизентерійного ураження кишечника. Крім того, характер та ступінь виявлених змін безпосередньо пов'язаний зі ступенем тяжкості клінічного перебігу захворювання.

При дослідженні калу спостерігаються такі зміни:

• збільшена кількість лейкоцитів (у нормі можуть бути лише поодинокі);
• поява еритроцитів (у нормі відсутні);
• слиз у різній кількості (у нормі не визначається);
• неперетравлені частинки їжі та епітелій як результат порушення процесів перетравлення їжі, а також пошкодження епітеліальної тканини кишечника.

Необхідно розуміти, що отримані результати копрограми, як і загальноклінічні аналізи сечі і крові, що неспроможні розглядатися як остаточна діагностика шигельозу. Щоб встановити конкретний вид шигели, що спричинив розвиток клінічної симптоматики хвороби у даного хворого, а також оцінити її чутливість до певних антибіотиків, потрібна повноцінна мікробіологічна діагностика дизентерії.

Специфічна діагностика

При підозрі на дизентерію діагностика має на увазі виділення збудника з біологічних рідин пацієнта (насамперед з калових мас, рідше промивних вод шлунка та блювотних мас) або визначення титру захисних антитіл, які виробляються у відповідь на впровадження мікробного агента.

Бактеріологічний метод

Є найбільш поширеною, інформативною і доступною в більшості випадків і переважною кількістю клінік. Забір калових мас на дослідження слід проводити у перші дні хвороби. Можуть бути використані калові маси, одержані природним способом, а також взяті трубкою для ректороманоскопії або ватним тампоном (своєрідний мазок). Збирають біологічний матеріал у чисту, але не оброблену дезінфікуючими розчинами ємність.

Найбільша кількість збудника дизентерії виявляється у тих ділянках калу, де є слиз і гній. Посів проводиться на звичайні живильні середовища - Левіна, Плоскірєва, Ендо. Результат, що містить не тільки вичерпну інформацію про вид шигели, а й параметри чутливості до антимікробних препаратів, лікар отримує на 3-5 день після забору матеріалу.

Серологічний метод

Менш інформативний у порівнянні з методом бактеріологічним. Це з тим, що клінічна картина неускладненої і легкої дизентерії не триває понад 5-7 днів, а серологічний метод при дизентерії займає значно більше часу. Пацієнт рідко проводить на лікарняному ліжку 2-2,5 тижня в очікуванні результатів серологічної реакції. Серологічні реакції можуть бути корисні та інформативні як спосіб ретроспективної діагностики або при проведенні наукових досліджень.

Найчастіше проводиться постановка реакції аглютинації: у сироватці крові хворого за допомогою відомих антигенів виявляється наявність захисних антитіл у певній концентрації. Інформативність реакції аглютинації доцільно оцінювати динаміці.

Реакція непрямої або прямої аглютинації менш специфічні. Взяття сироватки крові проводиться не раніше 4-5 днів хвороби, повторно на 12-14 день від початку клінічних проявів. Алергологічна діагностика

У середині ХХ століття одним з обов'язкових досліджень при шигельоз будь-якої тяжкості була шкірно-алергічна проба з дизентеріном (проба Цуверкалова). У сучасній медичній практиці через алергізацію населення та неспецифічність цієї проби від її постановки в більшості клінік відмовилися.

Інструментальна діагностика

Найбільш поширена така методика, як ректороманоскопія. Для її проведення необхідний лише грамотний навчений фахівець та портативний апарат. Немає необхідності у виділенні окремого приміщення, його спеціального оснащення та інших технічних деталей.

Трубка ректороманоскопа вводиться задній прохід на певну глибину. Візуально оцінюється стан слизової оболонки нижніх відділів прямої кишки та сфінктера. При дизентерії виявляються:

• виразкові дефекти різних розмірів;
• дифузний набряк та гіперемія слизової оболонки;
• осередки крововиливів.

Ректороманоскопія призначена для оцінки ефективності призначеної терапії (є чи ні позитивна динаміка, тобто загоєння виразок), а також виключення інших, подібних до клінічної симптоматикизахворювань (неспецифічний виразковий коліт, пухлинна освіта). У початковий період шигельозу не показано проведення цього дослідження, оскільки дискомфорт пацієнта від процедури перевищує його діагностичну цінність.

Фіброколоноскопія (проникнення у вищі відділи кишечника) показана лише за необхідності виключення інших хвороб кишечника (новоутворень).

Таким чином, лише комплексна діагностика дизентерії дозволяє правильно оцінити ступінь тяжкості стану пацієнта та ефективність призначеної терапії.

Дизентерия.

Дизентерія - інфекційне захворювання, що характеризується загальною інтоксикацією організму, рідким випорожненням і своєрідним ураженням слизової оболонки товстого кишечника. Вона є одним із найчастіших гострих кишкових захворювань у світі. Захворювання відоме з давніх-давен під назвою «кривавого проносу», проте природа його виявилася різною. У 1875р. російський учений Леш виділив від хворого на кривавий пронос амебу Entamoeba histolytica,у наступні 15 років була встановлена ​​самостійність цієї хвороби, за якою збереглася назва амебіазу. Збудниками власне дизентерії є велика група біологічно подібних бактерій, об'єднаних у рід Shigelta.Вперше збудник виявили в 1888г. А. Шантемесом та Відал; 1891р. він був описаний А. В. Григор'євим, а 1898р. К. Шига за допомогою отриманої від хворого сироватки ідентифікував збудника у 34 хворих на дизентерію, остаточно довівши етіологічну роль цієї бактерії. Однак у наступні роки виявили й інші збудники дизентерії: в 1900г. - З. Флекснером, 1915г. - К. Зонне, 1917р. - К. Штуцером та К. Шмітцем, в 1932р. - Дж. Бойдом, 1934р. - Д. Ларджем, 1943р. - А. Сакс.

Нині рід Shigellaвключає понад 40 серотипів. Всі вони являють собою короткі нерухомі грамнегативні палички, що не утворюють спор і капсул, які (добре ростуть на звичайних поживних середовищах, не ростуть на середовищі з цитратом як єдине джерело вуглецю; не утворюють H2S, не мають уреази; реакція Фогеса-Проскауера; глюкозу та деякі інші вуглеводи ферментують з утворенням кислоти без газу (крім деяких біотипів) Shigella flexneri: S.manchesterі ewcastle);як правило, не ферментують лактозу (за винятком шигел Зонне), адоніт, інозит, не розріджують желатин, зазвичай утворюють каталазу, не мають лізиндекарбоксилази та фенілаланіндезаміназ. Вміст Г+Ц у ДНК 49-53 мол%. Шигелли - факультативні анаероби, температурний оптимум для зростання 37 ° С, вище 45 ° С не ростуть, оптимальна середовище ph 6,7-7,2. Колонії на щільних середовищах - круглі, опуклі, напівпрозорі, у разі асоціації утворюються шорсткі колонії R-форми. Зростання на МПБ як рівномірного помутніння, шорсткі форми утворюють осад. Свіжовиділені культури шигел Зонне J4HO утворюють колонії двох типів: дрібні круглі опуклі (I фаза), великі плоскі (2 фаза). Характер колонії залежить від наявності (I фаза) або відсутності (II фаза) плазміди з мм 120 МД, яка визначає також вірулентність шигел Зонне.

У шигел виявлені різні за специфічністю О-антигени: загальні для сімейства Enterobacteriaceae,родові, видові, групові та типоспецифічні, а також К-антигени; Н-антигенів вони не мають.

У класифікації враховуються лише групові та типоспецифічні О-антигени. Відповідно до цих ознак рід Shigellaпідрозділяється на 4 підгрупи, або 4 види, і включає 44 серотипи. У підгрупу А (вид Shigella dysenteriae)включені шигели, що не ферментують маніту. Вид включає 12 серотипів (1-12). Кожен стереотип має свій особливий типовий антиген; Антигенні зв'язки між серотипами, а також з іншими видами шигел виражені слабко. До підгрупи В (вид Shigella flexneri)відносяться шигели, які зазвичай ферментують маніт. Шигелли цього виду серологічно споріднені один одному: вони містять типоспецифічні антигени (I-VI), за якими поділяються на серотипи (1-6), і групові антигени, які виявляються в різних складах кожного серотипу і за якими серотипи поділяються на підсеротипи. Крім того, цей вид включає два антигенні варіанти - X і Y, у яких немає типових антигенів, вони різняться за наборами групових антигенів. Серотип S.flexneri 6не має підсеротипів, але його поділяють на 3 біохімічні типи за особливостями ферментації глюкози, маніту та дульциту.

До підгрупи С (вид Shlgella boydll)відносяться шигели, які зазвичай ферментують маніт. Члени групи серологічно відрізняються одна від одної. Антигенні зв'язки усередині виду виражені слабо. Вид включає 18 серотипів (1-18), кожен із яких має свій головний типовий антиген.

У підгрупу D (вид Shlgella sonnel)включені шигели, які зазвичай ферментують маніт і здатні повільно (через 24 год інкубації і пізніше) ферментувати лактозу і сахарозу. Вид S.sonneiвключає один серотип, однак колонії I і II фаз мають свої типоспецифічні антигени. Для внутрішньовидової класифікації шигел Зонне запропоновано два методи:

1) розподіл їх на 14 біохімічних типів та підтипів по здатності ферментувати мальтозу, рамнозу та ксилозу;

2) розподіл на фаготипи за чутливістю до набору відповідних фагів.

Ці методи типування мають головним чином епідеміологічне значення. Крім того, шигели Зонне та шигели Флекснера з цією ж метою піддають типуванню за здатністю синтезувати специфічні коліцини (коліциногенотипування) та за чутливістю до відомих коліцинів (коліцинотипування). Для визначення типу продукованих шигелами коліцинів Дж. Абботом і Р. Шеноном запропоновані набори типових та індикаторних штамів шигел, а для визначення чутливості шигел до відомих типів коліцинів використовують набір еталонних коліциногенних штамів П. Фредеріка.

Резистентність. Шигели мають досить високу стійкість до факторів зовнішнього середовища. Вони виживають на бавовняній тканині і на папері до 30-36 днів, у висохлих випорожненнях - до 4-5 міс, у ґрунті - до 3-4 міс, у воді - від 0,5 до 3 міс, на фруктах та овочах - до 2 од, у молоці та молочних продуктах - до кількох тижнів; при 60 ° С гинуть через 15-20 хв.

Чутливі до розчинів хлораміну, активного хлору та інших дезінфектантів.

Чинники патогенності. Найважливіша біологічна властивість шигел, що зумовлює їхню патогенність, - здатність впроваджуватися в епітеліальні клітини, розмножуватися в них і викликати їхню загибель. Цей ефект може бути виявлений за допомогою кератокон'юнктивальної проби (введення під нижню повіку морської свинки однієї петлі культури шигел (2-3 млрд бактерій) викликає розвиток серозно-гнійного кератокон'юнктивіту), а також шляхом зараження культур клітин (цитотоксична дія), або курячих ембріонів ( їх загибель), або інтраназально-білих мишей (розвиток пневмонії). Основні фактори патогенності шигел можна розбити на три групи:

1) фактори, що визначають взаємодію з епітелієм слизової оболонки;

2) фактори, що забезпечують стійкість до гуморальних та клітинних механізмів захисту макроорганізму та здатність шигел розмножуватися в його клітинах;

3) здатність продукувати токсини та токсичні продукти, які зумовлюють розвиток власне патологічного процесу.

Перша група включає фактори адгезії і колонізації: їх роль виконують пили, білки зовнішньої мембрани і ЛПС. Адгезії та колонізації сприяють ферменти, що руйнують слиз, - нейрамінідазу, гіалуронідазу, муциназу. Друга група включає фактори інвазії, які сприяють проникненню шигел у ентероцити та їх розмноженню в них та у макрофагах з одночасним проявом цитотоксичного та (або) ентеротоксичного ефекту. Ці властивості контролюються генами плазміди з м.м. 140 МД (вона кодує синтез білків зовнішньої мембрани, що зумовлюють інвазію) та хромосомними генами шигел: кср А (зумовлює кератокон'юнктивіт), cyt (відповідає за руйнування клітин), а також іншими генами, ще не ідентифікованими. Захист шигел від фагоцитозу забезпечується поверхневим К-антигеном, антигенами 3, 4 та ліпополісахаридом. Крім того, ліпід А ендотоксину шигел має імуносупресивну дію - пригнічує активність клітин імунної пам'яті.

До третьої групи факторів патогенності відносяться ендотоксин і виявлені у шигел два типи екзотоксинів - екзотоксин Шига і шигаподібні (SLT-I і SLT-II), цитотоксичні властивості яких найбільш сильно виражені у S.dysenteriae 1.Шига- та шигаподібні токсини виявлені і в інших серотипів. S.dysenteriae,їх утворюють також S.flexneri, S.sonnei, S.boydii, ETEC та деякі сальмонели. Синтез цих токсинів контролюється tox-генами конвертуючих фагів. Ентеротоксини типу LT виявлені у шигел Флекснера, Зонне та Бойда. Синтез LT у них контролюється плазмідними генами. Ентеротоксин стимулює активність аденілатциклази та відповідає за розвиток діареї. Токсин Шига, або нейротоксин, не реагує з аденілатциклазною системою, а чинить пряму цитотоксичну дію. Токсини Шига та шигаподібні (SLT-I та SLT-II) мають м.м. -70 кД і складаються з субодиниць А та В (останні з 5 однакових малих субодиниць). Рецептором для токсинів є гліколіпід мембрани клітини.

Вірулентність шигел Зонне залежить також від плазміди з м.м. 120 МД. Вона контролює синтез близько 40 поліпептидів зовнішньої мембрани, сім з них пов'язані з вірулентністю. Шигелли Зонне, що мають цю плазміду, утворюють колонії I фази і мають вірулентність. Культури, що втратили плазміду, утворюють колонії II фази та позбавлені вірулентності. Плазміди з м.м. 120-140 МД виявлено у шигел Флекснера та Бойда. Ліпополісахарид шигел є сильним ендотоксином.

Особливості епідеміології.Джерелом інфекції є лише людина. Жодні тварини в природі на дизентерію не хворіють. У експериментальних умовах дизентерію вдається відтворити лише мавп. Спосіб зараження – фекально-оральний. Шляхи передачі - водний (переважний для шигел Флекснера), харчовий, особливо важлива роль належить молоку та молочним продуктам (переважний шлях зараження для шигел Зонне), і контактно-побутовий, особливо для виду S.dysenteriae.

Особливістю епідеміології дизентерії є зміна видового складу збудників, а також біотипів Зонне та серотипів Флекснера у певних регіонах. Наприклад, до кінця 30-х років XX століття. S.dysenteriae 1доводилося до 30-40% всіх випадків захворювань на дизентерію, а потім цей серотип став зустрічатися все рідше і рідше і майже зник. Однак у 60-80-ті роки S.dysenteriaeзнову з'явилася на історичній арені та викликала серію епідемій, які призвели до формування трьох гіперендемічних вогнищ її – у Центральній Америці, Центральній Африці та Південній Азії (Індія, Пакистан, Бангладеш та ін. країни). Причини зміни видового складу збудників дизентерії, ймовірно, пов'язані зі зміною колективного імунітету та зміною властивостей дизентерійних бактерій. Зокрема, повернення S.dysenteriae 1і широке поширення її, що спричинило формування гіперендемічних вогнищ дизентерії, пов'язують з придбанням нею плазмід, що зумовили множинну лікарську стійкість і підвищену вірулентність.

Особливості патогенезу та клініки.Інкубаційний період при дизентерії 2-5 днів, іноді менше за добу. Формування інфекційного вогнища у слизовій оболонці низхідного відділу товстого кишечника (сигмоподібна та пряма кишка), куди проникає збудник дизентерії, носить циклічний характер: адгезія, колонізація, впровадження шигел у цитоплазму ентероцитів, їх внутрішньоклітинне розмноження, їх внутрішньоклітинне розмноження, кишківника; Після цього починається черговий цикл - адгезія, колонізація тощо. буд. Інтенсивність циклів залежить від концентрації збудників у пристіночному шарі слизової оболонки. В результаті циклів, що повторюються, запальне вогнище розростається, виразки, що утворюються, з'єднуючись, збільшують оголеність кишкової стінки, внаслідок чого в випорожненнях з'являються кров, слизово-гнійні грудочки, поліморфноядерні лейкоцити. Цитотоксини (SLT-I та SLT-II) зумовлюють руйнування клітин, ентеротоксин – діарею, ендотоксини – загальну інтоксикацію. Клініка дизентерії багато в чому визначається тим, який тип екзотоксинів у більшою міроюпродукується збудником, ступенем його алергійного впливу та імунним статусоморганізму. Однак багато питань патогенезу дизентерії залишаються ще не з'ясованими, зокрема: особливості перебігу дизентерії у дітей перших двох років життя, причини переходу гострої дизентерії в хронічну, значення сенсибілізації, механізм місцевого імунітету слизової оболонки кишечника та ін. Найбільш типовими клінічними проявами дизентерії служать пронос, часті позиви- у тяжких випадках до 50 і більше разів на добу, тенезми (болючі спазми прямої кишки) та загальна інтоксикація. Характер випорожнення визначається ступенем ураження товстого кишечника. Найбільш важко протікає дизентерія, спричинена S.dysenteriae 1, Найлегше - дизентерія Зонне.

Постінфекційний імунітет. Як показали спостереження над мавпами, після перенесеної дизентерії залишається міцний і тривалий імунітет. Він обумовлений антимікробними антитілами, антитоксинами, підвищенням активності макрофагів та Т-лімфоцитами. Значну роль відіграє місцевий імунітет слизової оболонки кишечника, який опосередковується IgAs. Проте імунітет носить типоспецифічний характер, міцного перехресного імунітету немає.

Лабораторна діагностика. Основний метод – бактеріологічний. Матеріалом для дослідження є випорожнення. Схема виділення збудника: посів на диференціально-діагностичні середовища Ендо та Плоскірєва (паралельно на середу збагачення з наступним посівом на середовища Ендо, Плоскірєва) для виділення ізольованих колоній, отримання чистої культури, вивчення її біохімічних властивостей та, з урахуванням останніх, ідентифікація і моновалентних діагностичних аглютинуючих сироваток Випускають такі комерційні сироватки:

1. До шигелів, що не ферментують маніт: до S.dysenteriae 1 до 2 S.dysenteriae 3-7(полівалентні та моновалентні), до S.dysenteriae 8-12(Полівалентні та моновалентні).

2. До шигелів, що ферментують маніт:

до типових антигенів S.flexneri I, II, III, IV, V, VI,

до групових антигенів S.flexneri 3, 4, 6,7,8- полівалентна,

до антигенів S.boydii 1-18(полівалентна та моновалентні),

до антигенів S.sonneiІ фази, ІІ фази,

до антигенів S.flexneri I-VI+ S.sonnei- Полівалентна.

Для виявлення антигенів у крові (у тому числі у складі ЦВК), сечі та випорожненнях можуть бути використані наступні методи: РПГА, РСК, реакція коаглютинації (у сечі та випорожненнях), ІФМ, РПГА (у сироватці крові). Ці методи є високоефективними, специфічними та придатними для ранньої діагностики.

Для серологічної діагностики можуть бути використані: РПГА з відповідними еритроцитарними діагностикумами, імунофлуоресцентний метод (непряма модифікація), метод Кумбса (визначення титру неповних антитіл). Діагностичне значення має також алергічна проба з дизентеріном (розчин білкових фракцій шигел Флекснера та Зонне). Реакцію враховують через 24 год. Вона вважається позитивною за наявності гіперемії та інфільтрату діаметром 10-20мм.

Лікування.Основна увага приділяється відновленню нормального водно-сольового обміну, раціонального харчування, дезінтоксикації, раціональної антибіотикотерапії (з урахуванням чутливості збудника до антибіотиків) Гарний ефектдає раннє застосування полівалентного дизентерійного бактеріофага, особливо таблетованого з пектиновим покриттям, яке оберігає фаг від дії НС1 шлункового соку; у тонкому кишечнику пектин розчиняється, фаги звільняються і виявляють свою дію. З профілактичною метоюфаг слід давати не рідше ніж один раз на три дні (термін його виживання в кишечнику).

Проблема специфічної профілактики.Для створення штучного імунітету проти дизентерії були використані різні вакцини: із убитих бактерій, хімічні, спиртова, але всі вони виявилися малоефективними та зняті з виробництва. Створено вакцини проти дизентерії Флекснера із живих (мутантних, стрептоміцинзалежних) шигел Флекснера; рибосомальні вакцини, але вони також не знайшли широкого застосування. Тому проблема специфічної профілактики дизентерії залишається невирішеною. Основний шлях боротьби з дизентерією полягає у покращенні системи водопостачання та каналізації, забезпеченні суворих санітарно-гігієнічних режимів на підприємствах харчової, особливо молочної промисловості, у дитячих установах, місцях громадського користування та у дотриманні особистої гігієни.

Мікробіологія холери

За визначенням ВООЗ, холера - це хвороба, для якої типовий гострий важкий зневоднення з випорожненнями у вигляді рисового відвару, що є наслідком зараження Vibrio cholerae У зв'язку з тим, що для неї характерні різко виражена здатність до широкого епідемічного поширення, важкий перебігі висока летальність, холера належить до особливо небезпечних інфекцій.

Історичною батьківщиною холери є Індія, точніше, дельта річок Ганг та Брахмапутра (нині Східна Індія та Бангладеш), де вона існує з незапам'ятних часів (епідемії холери в цьому районі спостерігали ще за 500 років до н.е.). Тривале існування тут ендемічного осередку холери пояснюється багатьма причинами. Холерний вібріон може не тільки довго зберігатися у воді, але й розмножуватися в ній. сприятливих умов- температурі вище +12 ° С, наявності органічних речовин. Всі ці умови в Індії очевидні - тропічний клімат(середньорічна температура від +25 до +29 °С), велика кількість опадів і заболоченість, висока щільністьнаселення, особливо в дельті річки Ганг, велика кількість органічних речовин у воді, безперервне цілорічне забруднення води стічними водамита випорожненнями, низький матеріальний рівень життя та своєрідні релігійно-культові обряди населення.

Збудник холери Vibrio choleraeбуло відкрито 1883г. під час п'ятої пандемії Р. Кохом, проте вперше вібріон у випорожненнях хворих на діарею був виявлений ще в 1854р. Ф. Паціні.

V.choleraeвідноситься до сімейства Vibrionaceae,яке включає кілька пологів (Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium).Рід Vibrioз 1985р. налічує понад 25 видів, з яких найбільше значеннядля людини мають V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.alginolyticus, dnificusі V.fluvialis.

Ключові ознаки роду Vibrio : короткі, що не утворюють спор і капсул, вигнуті або прямі грамнегативні палички, діаметром 0,5мкм, довжиною 1,5-3,0мкм, рухливі ( V.cholerae- монотрих, у деяких видів два і більше полярно розташованих джгутиків); добре і швидко ростуть на звичайних середовищах, хемоорганотрофи, ферментують вуглеводи з утворенням кислоти без газу (глюкозу ферментують шляхом Ембдена-Мейергофа). Оксидазопозитивні, утворюють індол, відновлюють нітрати на нітрити (V.choleraeдає позитивну нітрозо-індолову реакцію), розщеплюють желатин, часто дають позитивну реакцію Фогеса-Проскауера (т. е. утворюють ацетилметилкарбінол), уреази не мають, не утворюють Н S. мають декарбоксилази лізину та орнітину, але не мають аргінінди.

Холерний вібріон дуже невибагливий до живильних середовищ. Він добре і швидко розмножується на 1% лужній (рН 8,6-9,0) пептонній воді (ПВ), що містить 0,5-1,0%-ний NaCl, обганяючи зростання інших бактерій. Для пригнічення росту протею до 1%-ної (ПВ) рекомендується додавати телурит калію 4 (кінцевому розведенні 1:100 000). 1% ПВ є найкращим середовищем збагачення для холерного вібріона. При зростанні він утворює через 6-8 год на поверхні ПВ ніжну пухку сірого кольору плівку, яка при струшуванні легко руйнується і падає на дно у вигляді пластівців, ПВ помірковано каламутніє. Для виділення холерного вібріона запропоновані різні виборчі середовища: лужний агар, жовтково-сольовий агар, лужний альбумінат, лужний агар з кров'ю, лактозо-цукрові та інші середовища. Найкращим є середовище TCBS (тіосульфатцитрат-бромтимоловий сахарозний агар) та його модифікації. Однак найчастіше використовують лужний МПА, на якому холерний вібріон утворює гладкі склоподібно-прозорі з блакитним відтінком дископодібні колонії в'язкої консистенції.

При посіві уколом у стовпчик желатину вібріон через 2 доби при 22-23 ° С викликає розрідження з поверхні у вигляді бульбашки, потім лійкоподібне і, нарешті, пошарове.

У молоці вібріон швидко розмножується, викликаючи через 24-48 годину згортання, а потім настає пептонізація молока, і через 3-4 дні вібріон гине через зсув рН молока в кислу сторону.

Б. Хейберг за здатністю ферментувати маннозу, сахарозу та арабінозу розподілив усі вібріони (холерні та холероподібні) на ряд груп, кількість яких нині становить 8. Холерний вібріон відноситься до першої групи Хейберга.

Вібріони, подібні за морфологічними, культуральними і біохімічними ознаками з холерною, називали і називають по-різному: парахолерними, холероподібними, НАГ-вібріонами (вібріони, що неаглютинуються); вібріонами, що не належать до 01-групи. Остання назва найбільш точно підкреслює їхнє ставлення до холерного вібріона. Як було встановлено А. Гарднером та К. Венкатраманом, холерні та холероподібні вібріони мають загальний Н-антиген, але розрізняються за О-антигенами. За О-антигеном холерні та холероподібні вібріони до теперішнього часу розподіляють на 139 О-серогруп, але їх кількість постійно поповнюється. Холерний вібріон відноситься до групи 01. Він має загальний А-антиген і два типоспецифічні антигени - В і С, за якими і розрізняють три серотипи V.cholerae- серотип Огава (АВ), серотип Інаба (АС) та серотип Гікошіма (ABC). Холерний вібріон у стадії дисоціації має OR-антиген. У зв'язку з цим для ідентифікації V.choleraeвикористовують О-сироватку, OR-сироватку та типоспецифічні сироватки Інаба та Огава.

Чинники патогенності V.cholerae :

1. Рухливість.

2. Хемотаксис. За допомогою цих властивостей вібріон долає слизовий шар і вступає у взаємодію з епітеліальними клітинами. У мутантів Che" (що втратили здатність до хемотаксису) вірулентність різко знижується. Вірулентність у мутантів Mot" (що втратили рухливість) або повністю зникає, або знижується в 100-1000 разів.

3. Фактори адгезії та колонізації, за допомогою яких вібріон прилипає до мікроворсинок та колонізує слизову оболонку тонкого кишечника.

4. Ферменти: муциназа, протеази, нейрамінідазу, лецитиназу та ін.

Вони сприяють адгезії та колонізації, оскільки руйнують речовини, що входять до складу слизу. Нейрамінідаза, відщеплюючи від глікопротеїнів епітелію сіалову кислоту, створює «посадковий» майданчик для вібріонів. Крім того, вона збільшує кількість рецепторів для холерогену шляхом модифікації три-і дисіалогангліозидів в моносіалогангліозид Gm b який служить рецептором для холерогену.

5. Головним фактором патогенності V.choleraeє екзотоксин-холероген, який і зумовлює патогенез холери. Молекула холероген має м.м. 84 кД і складається з двох фрагментів - А і В. Фрагмент А складається з двох пептидів - А1 і А2 - і має специфічну властивість холерного токсину. Фрагмент складається з 5 однакових субодиниць і виконує дві функції: 1) розпізнає рецептор (моносіалогангліозид) ентероциту і зв'язується з ним;

2) формує внутрішньомембранний гідрофобний канал для проходження субодиниці А. Пептид А 2 Сл вжитий для зв'язку фрагментів А і В. Власне токсичну функцію виконує пептид A t . Він взаємодіє з НАД, викликає його гідроліз, що при цьому утворюється АДФ-рибоза зв'язується з регуляторною субодиницею аденілатциклази. Це призводить до пригнічення гідролізу ГТФ. Виниклий комплекс ГТФ + аденілатциклаза викликає гідроліз АТФ з утворенням цАМФ. (Інший шлях накопичення цАМФ – пригнічення холерогеном ферменту, що здійснює гідроліз цАМФ до 5-АМФ).

6. Крім холерогену, холерний вібріон синтезує та виділяє фактор, що підвищує проникність капілярів.

7. У холерних вібріонів виявлено також інші екзотоксини, зокрема, типу LT, ST і SLT.

8. Ендотоксин. Ліпополісахарид V.choleraeмає сильну ендотоксичну властивість. Він відповідає за загальну інтоксикацію організму та блювання. Антитіла, що утворюються проти ендотоксину, мають виражену вібріоцидну дію (розчиняють вібріони в присутності комплементу) і є важливим компонентом постінфекційного та поствакцинального імунітету.

Здатність вібріонів, що не належать до 01-групи, викликати спорадичні або групові діарейні захворювання людей, пов'язана з наявністю у них ентеротоксинів типу LT або ST, що стимулюють або аденілат-, або гуанілатциклазні системи відповідно.

Синтез холерогену – найважливіша властивість V.cholerae.Гени, що контролюють синтез А- та В-фрагментів холерогену, об'єднані в оперон vctAB або ctxB, вони розташовані в вібріонової хромосомі. У деяких штамів холерного вібріона виявлено по два такі нетандемні оперони. Функція оперону управляється двома регуляторними генами. Ген toxR забезпечує позитивний контроль, мутації цього гена призводять до зниження продукції токсину у 1000 разів. Ген htx здійснює негативний контроль, мутації у цьому гені посилюють продукцію токсину в 3-7 разів.

Для виявлення холерогену можуть бути використані такі методи:

1. Біологічні проби на кроликах. При внутрішньокишковому введенні холерних вібріонів кроликам-сосункам (вік не більше 2 тижнів) у них розвивається типовий холерогенний синдром: діарея, зневоднення та загибель кролика. На розтині - різка ін'єкція судин шлунка та тонкого
кишечника, іноді в ньому накопичується прозора рідина. Але особливо характерними є зміни товстого кишечника - він збільшений і переповнений абсолютно прозорою, солом'яною рідиною з пластівцями і бульбашками газу. При введенні в лігований ділянку тонкої кишки холерних вібріонів дорослим кроликам у них відзначаються такі ж зміни в товстому кишечнику, як і при зараженні кроликів-сосунків.

2. Безпосереднє виявлення холерогену за допомогою імунофлуоресцентного або імуноферментного методів або реакції пасивного імунного гемолізу (холероген зв'язується з Gm1 еритроцитів, і вони при додаванні антитоксичних антитіл та комплементу лізуються).

3. Стимуляція клітинної аденілатциклази у культурах клітин.

4. Використання як ДНК-зонд фрагмента хромосоми V.cholerae,несучого оперонхолерогену.

Під час сьомої пандемії виділялися штами V.choleraeз різним ступенемвірулентності: холерогенні (вірулентні), слабохолерогенні (маловірулентні) та нехолерогенні (невірулентні). Нехолерогенні V.cholerae,як правило, мають гемолітичну активність, не лізуються холерним діагностичним фагом 5 (ХДФ-5) і не викликають захворювання людини.

Для фаготипування V.cholerae(у тому числі й V.eltor)С. Мукерджі було запропоновано відповідні набори фагів, які потім у Росії були доповнені іншими фагами. Набір таких фагів (1-7) дозволяє виділити серед V.cholerae 16 фаготипів. ХДФ-3 вибірково лізує холерні вібріони класичного типу, ХДФ-4 - вібріони Ель-Тор, а ХДФ-5 лізує лише холерогенні (вірулентні) вібріони обох типів і не лізує нехолерогенні вібріони.

Холерогенні вібріони, як правило, не мають гемолітичної активності, лізуються ХДФ-5 і викликають захворювання людей на холеру.

Резистентність збудників холери.Холерні вібріони добре виживають за низької температури: у льоду зберігають життєздатність до 1 міс; в морській воді- до 47 діб, у річковій - від 3-5 днів до кількох тижнів, у кип'яченій мінеральній водізберігаються більше 1 року, у ґрунті - від 8 днів до 3 міс, у свіжих випорожненнях - до 3 діб, на варених продуктах (рис, локшина, м'ясо, каші та ін.) виживають 2-5 днів, на сирих овочах - 2- 4 дні, на фруктах – 1-2 дні, у молоці та молочних продуктах – 5 днів; при зберіганні на холоді термін виживання збільшується на 1-3 дні: на полотняній білизні, забрудненій випорожненнями, зберігаються до 2 діб, а на вологому матеріалі - тиждень. Холерні вібріони при 80 ° С гинуть через 5 хв, при 100 ° С - моментально; високочутливі до кислот; під впливом хлораміну та інших дезінфектантів гинуть через 5-15 хв. Вони чутливі до висушування і дії прямих сонячних променів, але добре і довго зберігаються і навіть розмножуються у відкритих водоймах і стічних водах, багатих на органічні речовини, що мають лужну рН і температуру вище 10-12 °С. Високочутливі до хлору: доза активного хлору 0,3-0,4 мг/л води за 30 хв викликає надійне знезараження від холерного вібріона.

Особливості епідеміології. Основним джерелом інфекції є тільки людина - хвора на холеру або вібріононосій, а також забруднена ними вода. Жодні тварини в природі на холеру не хворіють. Спосіб зараження – фекально-оральний. Шляхи зараження: а) основний - через воду, що використовується для пиття, купання та господарсько-побутових потреб; б) контактно-побутової та в) через їжу. Всі великі епідемії та пандемії холери мали водний характер. Холерні вібріони мають такі пристосувальні механізми, які забезпечують існування їх популяцій як в організмі людини, так і в певних екосистемах відкритих водойм. Рясна діарея, яку викликає холерний вібріон, призводить до очищення кишечника від конкуруючих бактерій і сприяє широкому поширенню збудника у навколишньому середовищі, насамперед у стічних водах та у відкритих водоймах, куди їх скидають. Людина, хвора на холеру, виділяє збудника у величезній кількості - від 100 млн до 1 млрд на 1 мл випорожнень, вібріононосій виділяє 100 - 100 000 вібріонів в 1 мл, що заражає доза становить близько 1 млн вібріонів. Тривалість виділення холерного вібріона у здорових носіїв становить від 7 до 42 днів, та 7-10 днів – у перехворілих. Більше тривале виділенняспостерігається вкрай рідко.

Особливістю холери є те, що після неї, як правило, не залишається тривалого носійства та не формуються стійкі ендемічні вогнища. Однак, як уже зазначалося вище, у зв'язку із забрудненням відкритих водойм стічними водами, що містять у великій кількості органічні речовини, миючі засобиі кухонну сільУ літній час холерний вібріон у них не тільки довго виживає, а й навіть розмножується.

Важливе епідеміологічне значення має той факт, що холерні вібріони 01-групи, як нетоксигенні, так і токсигенні, можуть довго зберігатися в різних водних екосистемах у вигляді форм, що не культивуються. За допомогою ланцюгової полімеразної реакції при негативних бактеріологічних дослідженнях на ряді ендемічних територій СНД у різних водоймах були виявлені vet-гени некультивованих форм V.cholerae.

При виникненні захворювань холерою здійснюють комплекс протиепідемічних заходів, серед яких провідним та вирішальним є активне своєчасне виявлення та ізоляція (госпіталізація, лікування) хворих у гострій та атиповій формі та здорових вібріононосіїв; вживаються заходи щодо припинення можливих шляхів поширення інфекції; особлива увага приділяється водопостачанню (хлорування питної води), дотримання санітарно-гігієнічного режиму на харчових підприємствах, у дитячих установах, місцях громадського користування; здійснюється суворий контроль, у тому числі бактеріологічний, за відкритими водоймищами, проводиться імунізація населення тощо.

Особливості патогенезу та клініки. Інкубаційний період при холері варіює від неслизьких годин до 6 діб, найчастіше – 2-3 дні. Потрапивши в просвіт тонкого кишечника, холерні вібріони за рахунок рухливості та хемотаксису до слизової оболонки прямують до слизу. Щоб проникнути через неї, вібріони виробляють ряд ферментів: нейрамінідазу, муциназу, протеази, лецитиназу, деякі руйнують речовини, що містяться в слизу, та полегшують просування вібріонів до епітеліальних клітин. Шляхом адгезії вібріони прикріплюються до глікокаліксу епітелію і, втрачаючи рухливість, починають інтенсивно розмножуватися, колонізуючи мікроворсинки тонкого кишечника, і одночасно виробляти велику кількість екзотоксин-холерогену. Молекули холерогену зв'язуються з моносіалоганглиозидом Gm1 і проникають в мембрану клітини, активують аденілатциклазну систему, а цАМФ, що накопичується, викликає гіперсекрецію рідини, катіонів і аніонів Na + , HCO 3 ~, К + , СГ з ентероцитів, що і організму. Розрізняють три типи перебігу хвороби:

1. бурхливе, тяжке зневоднення діарейне захворювання, що призводить до смерті хворого через кілька годин;

2. менш важкий перебіг, або пронос без зневоднення;

3. безсимптомний перебіг захворювання (вібріононосійство).

При тяжкій формі холери у хворих з'являється пронос, стілець частішає, випорожнення стають все більш рясними, набувають водянистого характеру, втрачають фекальний запах і мають вигляд рисового відвару (каламутна рідина з плаваючими в ній залишками слизу і клітинами епітелію). Потім приєднується виснажлива блювота, спочатку вмістом кишечника, а потім блювотні маси набувають вигляду рисового відвару. Температура у хворого падає нижче за норму, шкіра стає синюшною, зморшкуватою і холодною - холерний алгід. В результаті зневоднення відбувається згущення крові, розвивається ціаноз, кисневе голодування, різко страждає функція нирок, з'являються судоми, хворий втрачає свідомість і настає смерть. Летальність від холери під час сьомої пандемії варіювала від 1,5% у розвинених країнах до 50% у країнах, що розвиваються.

Постінфекційний імунітетМіцний, тривалий, повторні захворювання спостерігаються рідко. Імунітет антитоксичний та антимікробний, обумовлений антитілами (антитоксини зберігаються довше, ніж антимікробні антитіла), клітинами імунної пам'яті та фагоцитами.

Лабораторна діагностика.Основним та вирішальним методом діагностики холери є бактеріологічний. Матеріалом для дослідження від хворого є випорожнення та блювотні маси; на вібріононосійство досліджують випорожнення; в осіб, що загинули від холери, для дослідження беруть лігований відрізок тонкого кишечника та жовчний міхур; з об'єктів зовнішнього середовища найчастіше досліджують воду відкритих водойм та стічні води.

При проведенні бактеріологічного дослідження необхідно дотримуватися наступних трьох умов:

1) якнайшвидше зробити посів матеріалу від хворого (холерний вібріон зберігається у випорожненнях короткий термін);

2) посуд, в який беруть матеріал, не повинен знезаражуватися хімічними речовинамиі не повинна містити їх сліди, оскільки холерний вібріон дуже чутливий до них;

3) виключити можливість забруднення та зараження оточуючих.

У тих випадках, коли виділяються V.choleraeне 01-групи, вони повинні бути типовані за допомогою відповідних аглютинуючих сироваток інших серогруп. Виділення від хворого на діарею (у тому числі холероподібної) V.choleraeне 01-групи вимагає проведення таких самих протиепідемічних заходів, як і у разі виділення V.cholerae 01-групи. При необхідності виділених холерних вібріонів одним з методів визначають здатність синтезувати холероген або наявність у них генів холерогену за допомогою ДНК-зонда.

Серологічна діагностика холери має допоміжний характер. З цією метою може бути використана реакція аглютинації, але краще визначення титру вібріоцидних антитіл або антитоксинів (антитіла до холерогену визначають імуноферментним або імунофлуоресцентним методами).

Лікуванняхворих на холеру має полягати насамперед у регідратації та відновленні нормального водно-сольового обміну. З цією метою рекомендується використовувати сольові розчини, наприклад такого складу: NaCl - 3,5; NaHCO 3 – 2,5; КС1 – 1,5 та глюкоза – 20,0 г на 1 л води. Таке патогенетично обґрунтоване лікування у поєднанні з раціональною антибіотикотерапією дозволяє знизити летальність при холері до 1% і менше.

Специфічна профілактика.Для створення штучного імунітету було запропоновано різні вакцини, у тому числі із вбитих штамів Інаба та Огава; холероген-анатоксин для підшкірного застосування та ентеральна хімічна бівалентна вакцина, сос.

УДК 616.935-074(047)

А.М.Садикова

Казахський Національний Медичний Університет

ім.С.Д. Асфендіярова, Алмати

Кафедра інфекційних та тропічних хвороб

Надійна діагностика дизентерії є одним із актуальних завдань нагляду за ОКІ. Точний діагноз бактеріальної дизентеріїмає важливе значення для правильного та своєчасного лікування хворого та для здійснення необхідних протиепідемічних заходів. Наведені в огляді дані показують, що з урахуванням поширення дизентерії, недостатньої чутливості та пізньої появи позитивних результатів багатьох діагностичних методів доцільно розвивати діагностичний потенціал виявлення цієї інфекції.

Ключові слова: діагностика, дизентерія, метод антиген-зв'язуючих лімфоцитів.

Розпізнавання шигельозної інфекції у клінічній практиці зустрічає значні труднощі, зумовлені об'єктивними факторами, до яких належать клінічний патоморфоз дизентерії, збільшення числа атипових форм захворювання, існування значної кількості захворювань інфекційної та неінфекційної природи, що мають подібні до дизентерії клінічні прояви Під діагнозом «клінічної дизентерії» у половині випадків ховаються нерозпізнані захворювання іншої етіології.

Найбільші труднощі постають перед лікарем під час первинного огляду хворого до отримання результатів параклінічних методів діагностики. Розпізнавання дизентерії утруднюється також за наявності супутніх захворювань шлунково-кишкового тракту.

З часу початку застосування етіологічної лабораторної діагностики дизентерії було запропоновано та випробувано чимало методів. Існує багато класифікацій методів етіологічної діагностики інфекцій. Методологічно найбільш обґрунтовано класифікацію, запропоновану Б.В. Каральником. Щодо діагностики дизентерії принципи методологічно обґрунтованої класифікації використані Б.В. Каральником, Н.М. Нуркіна, Б.К. Єркінбекової..

З лабораторних методівдіагностики дизентерії відомі бактеріологічні (виділення та ідентифікація збудника) та імунологічні. Останні включають імунологічні методи in vivo (алергологічна проба Цуверкалова) і in vitro. Імунологічні методи in vitro мають перед пробою Цуверкалова одну безперечну перевагу – вони пов'язані з введенням у організм сторонніх антигенів.

Більшість дослідників до теперішнього часу вважає, що бактеріологічне дослідження, що включає в себе виділення в чистій культурі збудника захворювання з його подальшою ідентифікацією за морфологічними, біохімічними та антигенними ознаками, є найбільш надійним методом діагностики шигельної інфекції. Частота виділення шигел із випорожнень хворих із клінічним діагнозом «гостра дизентерія», за даними різних авторів, коливається в межах: від 30,8% до 84,7% і навіть 91,1%. Такий значний діапазон у різних авторів залежить не тільки від об'єктивних факторів, що впливають на ефективність бактеріологічного дослідження, а й від ґрунтовності постановки (або виключення) діагнозу «дизентерія клінічна». На ефективність бактеріологічного дослідження впливають такі об'єктивні фактори, як особливості перебігу захворювання, спосіб забору та доставки матеріалу до лабораторії, якість поживних середовищ, кваліфікація персоналу, терміни звернення хворого до медпрацівників, застосування антимікробних препаратів до взяття матеріалу на дослідження. Кількісне мікробіологічне дослідження випорожнень при гострій дизентерії показує, що за будь-яких клінічних формахінфекції найбільш масивне виділення збудників відбувається у перші дні захворювання, а починаючи з 6-го і, особливо з 10-го дня хвороби, концентрація шигел у калі значно знижується. Т.А. Авдєєвої встановлено, що мінімальний вміст шигел і різке переважання непатогенних мікроорганізмів у калі практично виключають можливість бактеріологічного виявлення дизентерійних бактерій.

Відомо, що бактеріологічне підтвердження шигельозної інфекції найчастіше вдається при обстеженні хворих саме в перші дні захворювання - копрокультура збудника в переважній більшості випадків вперше виділяється при першому дослідженні. Позитивні результати бактеріологічного дослідження відзначаються лише у перші 3 дні захворювання у 45 – 49% хворих, у перші 7 днів – у 75%. Тіллет та Томас також вважають термін обстеження хворих важливим фактором, Що визначає ефективність бактеріологічного методу діагностики дизентерії За даними Т.А. Авдєєвої, у перші дні захворювання найбільш інтенсивне виділення збудника спостерігається при дизентерії Зонне, менш інтенсивне – при дизентерії Флекснер та найменше – при дизентерії Флекснер VI; в пізні термінихвороби найбільше тривало зберігається висока концентрація при дизентерії Флекснера, менш тривало – шигел Зонне і найменш тривало – шигел Флекснер VI.

Таким чином, хоча бактеріологічне дослідження випорожнень є найбільш надійним методом діагностики шигельної інфекції, суттєвими недоліками є перелічені вище обмеження його ефективності. Важливо також зазначити обмеження ранньої діагностики бактеріологічним методом, у якому тривалість аналізу становить 3-4 дня. У зв'язку з цими обставинами великого практичного значення набуває використання інших методів лабораторної діагностики. Інший мікробіологічний метод діагностики дизентерії також ґрунтується на виявленні живих шигел. Це реакція наростання титру фага (РНФ), що ґрунтується на здатності специфічних фагів розмножуватися виключно в присутності гомологічних живих мікроорганізмів. Наростання титру індикаторного фага свідчить про наявність у середовищі відповідних мікробів. Випробування діагностичної цінностіРНФ при шигельозній інфекції проводили Б.І. Хаїмзон, Т.С. Вількомирська. РНФ має досить високу чутливість. Зіставлення мінімальних концентрації шигел у випорожненнях, що уловлюються бактеріологічним методом (12,5 тис. бактерій в 1 мл) та РНФ (3,0 - 6,2 тис), свідчить про перевагу РНФ.

Оскільки частота позитивних результатів РНФ знаходиться у прямій залежності від ступеня обсіменіння випорожнень, застосування методу також дає найбільший ефект у перші дні захворювання та за більш важких форм інфекційного процесу. Однак більше висока чутливістьметоду обумовлює його особливі переваги перед бактеріологічним дослідженням у пізні терміни хвороби, а також при обстеженні хворих з легкою, малосимптомною та субклінічною формами інфекції, при низькій концентрації збудника у випорожненнях. РНФ також застосовують при обстеженні хворих, які приймали антибактеріальні засоби, оскільки останні різко зменшують частоту позитивних результатів бактеріологічного методу дослідження, але значно меншою мірою впливають на ефективність РНФ. Чутливість РНФ не є абсолютною через існування штамів фагорезистентних шигел: частка фагорезистентних штамів може коливатися в дуже широких межах - від 1% до 34,5%.

Великою перевагою РНФ є її висока специфічність. Під час обстежень здорових людей, а також хворих на інфекційні захворювання іншої етології позитивні результати реакції спостерігали тільки в 1,5% випадків. РНФ є цінним додатковим методом діагностики шигельної інфекції. Але сьогодні цей метод застосовують рідко через його технічну складність. Інші методи є імунологічними. З їхньою допомогою реєструють специфічний щодо збудника імунну відповідь чи визначають імунологічними методами антигени збудника.

У зв'язку із вираженістю процесів специфічної інфекційної алергії при шигельозній інфекції спочатку використовували алергологічні методи діагностики, до якої належить внутрішньошкірна алергічна проба з дизентеріном (ВПД). Препарат «дизентерин», що є позбавленим токсичних речовин. специфічний алергеншигел, було отримано Д.А. Цуверкаловим та вперше застосований у клінічних умовах при постановці внутрішньошкірної проби Л.К. Коровицьким 1954 р. За даними Є.В. Голюсової та М.З. Трохименка, за наявності попередніх гострої дизентерії або супутніх їй алергічних хвороб зі шкірними проявами (екзема, кропив'янка та ін). позитивні результати ВПД спостерігаються значно частіше (паралергія). Аналіз результатів ВПД у різні періоди гострої дизентерії показує, що специфічна алергія виникає вже в перші дні захворювання, досягає максимальної вираженості до 7 – 15-го дня і надалі поступово згасає. Позитивні результати реакції отримали під час обстеження здорових людей віком від 16 до 60 років у 15 – 20% випадків та у віці від 3 до 7 років – у 12,5% випадків. Ще більш часто неспецифічні позитивні результати ВПД спостерігали у хворих із шлунково-кишковими захворюваннями – у 20 – 36% випадків. Введення алергену супроводжувалося розвитком місцевої реакції у 35,5 – 43,0% хворих на сальмонельоз, у 74 – 87% хворих на коли-0124-ентероколіт. Серйозним доказом проти широкого застосування ВПД у клінічній практиці стала її алергійна дія на організм. Враховуючи вищевикладене, можна сказати, що цей метод мало специфічний. Проба Цуверкалова не має і видоспецифічності. Позитивні результати реакції були однаково часті в різних етіологічних формах дизентерії.

Крім ВПД застосовували й інші діагностичні реакції, з тим чи іншим ступенем обґрунтованості, що розглядалися як алергічні, наприклад, реакцію алергенлейкоцитолізу (АЛЦ), суть якої полягала у специфічному пошкодженні або повному руйнуванніактивно або пасивно сенсибілізованих нейтрофілів при контакті з відповідною артеріальною гіпертензією. Але цю реакцію не можна зарахувати до методів ранньої діагностики, оскільки максимальна частота позитивних результатів відзначалася на 6-9 день захворювання і становила 69%. Була запропонована також реакція алергенлейкергії (АЛЕ). Вона ґрунтується на здатності лейкоцитів сенсибілізованого організму до агломерації при впливі гомологічного алергену (дизентерин). У зв'язку з недоведеністю точних механізмів подібних тестів, недостатньої відповідності їх результатів етіології захворювання, ці методи після недовгого періоду їх застосування в СРСР надалі не набули поширення.

Виявлення антигенів шигел в організмі в діагностичному відношенні рівнозначне виділенню збудника. Основними перевагами методів виявлення антигенів перед бактеріологічним дослідженням, що виправдовують їх клінічне застосування, є можливість виявлення не тільки життєздатних мікроорганізмів, але також загиблих і навіть зруйнованих, що набуває особливого значення при обстеженні хворих під час або невдовзі після проведення курсу антибактеріальної терапії.

Одним з найкращих методівекспрес – діагностики дизентерії було імунофлюоресцентне дослідження калу (метод Кунса). Сутність методу полягає у виявленні шигел шляхом обробки досліджуваного матеріалу сироваткою, що містить специфічні антитіла, мічені флюорохромами. З'єднання мічених антитіл з гомологічними антигенами супроводжується специфічним світінням комплексів, що виявляються у люмінесцентному мікроскопі. На практиці застосовують два основних варіанти методу Кунса: прямий, при якому використовують сироватку, що містить мічені антитіла проти антигенів шигел, і непрямий (двоетапний) з використанням на першому етапі не міченої флуорохромом сироватки (або глобулінової фракції антишигельної сироватки). На другому етапі застосовують мічену флуорохромом сироватку проти глобулінів застосованої на першому етапі антишигельної сироватки. Порівняльне дослідження діагностичної цінності двох варіантів імунофлюоресцентного методу не виявило великих відмінностей у їх специфічності та чутливості. У клінічній практиці застосування цього методу найбільш ефективно при обстеженні хворих на ранні термінизахворювання, а також при більш тяжких формах інфекції. Істотним недоліком методу імунофлюоресценції є його недостатня специфічність. Найважливішою причиною недостатньої специфічності реакції імунофлюоресценції є антигенна спорідненість ентеробактерії різних пологів. Тому цей метод розглядають як орієнтовний при розпізнаванні шигельної інфекції.

Для виявлення шигельозних антигенів без мікроскопії використовують різні реакції. Ці методи дозволяють виявити антигени збудника у випорожненнях у 76,5 – 96,0% хворих на бактеріологічно підтверджену дизентерію, що свідчить про досить високу їх чутливість. Найбільш доцільно використовувати зазначені методи саме у пізні терміни хвороби. Специфічність цих методів діагностики більшість авторів оцінюють досить високо. Проте Ф.М. Іванов, застосовував виявлення шигельозних антигенів у випорожненнях РСК, отримав позитивні результати при обстеженні здорових покупців, безліч хворих на кишкові інфекції інший етіології в 13,6 % випадків . На думку автора, використання методу є більш доцільним для виявлення специфічних антигенів у сечі, оскільки частота неспецифічних позитивних реакцій в останньому випадку є значно меншою. Використання різних методів дослідження дозволяє виявити антигени шигел у сечі у переважної більшості хворих на бактеріологічно підтверджену дизентерію. Динаміка виведення антигенів з сечею має деякі особливості - виявлення антигенних речовин у ряді випадків можливе вже з перших днів захворювання, але з найбільшою частотою і сталістю воно вдається на 10 - 15-й день і навіть у пізніші терміни. За даними Б.А. Годованого та співавт, частка позитивних результатів виявлення шигельозних антигенів у сечі (РСК) після 10-го дня захворювання становить 77% (відповідний показник для бактеріологічного дослідження калу – 47%). У зв'язку з цією обставиною дослідження сечі на присутність антигенів збудника має при дизентерії значення цінного додаткового методу, насамперед з метою пізньої та ретроспективної діагностики.

За даними Н.М. Нуркіної, якщо античний імунореагент отриманий з поліклональних сироваток, можливі позитивні результати індикації за наявності в пробі споріднених антигенів. Наприклад, з еритроцитарним діагностикумом із високоактивної сироватки проти S.flexneri VI виявляється і антиген S.flexneri I-V, оскільки шигели обох підвидів мають загальний видовий антиген. Антигени шигел вдається визначати в період хвороби як у сироватці крові, так і у виділеннях.

Лі Вон Хо з співавт. показано, що частота виявлення антигенів шигел і їх концентрація в крові і сечі вищі в пір'яні дні захворювання і що концентрація антигенів, що виявляються, вище при середньотяжкому перебігу захворювання, ніж при легкому .

С.М. Омірбаєвої запропоновано спосіб індикації антигену шигел, заснований на використанні формалінізованих еритроцитів як сорбент для антигенів з досліджуваного екстракту фекалій з подальшою аглютинацією їх імунними сироватками. Оцінка специфічності цього методу, на нашу думку, потребує додаткових досліджень, оскільки в екстрактах фекалій містяться у значних кількостях антигени інших бактерій, що не є збудником даного кишкового захворювання.

Ряд дослідників пропонують імуно-ферментний аналіз як метод експрес-діагностики гострої дизентерії, який на думку багатьох авторів вважається високочутливим та високоспецифічним. При цьому найвищий рівень антигену виявляється в 1-4 дні захворювання. Незважаючи на очевидні переваги ІФА, до яких відноситься висока чутливість, можливість суворого кількісного інструментального обліку, простота постановки реакції, широке застосування цього методу обмежується через необхідність спеціального обладнання.

Для посилення чутливості та специфічності різних серологічних методівВиявлення антигенів рекомендується використовувати моноклональні антитіла, фрагменти імуноглобулінів, синтетичні антитіла, фарбування ЛПС сріблом та інші технологічні вдосконалення.

Виявити антиген інфекційного агента часто не вдається навіть за використання високочутливих реакцій виявлення АГ збудника в біологічних субстратах організму, оскільки значна частина антигенних субстанцій, очевидно, перебуває у біопробі як імунних комплексів в організмі. При обстеженні хворих з бактеріологічно підтвердженою гострою дизентерією позитивні результати визначення антигену РСК відзначали, за деякими даними, лише в 18% випадків.

Т.В. Ременєва та співавт. пропонують для дезінтеграції комплексів антитіл з частинками збудника застосовувати вплив ультразвуку, а потім РСК на холоді визначати антиген збудника. Метод застосовувався для діагностики дизентерії, як матеріал дослідження використовували проби сечі хворих з гострими кишковими інфекціями.

Застосування реакції преципітації для виявлення антигену при гострій дизентерії не виправдане через її низьку чутливість і специфічність. Ми вважаємо, що специфічність будь-яких методів індикації антигенів шигел можна істотно збільшити при використанні моноклональних антитіл до шигел.

Реакція коаглютинації також одна із методів експрес-діагностики шигельозів, як і антигенів збудників низки інших інфекцій. При шигельозах антигени збудників можна визначити з перших днів захворювання протягом усього гострого періоду, а також протягом 1 - 2 тижнів після припинення бактеріовиділення. Переваги реакції коаглютинації – простота виготовлення діагностикумів, постановка реакції, економічність, швидкість, чутливість, висока специфічність.

При проведенні діагностики визначення антигенів шигел з самого початку захворювання найбільш ефективно, за даними багатьох авторів, досліджувати фекалії хворих. З розвитком захворювання можливість виявлення антигенів шигел у сечі та слині знижується, хоча у фекаліях вони виявляються практично з тією ж частотою, що і на початку захворювання. Необхідно враховувати, що у перші 3 – 4 дні захворювання фекалії антигеном дещо ефективніше досліджувати в РПГА. У середині захворювання однаково ефективні РПГА та РНАт, а починаючи з 7-го дня більш ефективною у пошуках антигену шигел є РНАт. Ці особливості зумовлені поступовою деструкцією клітин шигел та їх антигенів у кишечнику хворого протягом захворювання. Антигени шигел, що виділяються з сечею, мають відносно менші розміри, ніж антигени у фекаліях. Тому сечу доцільно дослідити у РНАт. У сечі жінок, на відміну сечі чоловіків, через ймовірного фекального забруднення антигени шигел однаково часто виявляються з допомогою РПГА і РНАт.

Хоча антиген значно частіше (94,5 – 100%) виявляється у тих пробах фекалій, у тому числі вдається виділити шигеллы, ніж у тих пробах, у тому числі шигеллы не виділено (61,8 – 75,8%), при паралельному бактеріологічному і серологическом (На антиген) дослідженні проб фекалій від хворих на дизентерію в цілому шигели виділені тільки з 28,2 - 40,0% проб, а антиген виявлений в 65,9 - 91,5% проб. Важливо наголосити, що видова специфічність виявленого антигену завжди відповідає специфічності сироваткових антитіл, титр яких максимально наростає в динаміці. При орієнтації на умовний діагностичний титр антитіл іноді можуть спостерігатися розбіжності у специфічності таких антитіл та виявленого антигену. Така розбіжність обумовлена ​​недостатньою діагностичною надійністю одноразового визначення активності сироваткових антитіл. У цьому випадку етіологічний діагноз має бути поставлений за специфічністю виявленого антигену.

Метод ПЛР із завданням прямого виявлення ознак збудника близький до методів індикації антигенів. Він дозволяє визначати ДНК збудника та заснований на принципі природної реплікації ДНК, що включає розплетення подвійної спіралі ДНК, розбіжність ниток ДНК та комплементарне доповнення обох. Реплікація ДНК може початися не в будь-якій точці, а лише у певних стартових блоках – коротких двониткових ділянках. Суть методу полягає в тому, що, маркувавши такими блоками специфічна тільки для даного виду (але не для інших видів) ділянку ДНК, можна багаторазово відтворити (ампліфікувати) саме цю ділянку. Тест-системи, засновані на принципі ампліфікації ДНК, у більшості випадків дозволяють виявляти патогенні для людини бактерії та віруси навіть у випадках, коли іншими способами їх виявлення не вдається. Специфічність ПЛР тест-систем (при правильному виборі таксонспецифічних праймерів, виключення хибнопозитивних результатів та відсутності в біопробах інгібіторів ампліфікації) у принципі дозволяє уникнути проблем, пов'язаних з перехресно-реагуючими антигенами, забезпечуючи тим самим дуже високу специфічність. Визначення можна проводити безпосередньо у клінічному матеріалі, що містить живий патоген. Але, незважаючи на те, що чутливість ПЛР може досягати математично можливої ​​межі (детекція 1 копії ДНК-матриці), метод у практиці діагностики шигельозів не застосовують через відносну дорожнечу.

У широкій клінічній практиці найбільшого поширення серед серологічних методів дослідження набули методи, засновані на визначенні рівня та динаміки сироваткових антитіл до передбачуваного збудника захворювання.

Деякі автори визначали антитіла до шигелів у копрофільтратах. Копроантитіла з'являються значно більш ранні терміни, ніж сироваткові антитіла. Активність антитіл досягає максимуму на 9 – 12 день, а до 20 – 25 дня вони зазвичай не виявляються. R. Laplane et al., припускають, що це пов'язано з руйнуванням антитіл у кишечнику під дією протеолітичних ферментів. У здорових копроантитіла не вдається виявити.

W. Barksdale et al, Т.М. Ніколаєва із співавт. повідомляють про підвищення ефективності розшифрування діагнозу та виявлення реконвалесцентів шляхом одночасного визначення сироваткових та копроантитіл.

Виявлення аглютинінів у діагностичних титрах вдається при бактеріологічно підтвердженій дизентерії лише у 23,3% хворих. Обмежена чутливість РА проявляється і в недостатньо високих титрах аглютинінів, що виявляються з її допомогою. Є дані, що свідчать про неоднакову чутливість РА при різних етіологічних формах шигельної інфекції. За даними А.А. Ключарьова, антитіла в титрі 1: 200 і вище виявляються за допомогою РА лише у 8,3% хворих на дизентерію Флекснера і ще рідше — при дизентерії Зонне. Позитивні результати реакції не тільки частіше, а й у вищих титрах спостерігаються при дизентерії Флекснера I-V і Флекснер VI, ніж при дизентерії Зонне. Позитивні результати РА з'являються з кінця першого тижня захворювання і найчастіше реєструються другого-третього тижня. На перші 10 днів захворювання припадає 396% всіх позитивних результатів реакції. За даними А.Ф. Подлевського та ін., аглютиніни в діагностичних титрах виявляються на першому тижні захворювання у 19% хворих, другого тижня - у 25% і на третьому - у 33% хворих.

Частота позитивних результатів РА і висота титрів антитіл, що виявляються з її допомогою, знаходяться в прямій залежності від тяжкості перебігу шигельної інфекції. За даними В.П. Зубарєвої, застосування антибактеріальної терапії не зменшує частоти позитивних результатів РА, проте при призначенні антибіотиків у перші 3 дні захворювання аглютиніни виявляються у нижчих титрах.

РА має обмежену специфічність. При обстеженні здорових людей позитивні результати РА отримано у 12,7% випадків, у 11,3% випадків спостерігаються групові реакції. У зв'язку з антигенною спорідненістю бактерій Флекснера I-V і Флекснер VI перехресні реакції особливо часто спостерігаються при відповідних етіологічних формах шигельної інфекції.

РА з появою досконаліших методів серодиагностики шигельозної інфекції поступово втратило своє значення. Діагностична цінність реакції аглютинації («дизентерійна реакція Відаля») (РА) при дизентерії оцінюється різними дослідниками неоднозначно, проте результати робіт більшості авторів свідчать про обмежену чутливість та специфічність цього методу.

Найчастіше з метою визначення антитіл використовують реакцію непрямої (пасивної) гемагглютинації (РПГА). Детальні дослідження діагностичної цінності реакції пасивної гемагглютинації (РПГА) при шигельозній інфекції виконані О.В. Луллу, Л. М. Шмутер, Т. В. Влохом та низкою інших дослідників. Їх результати дозволяють зробити висновок, що РПГА є одним з найбільш ефективних способів серологічної діагностики дизентерії, хоча і не позбавленим деяких загальних недоліків, властивих методам цієї групи.

Порівняльне дослідження чутливості при дизентерії РПГА та реакції аглютинації показує велику перевагу першого методу. За даними А.В. частіше ніж у титрі (1:160 при постановці реакції аглютинації). При бактеріологічно підтвердженій гострій дизентерії позитивна реакція РПГА у діагностичних титрах відзначається при обстеженні 53-80% хворих.

Гемаглютинини виявляються з кінця першого тижня захворювання, частота виявлення і титр антитіл наростають, досягаючи максимуму до кінця другого і третього тижня, після чого поступово відбувається зниження їх титру.

Є чітка залежність частоти позитивних результатів РПГА та титрів гемагглютинінів від тяжкості та характеру перебігу шигельної інфекції. Відповідні дослідження показали, що при стертій та субклінічній формах інфекції позитивні результати РПГА отримували рідше, ніж при гострій клінічно вираженій дизентерії (відповідно 52,9 та 65,0%), при цьому в титрах 1:200 – 1:400 реагувало лише 4, 2% сироваток (при клінічно вираженій формі - 31,2%), а при затяжній та хронічній формах позитивні результати РПГА відзначені у 40,8% хворих, у тому числі в титрі 1:200 - лише у 2,0%. Є також повідомлення про різну чутливість РПГА при окремих етіологічних формах шигельозної інфекції. За даними Л.М. Шмутер, найвищі титри гемагглютинінів спостерігаються при дизентерії Зонне і достовірно нижчі — при дизентерії Флекснер І-V та Флекснер VI. Антибактеріальне лікування, розпочате в ранні терміни захворювання, за рахунок зменшення тривалості та інтенсивності антигенного подразнення може обумовлювати появу в сироватці крові гемагглютинінів у нижчих титрах.

Подібно до реакції аглютинації, РПГА не завжди дає можливість точно розпізнати етіологічну форму шигельозної інфекції, що пов'язано з можливістю групових реакцій. Перехресні реакції спостерігаються в основному при дизентерії виду Флекснер між дизентерією Флекснер I-V і Флекснер VI. Гуморальна імунна відповідь у багатьох хворих виражена слабо. Не виключається також можливість перехресної аглютинації за рахунок загальних антигенів. Однак до переваг цього методу відносяться простота постановки реакції, можливість швидкого отримання результатів та порівняно висока діагностична ефективність. Істотним недоліком даного методу є те, що діагноз можна встановити не раніше 5-го дня захворювання, максимальні діагностичні титри антитіл можна визначити до 3-го тижня хвороби, тому метод можна віднести до ретроспективним.

З метою діагностики дизентерії запропоновано визначати також рівень специфічних циркулюючих імунних комплексів, представлених О-антигеном S.sonnei, сполученого зі специфічним антитілом, за допомогою непрямого сендвіч-варіанту імуноферментного аналізузважаючи на його високу чутливість і специфічність Однак метод рекомендується використовувати тільки з 5-ої доби захворювання.

У хворих на дизентерію з самого початку захворювання виявляються специфічне посилення бактеріофіксуючої активності крові за рахунок антигензв'язувальної активності еритроцитів. У перші 5 діб ГКІ визначення антигензв'язувальної активності еритроцитів дозволяє встановити етіологію захворювання у 85-90% випадків. Механізм цього феномену вивчений недостатньо. Можна вважати, що його основою є зв'язування еритроцитами за рахунок їх С3-рецепторів (у приматів, включаючи людину) або Fc-рецепторів (у інших ссавців) імунного комплексу антиген-антитіло.

Серед порівняно нових методів реєстрації специфічної імунної відповіді на клітинному рівні привертає увагу визначення антигензв'язуючих лімфоцитів (АСЛ), що реагують із певним, таксономічно значущим антигеном. Виявлення АСЛ здійснюють різними методами - парної аглютинації лімфоцитів антигеном, імунофлюоресценції, РІА, адсорбції лімфоцитів на антигенсодержащих колонках, адгезії мононуклеарних клітин на скляних капілярах, реакції непрямого розеткоутворення (РНРО). Слід зазначити, що такі високочутливі методи реєстрації АСЛ, як ІФА та РІА, адсорбція лімфоцитів на антигенсодержащих колонках технічно відносно складні і не завжди доступні для широкого застосування. Роботами ряду авторів показана висока чутливість і специфічність РНРО виявлення АСЛ при різних захворюваннях. Поруч дослідників виявлено тісний взаємозв'язок між вмістом АСЛ у крові хворих з різною патологією та формою, тяжкістю та періодом захворювання, переходом його у затяжну або хронічні форми.

Деякі автори вважають, що за визначенням рівня АСЛ в динаміці захворювання можна судити про ефективність терапії, що проводиться. Більшість авторів вважає, що якщо вона успішна, кількість АСЛ падає, а якщо ефективність лікування недостатня, реєструється підвищення або стабілізація цього показника. Повідомляють, що за допомогою визначення АСЛ можна кількісно оцінити сенсибілізацію до тканинних, бактеріальних антигенів, а також до антибіотиків, що має важливе значення. діагностичне значення. Метод АСЛ обмежено використовували для діагностики дизентерії.

Можливість раннього виявлення АСЛ вже в перші дні після зараження дуже важлива для ранньої постановки діагнозу і проведення своєчасного лікування, що необхідно для клініциста.

Таким чином, наведені в огляді дані показують, що з урахуванням поширення дизентерії, недостатньої чутливості та пізньої появи позитивних результатів багатьох діагностичних методів доцільно розвивати діагностичний потенціал виявлення цієї інфекції. Отримані при багатьох інфекційних захворюваннях дані про високої ефективностіметоду АСЛ, ранній появі його позитивного результату визначають перспективу вивчення та застосування цього методу при шигельозах.

Список літератури

1 Ющук Н.Д., Бродов Л.Є. Диференціальна діагностика та лікування гострих кишкових інфекцій// Ріс. ж. гастроентерол., гепатол., Колопроктол. - 2000. - 10, № 5. - С. 13 - 16. - Рус. - ISSN 1382-4376. - RU.

2 Шувалова Є.П., Змушко О.І. Синдромна діагностика інфекційних захворювань. // Підручник. - С-П.: Пітер, 2001. - С. 138-141.

3 Каральник Б.В., Амірєєв С.А., Сиздиков М.С. Принципи та можливості методів лабораторної діагностики та інтерпретація їх результатів у роботі епідеміолога // Метод. рекоменд. – Алмати. - 1997. - 21 с.

4 Каральник Б.В. Серологічна діагностика бактеріальних кишечних інфекцій. //Метод. рекомендації. - Алмати, 1973. - 3-20 с.

5 5. Нуркіна Н.М. Порівняльна ефективність методів серологічної діагностики дизентерії за допомогою сенсибілізованих еритроцитів: Автореф. дис. канд. - Алмати, 1984. - 22 с.

6 Каральник Б.В., Нуркіна Н.М. Комплексна серологічна діагностика дизентерії. //Метод. рекомендації. - Алмати, 1983. - 24 с.

7 Єркінбекова Б.К. Метод індикації антигенів шигел у санітарно-епідеміологічних дослідженнях при дизентерії: Автореф. дис. …канд.мед.наук. - Алмати, 1995. - 18 с.

8 Нікітін В.М., Георгіца Ф.І., Плугар С.В. та ін. Прискорені методи діагностики інфекційних хвороб. // Кишинів. - 1987. - 106 с.

9 Неверов В.А. Стратегія та тактика діагностики та лікування гострих кишкових інфекцій. / / СПб. - 1996. - 12 с.

10 Воробйов А.А. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія. // М.- 2004.- С. 7-8.

11 Іванов К.С., Іванов А.І. Діагностика гострих діарейних інфекцій // Клин. мед. - 1992. - № 7-8 - С. 64-69.

12 Ciudin L., Pencu E., Mihai, I. та ін. Serological identification of Shigella flex neri strains by coagglutination reaction // Roum. Arch. Micro biol.Immunol. -1995 / - Vol / 54 (4). - P. 295 - 311.

13 Lindberg AA, Cam PD, Chan N. et al. Shigellosis in Vietnam: сероепід міологічних досліджень з використанням ліпополісакхаріда антигенів в enzym immu noassays // Rev. Infect. Dis. - 1991. - Vol. 13, Suppl 4. - P.231 - 237.

14 Sloper S. Shigella. // In: Enterobacteriaceae-infection. Leipzig.- 1968.- Р. 375-441.

15 Jacobs J., Rudensky B., Dresner J. et al. Comparison of four laboratory tests for diagnosis of Clostridium difficile-associated diarrhea // Eur. J. Clin.Microbiol. Infect.Dis. - 1996. - Vol. 15(7). - P. 561-566.

16 Ключарьов А.А., Полешко Д.В., Вершеня М.І. Клініко-епідеміологічні особливості перебігу дизентерії останніми роками. // Охорона здоров'я Білорусії. - 1973. - № 11. - С. 54-56.

17 Гусарська І.Л. Особливості клінічного перебігу дизентерії Зонне на сучасному етапі та деякі питання її профілактики. // У кн.: Проблеми інфекційних хвороб. – Вологда. - 1970. -С. 23-27.

18 Шитов І.А., Тринітацька М.І. Тривалість бактеріовиділення хворих на гостру дизентерію. // У кн.: Кишкові інфекції. - ч. 2. - Л. 1972. - С. 161-163.

19 Авдєєва Т.А. Кількісне мікробіологічне дослідження придизентерії (підсумки розробки та застосування методу для вивчення клініко-мікробіологічних та епідеміологічних закономірностей дизентерії). Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. д-ра мед. наук. Л., 1964, 28 с.

20 Tillet H., Thomas M. Культура дій у diagnosis sonne dysentery: статистичний метод для визначення true isolation rate. //Internat. J.Epidemiol.- 1974.- vol.3.- Р. 177-181.

21 Хаімзон Б.І. Реакція наростання титру фага у діагностиці гострої дизентерії у дорослих. Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед.наук. Воронеж, 1965, 16 с.

22 Вількомирська Т.С. Матеріали з вивчення чутливості таспецифічності реакції наростання титру фага (РНФ) при діагностицідизентерії. // У кн.: Питання імунології інфекційних та алергічних захворювань. Уфа.- 1970.- С. 48-49.

23 Іванов Ф.М. Порівняльна цінність методів посіву, наростання титрафагу та виявлення антигенних речовин на різних етапах дизентерійного процесу. Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед.наук. Оренбург, 1963, 10 с.

24 Вількомирська Т.С. Про клініко-епідеміологічне значення реакції наростання титру фага (РНФ) при діагностиці дизентерії в умовах м. Уфи. Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед. наук. Уфа, 1971, 24 с.

25 Мазурін Н.Д., Розіна-Іцкіна Ц.С. Реакція наростання титру фага при діагностиці дизентерії. // ЖМЕІ.- 1963. - №1.- С. 113-116.

26 Голюсова Є.В., Трохименко М.З. Про значення проби Цуверкалова при діагностиці гострої дизентерії в дітей віком. // Кишкові інфекції (Київ). – 1972. – вип. 5. - С. 97-99.

27 Фрадкін В.А., Лодінова Л.М. Застосування алергенів для діагностики хронічних кишкових інфекцій. // У кн.: Бактеріоносійство і хронічні форми інфекційних хвороб. - Ч. 2. - М.-1975. - С. 213-215.

28 Лукашевич К.К. Алергічний метод діагностики дизентерії. // У кн.: Деякі питання клініки та алергії в інфекційній патології. Куйбишев. - 1970. - С. 41-43.

29 Чечельницький В.М. Значення реакції Цуверкалова в діагностиці гострої дизентерії. // У кн.: Імунологія та кишкові інфекції.Воронеж.- 1970.- С. 110-114.

30 Богданов І.Л. Алергія в патогенезі, клініці та терапії інфекційних хвороб. // М.- 1974.- 245 з.

31 Горчакова Г.А. Дизентерин (препарат для внутрішньошкірної проби при діагностиці дизентерії). Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. д-ра. мед.наук. Одеса, 1969, 19 с.

32 Любицька Н.А., Поляк А.І. Імунодіагностика дизентерії у дітей // VI Всесоюз. конф. по клініч. біохімії, морфології та імунол.інфекц. бол.: Тези доп. - Рига, 1983. - С. 106-107.

33 Фурман А.А. Порівняльне вивчення деяких прискорених методів лабораторної діагностики дизентерії та коліентериту. Автореф. дис. Насоїск. вчений. степ. кан. мед. наук. Київ, 1970, 19 с.

34 Михайлов І.Ф., Перс І.Ф. Виявлення антигенних зв'язків між бактеріями кишкової групи методом флюоресціюючих антитіл. ЖМЕІ, 1975 №5, С. 97-103.

35 Шмутер Л.М. Реакції непрямої гемагглютинації та нейтралізації антитіл у діагностиці дизентерії. Автореф. дис. на соїск. вчений. степ.кан. мед. наук. Харків, 1968, 19 с.

36 Євдокимова Т.В., Подлевський А.Ф., Яфаєв Р.Х. Клініко-лабораторні паралелі при гострій дизентерії у дорослих. - ЖМЕІ, 1974 №6, С. 82-85.

37 Могильов В.Є. Пасивна гемаглютинація при дизентерії. Автореф.дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед. наук. Куйбишев, 1968, 20 с.

38 Рибакова Н.А. Використання реакції гальмування пасивної гемаглютинації для діагностики дизентерії Зонне за умов практичної лабораторії. - Лаб. справа, 1975 №3, С. 168-170.

39 Іванов Ф.М. Порівняльна цінність методів посіву, наростання титрафагу та виявлення антигенних речовин на різних етапах дизентерійного процесу. Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед. наук. Оренбург, 1963, 10 с.

40 Годований Б.А., Літинський Ю.І., Бодісько В.П. та ін Кількісне визначення антигену шигел Зонне в сечі хворих і бактеріоносіїв. - Лаб. справа, 1974 №6, С. 360-363.

41 Кашкін Г.С. Вивчення динаміки мікробних антигенів у крові та сечоводів при гострій дизентерії. - У кн.: Проблеми інфекційних хвороб. Вологда, 1970, С. 47-50.

42 Нуркіна Н.М. Порівняльна ефективність методів серологічної діагностики дизентерії за допомогою сенсибілізованих еритроцитів: Автореф. дис. канд. - Алмати, 1984. - 22 с.

43 Лі Ван Хо., Рубцов І.В., Трегуб А.В., Ремнєва Т.В. Порівняльна діагностична цінність деяких методів виявлення дизентерійних антигенів у субстратах організму хворого. // Ж. мікробіол. - 1989. - № 1. - С. 57-61.

45 Сакаль Н.М. Застосування та оцінка ефективності імуноферментного аналізу в ранній діагностиці та прогнозуванні перебігу дизентерії Зонне: Автореф. дис. … канд. мед. наук. - СПб., 1993. - 21 с.

46 Рубцов І.В., Піменова Г.М., Кулакова В.М. До статистичної оцінки клініко-лабораторних даних ІФА // Матеріали ювілейної науково-практ. конференції, присв. 80-річчю освіти кафедри інфекційних хвороб ММА ім. І.М.Сєченова (22-23 травня 2003 р.). - М: ММА ім. І.М.Сєченова. – 2003. – С. 152-153.

47 Downes F.P., Green J.K. та ін. Розвиток і випробування enzim-linkedimmunosorbent assay для виявлення Shiga – як токсин I і Shiga – як токосин II // J. Clin. Microbiol. - 1989. - V. 27, №6. - P. 1292-1297.

48 Барбанс П.С., Пантюхіна О.М. Методика отримання та контролю флюоресцентних Fав – фрагментів антитіл проти білків сироватки людей, які перенесли черевний тиф // Ж. мікробіол., Епідеміол. та імунобіол. - 1984. - №2. - С. 102-105.

49 Використання синтетичних антигенів для diagnosis infektions diseases //Techn.ser/WHO. - 1989. - №784. - P. 1-74.

50 Ekwall E., Norberg T., Swensons S.B. та ін. specific identification of salmonella serogroup E antigen O3 за допомогою імуноfluorescence і coagglutination with antiserum elicited 1 by synthetic trisaccharide – bovine serum albuminglycoconjugate // J. Clin.Microb. - 1994. - 19, №5. - P. 699-702.

51 Lee Kuo-Ka, Ellis A.E. Швидкий і чутливий сівер-ліпополісакхаріда протіканнявикористання фази системи в простий horizontal polyacrylamide gel electrophoresis //Electrophoresis. - 1989. - V. 10, №10. - P. 729-731.

52 Темпієва Т.В., Юдицька Н.М., Літинський Ю.І., Чи Вам Хо. Ультразвукова дезінтеграція імунних комплексів для виявлення антигенівшигел у сечі хворих на дизентерію // Лаб. справа. - 1988. - №9. - С. 64-66.

53 Чайка Н.А. Вивчення кишкових інфекцій та їх збудників за допомогою сучасних імунологічних методів // Гострі кишкові інфекції. - Л.: Ленінгр. НДІ епід. та мікро. - 1987. - Вип. ІІ. - С.3-8.

54 Хазенсон Л.Б., Чайка Н.А. Імунологічні основи діагностики та епідеміологічного аналізу кишкових інфекцій. - М.: Медицина. -1987. - 112 с.

55 Кашкін Г.С. Вивчення динаміки мікробних антигенів у крові та сечі дітей при гострій дизентерії. // У кн.: Проблеми інфекційних хвороб. – Вологда. - 1970. - С. 47-50.

56 Годований Б.А., Літинський Ю.І., Бодісько В.П. Кількісне визначення антигену шигел Зонне в сечі хворих та бактеріоносіїв. // Лаб. справа. - 1970. - № 6. - С. 360-363.

57 Рибакова Н.А., Рибаков Д.А. Застосування РНГА та РНАт при епідеміологічному розслідуванні захворювань дизентерійної етіології. -Праці Ленінградського НДІ епідеміол. та мікробіол. імені Пастера -Т. 56. - Л., 1981. - С. 58-61.

58 Васильєва А.В. Порівняльна оцінка різних методів серологічної діагностики дизентерії Зонне. //Кишкові інфекції. - 1972. - Вип. № 5. - С. 129-132.

59 Дубініна І.Г., Щербо С.М., Макаров В.Б. Методи полімеразної ланцюгової реакції у лабораторній практиці. //Клінічна лабораторна діагностика. - 1997, №7. - С. 4 - 6.

60 Туркадзе К.А., Подколзін Т.А., Кокорєва Л.М. та ін Порівняльна ефективність використання ПЛР та бактеріологічного методу в діагностиці сальмонельозу та шигельозу // Матеріали ювілейної науково-практ. конференції, присв. 80-річчю освіти кафедри інфекційних хвороб ММА ім. І.М.Сєченова (22-23 травня 2003 р.). - М: ММА ім. І.М.Сєченова. – 2003. – С. 172-173.

61 Ахтамов М.А., Ахмедов А.А. Порівняльне вивчення ефективності деяких серологічних реакційу лабораторній діагностиці гострої дизентерії // Мед. журнал Узбекистану. - 1984. -№1. - С. 29-31.

62 Борисов В.А. До порівняльної оцінки деяких серологічних методів діагностики дизентерії. - Лаб. справа, 1972 №9, С. 564-566.

63 Laplane R., Be, gue P., Omanga V. Anticorps seriques et copro-anticorps dansles infections bacteriennes digestives de l, enfant. // Bull. Acad. nat. med. - 1975. - Vol. 159. - № 7. - P. 596-600.

64 Barksdale W., Ghoda A. Agglutinating antibodies in serum and faeses.// J. Immunol. - 1951. - Vol. 66. - P. 395 - 401.

65 Ніколаєва Т.А., Кукайн Е.М., Хазенсон Л.Б. Імунохімічна природа копро- та сироваткових антитіл у хворих на дизентерію Зонне та інші ОКЗ. - Тез. доп. до наук.- практ. конф., присв. 50-річчю ЛенінгрНДІЕМ ім. Пастер. Л., 1973, с. 53-54.

66 Луллу А.В. Застосування реакції непрямої гемаглютинаціїдля діагностики та вивчення імунології гострої дизентерії. // Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед. наук. - Тарту. - 1963. - 10 с.

67 Ключарьов А.А. Матеріали до вивчення дизентерії у Білорусії. Полешко Д.В., Вершеня М.І. Клініко-епідеміологічні особливості течії дизентерії за останні роки. // Автореф. дис. на соїск. учений степ. д-ра. мед. наук. - Каунас. - 1970. - 32 с.

68 Подлевський А.Ф., Целінська Н.М., Журавльова Л.В., Бучель Н.Є. Реакція непрямої гемаглютинації при дизентерії у хворих різного віку. // У кн.: Питання епідеміології та профілактики кишкових іприродно-осередкових інфекцій. Л., 1971, С. 93-99.

69 Зайтленок М.А., Єрьоміна А.М., Суботіна Ю.Л. Серологічні дослідження при гострих кишкових інфекціях, не підтверджених бактеріологічно // Імунологія та імунопатологія. - Воронеж, 1983. - С. 35-37.

70 Борисов В.А., Орлик Н.С., Кирилюк М.А. Імунна відповідь у хворих на дизентерію з тривалим виділенням шигел. // Всесоюз. конф. поклінічної біохімії, морфології та імунології інфекційних хвороб. Тез. доп. - Рига. - 1977. - С. 377-378.

71 Чилінгарян А.В. Результати паралельного застосування легеневої моделі, реакції непрямої гемаглютинації та реакції аглютинації для виявлення протидизентерійних антитіл у крові здорових. // У кн.: Гострі кишкові інфекції. Дизентерія, ешеріхіози, сальмонельози. - Л. - 1970. - С. 93-101.

72 Patton C.M., Gangorosa E.J., Weissman J.B. та ін. Diagnostie value of inderect hemaglutination in seroepidemiology of Shigella infections. // J. of Clin. Microb. - 1976. - Vol. - 23. - P. 143-148.

73 Martinez J. Epidemiological study bacterial dysentery. // Bol. ofic. sanit.panamer. - 1973. - Vol. 75. - P. 213-224.

74 Мусабаєв І.К., Абубакірова Ф.З. Бактеріальна дизентерія. - Таш -Кент - 1973. - 258 с.

75 Дулатова М.В., Головачова С.М., Савицька О.В. Принцип РПГА в експрес-діагностиці інфекцій та імунітету. // У кн.: Препарати для експрес діагностики. - Л., 1981. - С. 31-42.

76 Сафонова Н.В. Застосування реакції непрямої гемаглютинації в осередках гострої кишкової інфекції виявлення інфікованих і пошуках джерел. - Л., 1974. - 11с.

77 Солодовников Ю.П., Калашнікова Г.К., Суботіна Ю.Л., Бобкін С.В.Реакція непрямої гемаглютинації у вивченні антитіл у здорових, хворих і перехворіли на дизентерію Зонне. - ЖМЕІ, 1971, № 1. - С.13-18.

78 Провоторов В.Я. До питання лікування хворих дизентерією. – У кн.: Позалікарняна допомога інфекційним хворим та питання лікування інфекційних хворих. Саратов, 1973. - С. 153-155.

79 Каральник Б.В. Методологія та тактика імунодіагностики інфекційної патології. - У кн.: Питання клінічної імунології та імунологічної діагностики. Алма-Ата, 1988. - 10 с.

80 Каплін В.І., Клевцова Г.А., Корюхіна І.П. та ін. Специфічна реакція крові в початковий період дизентерійної та сальмонельозної інфекції та нові можливості ранньої специфічної діагностики гострих кишкових інфекцій // VI Всесоюз. конф. по клініч. біохімії,морфології та імунол. інфекцій. бол.: Тези доп. - Рига, 1983. - С.76-77.

81 Савілов Є.Д., Астаф'єв В.А., Мамонтова Л.М., Володін Ю.Ф.Епідеміологічні особливості дизентерії у Східному Сибіру. //Новосибірськ "Наука", 1994. - С.42-43.

82 Іванов К.С., Іванов А.І. Діагностика гострих діарейних інфекцій // Клин. мед. - 1992. - № 7-8 - С. 64-69.

83 Каральник Б.В. Еритроцити, їх рецептори та імунітет. //Усп.совр.биол., М. – 1992. – т.112, №1. - С.52-61.

84 Гаріб Ф.Ю., Залялієва М.В. Методи вивчення субпопуляції лімфоцитів у людини за різних патологічних станів // Метод.рекомендації. - Ташкент, 1989. - 17с.

85 Bahrg. Модабер F.Z. //J. Immunol.Meth. - 1980. - V. 38, №3-4. - P. 203-216.

86 Тяготін Ю.А. // Питання обстеження та лікування хворих із захворюваннями системи крові. - Л., 1975. - С. 21-25.

87 Новіков Д.К., Новікова В.І. Клітинні методи імунодіагностики. // Мінськ, 1979. - 222 с.

88 Смирнов Б.М., Торопова Н.І., Мохова Г.А. та ін // Матеріали Всесоюзної наукової конференції «Проблеми мед.біотехнології». Жов. 1988. - Л., 1990. - С. 114-116.

89 Славко Є.А., Дерябін П.М., Каральник Б.В. Визначення антигензв'язуючих лімфоцитів як метод ранньої діагностики сальмонельозу і дизентерії // Охорона здоров'я Казахстану.-Алмати.- 1999. - №5-6.-С.43-45.

90 Каральник Б.В., Кожагельдієва А.А., Карабеков А.Ж., Денисова Т.Г., Раїпов О.Р. Контроль ефективності лікування ієрсиніозу, спричиненого Yersinia enterocolitica // Медицина. - Алмати. - 2004. - №4. - С.51-53.

91 Каральник Б.В., Денисова Т.Г., Плазун А.А. та ін. Антигензв'язуючі лімфоцити туберкулінової специфічності у кроликів, заражених M. bovis, у динаміці лікування туберкульозу // Проблеми туберкульозу та хвороби легень. -М.-2006. - №5.-С.48-53.

92 Каральник Б.В., Карабеков А.Ж., Денисова Т.Г., Кожагельдієва А.А., Жунусова Г.Б. Диференціальна діагностика бруцельозу та кишковогоієрсініозу, викликаного Yersinia enterocolitica серовара О9 // Медицина.-Алмати.-2004.- №3.- С.155-157.

93 Каральник Б.В., Денисова Т.Г., Жунусова Г.Б., Федосов С.А., ЖанкінА.А., Оспанов К.С., Мізанбаєва С.У. Ефективність різних реакцій визначення антитіл і тесту антигензв'язуючих лімфоцитів у діагностиці бруцельозу у людей. // Мед.імунологія. - С.-П. - 2006. - Т 8. - №4. - С. 567 - 572.

94 Каральник Б.В., Денисова Т.Г., Грушіна Т.А., Тугамбаєв Т.І. Аналіз імунної відповіді морських свинок, інфікованих Brucella melitensis // Ж. мікробіол.- М.-2002.- №1.- С.54-56

95 Каральник Б.В., Березін В.Є., Денисова Т.Г., Дерябін П.М., Славко О.О. та ін Динаміка вмісту лімфоцитів з рецепторами до вірусу Sendai при імунізації вірусом та імуностимулюючим комплексом з йогоглікопротеїдів // Извест. Мін.науки та вищої освіти РК. Сер.біол. та мед.-Алмати.-1999.- №3.- С.50-51.

96 Гаріб Ф.Ю., Гурарій Н.І., Алієв Ш.Р. Характеристика антигензв'язуючих лімфоцитів при хронічному гепатиті у дітей // Імунологія-1988. - №5. С. 91-93.

97 Finlay B.B., Falkow S.A. A comparison of microbial strategies of Salmonella,Shigella and Jersinia species // Bacterial – Host cell interaction, Alban R.Liss. Inc. - 1988. - P. 227-243.

98 Каральник Б.В., Денисова Т.Г., Кешилева З.Б., Пшенична Л.А. та ін. Антигензв'язуючі лімфоцити та антитіла в діагностиці сифілісу //Інфекції, що передаються статевим шляхом. - М. - 1999. - №5. - С. 34 -36.

99 Саканова Л.М., Каральник Б.В., Укбаєва Т.Д. та ін. Імунореагенти для виявлення антигензв'язуючих лімфоцитів та їх апробація при діагностиці менінгококової інфекції // Гігієна, епідеміологія та імунобіологія.- Алмати. -2002. - №1-2.-С.69-72.

100 Славко Є.А., Дерябін П.М., Каральник Б.В., Карабеков О.Ж. Про специфічність антигензв'язуючих лімфоцитів, що виявляються у хворих на гострі запальні захворювання шлунково-кишкового тракту. // Гігієна, епідеміологія та імунобіологія. – Алмати. - 1999. - №2. - С. 102 - 105.

А.М.Садикова

Дизентеріяни лабораторли діагностикаси

Тү йін:Жедел ішек інфекціяларин бақылауда, дизентеріяниҮ нақти діагностікаси ең өзу мәселесі більш табилади. Бактеріальди дизентеріяни дұрис қойиллан діагнози науқасқа уақытинда ем жүргізуге жҙне епідемія қарси шараларди өткізу үшін маңізди. Огляди көрсетілген мәліметтер, дизентеріянике таралуин негіздей отирип, сезімталдиғиниң жеткиліксіздігі және көп деген діагностикалиқ әдістердің оң нәтижені қтауда діагностикақ потенціали мақсатти үрде дамиту керек екенін көрсетеді.

Тү йінді зө здер:діагностика, дизентерія, антигенбайланістіруши әдіс.

A.M.Садикова

Laboratory diagnostics of dysentery

Resume:Досвідчена diagnosis diarrhoe є одним з найбільш важливих питань, щоб контролювати дію intestinal infection. Exact diagnosis bacteriosis diarrhoe має vitae meaning for correct and accurate treatment of patient and to necessary antiepidemic measures aswell. Члени людей ведуть в повітрі, беручи до уваги дисциплінарну диверсію, показують ласку sensibility і останній випадок позитивних результатів багатьох diagnostických методів. Це є важливим, аби розвинути diagnostic potential to desine the infection.

Keywords: diagnostics, dysentery, antigen binding lymphocytes метод.

Зміст статті: classList.toggle()">розгорнути

Дизентерія – поширене інфекційне захворювання, відоме простому обивателю як кишкова інфекція. Ця хвороба дійсно локалізується в товстій кишці (її дистальному відділі), викликається бактеріальним агентом роду Шігел.

Дизентерія має характерну гостру течію і може провокувати ряд ускладнень. Своєчасне виявлення проблеми на ранніх етапах її розвитку дозволить ефективніше боротися з інфекцією шляхом призначення вузькоспрямованої антибактеріальної терапії та використання інших заходів щодо життєвих показань.

Показання для проведення діагностики на дизентерію

Прямим показанням до призначення комплексної діагностики є підозра на наявність шигельозу з простановкою попереднього діагнозу лікарським фахівцем широкого профілю. Він виписує направлення на обстеження після первинного прийому пацієнта, фіксації скарг, збору анамнезу.

Показання до проведення відповідних заходів нерозривно пов'язані з гострою, яскраво вираженою симптоматикою дизентерії. Основні етапи її включають:

• Прояв перших ознак бактеріального зараженняЧерез кілька годин чи днів після інфікування (конкретний термін залежить від шляху проникнення патогену в організм). Спостерігається загальне нездужання, головний біль, озноб;
• Виникнення основних симптомів– больовий синдром у ділянці живота, розлад стільця та травлення, висока температура, млявість та сильна слабкість, зниження апетиту;
• Пікові негативні явища- дуже частий і рідкий стілець з домішками слизу, кров'яних згустків, гною, постійний дискомфорт у нижній частині живота, що посилюється асинхронно незалежно від фізичної активності та вживання їжі. Крім цього блідіють шкірні покриви, слизові оболонки змінюють колір у бік темніших відтінків, язик покривається бурим нальотом. Нерідко діагностується неприємний запах із ротової порожнини. Больовий синдром в ділянці живота набуває переймоподібного характеру, що часто змінюється, при промацуванні повздошной області з лівого боку він істотно посилюється. Також відзначається зниження артеріального тиску та часте серцебиття.

Методи діагностики

Сучасна медицина пропонує пацієнтові широкий перелік методів діагностики дизентерії, спрямованих як на загальний пошук шигел, так і на визначення їхнього конкретного групового виду та серотипу.

Варто відмітити що жоден з нижчеперелічених аналізом не може бути на 100 відсотків об'єктивним та інформативним– достовірність їх коливається від 60 до 85 відсотків залежно від конкретних заходів, кваліфікації лабораторного персоналу, якості забраних проб, дотримання рекомендацій пацієнтом усіх рекомендацій перед здаванням матеріалу та умов його зберігання, сучасності та точності діагностичного обладнання та інших факторів.

Саме тому остаточний діагноз «шигельоз» може бути поставлений тільки після отримання позитивних результатів за кількома альтернативним методамдослідження, які залежать друг від друга, але що проводяться у єдиний часовий проміжок.

Найчастіше лабораторна діагностика дизентерії включає у собі:

• Копрограма;
• Загальний аналіз крові;
• Бактеріологічний посів;
• Загальний аналіз сечі;
• Серологічні дослідження;
• Аналіз на антитіла;
• біохімічний аналіз крові;
• Імунологічне тестування;
• Ректороманоскопія;
• Інші заходи за необхідності.

Важливим етапом виявлення шигельозу є комплексна професійна диференціальна діагностика, що дозволяє виключити інші інфекції чи патології зі схожою симптоматикою.

Копрограма або аналіз калу

Копрограма – найважливіший аналізпри підозрі на дизентерію, що дозволяє визначити відхилення від норм у досліджуваному калі. Лабораторний працівник, проводячи діагностику наданого матеріалу, оцінює його склад, наявність домішок, фізичні та хімічні властивості.

Перед здаванням цього виду аналізу необхідно правильно підготуватися до лабораторного дослідження:

1. За 10 діб до забору матеріалу варто відмовитись від вживання алкоголю;
2. Мінімум за 5 діб до здачі аналізу варто дотримуватись дієти №5 за Певзнером;
3. Кал не можна здавати на аналіз, якщо він отриманий за допомогою клізми або в ньому є сторонні домішки, наприклад сеча, сліди менструації;
4. За 3 доби до копрограми варто припинити прийом будь-яких лікарських препаратів(як анально у вигляді свічок, так і перорально, внутрішньовенно і т.д.), а також не проводити дослідження з використанням допоміжних засобів (вазелінової або касторової олії, вісмуту, барію);
5. Забір матеріалу потрібно здійснювати після спонтанної дефекації з 4-5 довільних ділянок, закладаючи його за допомогою медичного шпателя у спеціальний пластиковий контейнер, заповнюючи ємність максимум на 1/3. Доставити пробу потрібно максимум протягом 10 годин після безпосереднього збору за умов зберігання в холодильнику при температурі від 4 до 6 градусів.

Комплексна діагностика калу при копрограмі включає дослідження за такими критеріями:

• Консистенція. У нормі має бути щільною, при дизентерії – кашкоподібна чи рідка;
• Форма. У нормі структурована, однорідна та оформлена, при шигельозі – неоднорідна, оформлена частково, погано структурована;
• Колір. У нормі коричневий, при бактеріальному поразці – знебарвлений, іноді рожевий чи червоних (у разі наявності кров'яних згустків);
• Слиз. У нормі відсутня, при кишковій інфекції – можливо у великих кількостях;
• Кров. У нормі її немає, при дизентерії є;
• Лейкоцити. У нормі не виявляються, при шигельоз діагностується до 50 клітин у зоні видимості, переважно нейтрофілів;
• Епітеліальні клітини. У нормі є у слідових кількостях, при бактеріальній кишковій інфекції їх досить багато.

Результати копрограми надаються пацієнту чи лікаря загалом на 3-4 день після здачі матеріалу.

Посів

Ще однією поширеною методикою виявлення шигельозу в аналізах пацієнта прийнято вважати бактеріологічний посів. Суть заходів полягає у приміщенні окремих частин зданого матеріалу на різноманітні живильні середовища, адаптовані під зростання різних збудників. бактеріальних інфекцій. Якщо шигелла присутня в організмі, то на конкретному грунті вона почне активно розмножуватися, формуючи нові колонії.

Методику зазвичай використовують як підтвердження первинних аналізів, що показали наявність дизентерії, оскільки результати з бакпосіву стають відомими через тиждень.

Крім виявлення патогену, цей аналіз також дозволяє максимально точно підібрати антибактеріальний препарат вузькоспрямованої дії, який ефективно знищить інфекцію.

Виявлений зразок ділиться на кілька частин, після чого туди додаються різні антибіотики і вся група проб міститься в термостат – зразки, де колонії вимруть швидше і вважатимуться найуспішнішими, що дозволить лікарю замінити антибактеріальні препарати. широкого спектруПодії в консервативному лікуванні більш ефективні.

Кров та сеча при дизентерії

Здача загальних аналізів крові та сечі – обов'язковий аспект комплексної діагностики у процесі виявлення та підтвердження діагнозу шигельозу.

• Аналіз крові. При кишковій інфекції вищезазначеного типу в період активного розвитку може виявлятись падіння індексів гематокриту та імуноглобуліну. Також часто виявляється лейкоцитоз з переважанням нейтрофілів і токсикологічною зернистістю даних компонентів, зниження концентрацій еозинофільних і тромбоцитних компонентів. Крім цього можливий прояв лімфопенії, лімфоцитозу, зниження лімфоцитарного індексу та збільшення ШОЕ;
• Аналіз сечі. При діагностиці даного рідкого середовища у разі розвитку шигельозу спостерігається значне підвищення концентрацій циліндрів та прямого білка, у сечі нерідко присутні еритроцити.

Серологічне дослідження

Сучасне серологічне дослідження являє собою комплексний аналіз на антитіла до шигел, якими може бути насичена кров людини. Причина цього процесу – активна робота імунної системищо виділяє власні білкові сполуки плазми, які борються з інфекційним бактеріальним ураженням

Найточніша і найшвидша методика виявлення вищеописаних елементів – так звана реакція непрямої гемаглютинації. Суть методу – приміщення на еритроцитарних елементах низки антигенів різних штамів інфекції, після чого до зразків додається сироватковий екстракт крові хворого. У позитивних пробах починаються реакції взаємодії антитіл та антигенів зі склеюванням еритроцитів, що дозволяє виявити шигелу.

Диференційна діагностика дизентерії

Досить важливим етапом виявлення дизентерії та підтвердження діагнозу є диференціальна діагностика. професійна методика«відсіювання» інших захворювань і патологій зі схожою симптоматикою, що проявляється інтоксикацією організму та ураженнями кишечника. Найчастіше шигельоз порівнюють з:

• Сальмонельозом. Дана поразка має практично ідентичні прояви, але при цьому загальна інтоксикація виражена слабо і є лише в стертій формі;
• Ашеріхіоз. Хвороба цього виду викликається патогенами, що вражають не товстий, а тонкий кишечник. Прояви інтоксикації трохи слабші, ніж при шигельоз;
• Холерою. Холерна паличка вражає шлунково-кишковий тракт і кишечник, при цьому є явно виражене зневоднення через надзвичайно сильний, частий і рясний пронос. У калових масах відсутня як слиз, так і кров, при цьому загальна інтоксикаційна симптоматика слабкіша, ніж при дизентерії;
• Ієрсиніозом. При ієрсиніозі, крім вираженої інтоксикації, спостерігаються численні ураження органів і систем (нирок, печінки, ЦНС, ін.), що супроводжуються порушенням відтоку сечі, жовтяницею та іншими синдромами.
• Ротавірусна інфекція. Крім кишечника, ротавірусна інфекція практично завжди вражає верхні дихальні шляхи;
• Гострим апендицитом. Це патологічний станпов'язують із роздратуванням очеревини, суттєвим підвищенням температури, а також сильним больовим синдромом у правій нижній частині живота.

Бактеріальна дизентерія, або шигельоз, – інфекційне захворювання, що викликається бактеріями роду Shigella, що протікає з переважним ураженням товстої кишки. Назва роду пов'язана з К.Шиги, який відкрив одного із збудників

дизентерії.

Таксономія та класифікація. Збудники дизентерії відносяться до відділу Gracilicutes, сімейства Enterobacteriaceae, роду Shigella.

Морфологія та тинкторіальні властивості. Шигелли - грамнегативні палички із закругленими кінцями, довжиною 2-3 мкм, товщиною 0,5-7 мкм (див. рис. 10.1); не утворюють суперечки, не мають джгутиків, нерухомі. У багатьох штамів виявляють ворсинки загального типу та статеві пили. Деякі шигели мають мікрокапсулу.

Культивування.Дизентерійні палички – факультативні анаероби. Вони невибагливі до живильних середовищ, добре ростуть при температурі 37 ° С та рН середовища 7,2-7,4. На щільних середовищах утворюють дрібні прозорі колонії, в рідких середовищах -

дифузне помутніння. Як середовище збагачення для культивування шигел найчастіше використовують селенітовий бульйон.

Ферментативна активність. Шигели мають меншу ферментативну активність, ніж інші ентеробактерії. Вуглеводи вони зброджують із утворенням кислоти. Важливою ознакою, що дозволяє диференціювати шигели, є їх відношення до маніту: S. dysenteriae не ферментують маніт, представники груп В, С, D манітпозитивні. Найбільш біохімічно активні S. sonnei, які повільно (протягом 2 діб) можуть зброджувати лактозу. На підставі ставлення S. sonnei до рамнози, ксилози та мальтози розрізняють 7 біохімічних варіантів її.

Антигенна структура. Шигели мають О-антиген, його неоднорідність дозволяє виділяти всередині груп серовари та підсеровари; у деяких представників роду виявляють К-антиген.

Чинники патогенності. Всі дизентерійні палички утворюють ендотоксин, що чинить ентеротропну, нейротропну, пірогенну дію. Крім того, S. dysenteriae (серовар I) - шигели Григор'єва-Шиги - виділяють екзотоксин, що надає ентеротоксичну, нейротоксичну, цитотоксичну та нефротоксичну дію на організм, що відповідно порушує водно-сольовий обмін і діяльність ЦНС, призводить до загибелі епітеліальних клітин товстої ураження ниркових канальців. З утворенням екзотоксин пов'язаний більш важкий перебіг дизентерії, викликаної цим збудником. Екзотоксин можуть виділяти інші види шигел. Виявлено фактор проникності RF, внаслідок дії якого уражаються кровоносні судини. До факторів патогенності відносяться також інвазивний білок, що сприяє їх проникненню всередину епітеліальних клітин, а також пили та білки зовнішньої мембрани, відповідальні за адгезію, та мікрокапсула.

Резистентність. Шигели мають невисоку стійкість до дії різних факторів. Найбільшу резистентність мають S. sonnei, які у водопровідній воді зберігаються до 2"/2 міс, у воді відкритих водойм виживають до V/2 міс. S. sonnei можуть не тільки досить довго зберігатися, але і розмножуватися в продуктах, особливо молочних.

Епідеміологія. Дизентерія – антропонозна інфекція: джерелом є хворі люди та носії. Механізм передачі інфекцій – фекально-оральний. Шляхи передачі можуть бути різні – при дизентерії Зонне переважає харчовий шлях, при дизентерії Флекснера – водний, для дизентерії Григор'єва-Шиги характерний контактно-побутовий шлях. Дизентерія зустрічається у багатьох країнах світу. В останні

роки спостерігається різкий підйом захворюваності на цю інфекцію. Хворіють люди різного віку, але найбільш схильні до дизентерії діти від 1 року до 3 років. Кількість хворих збільшується у липні – вересні. Різні видишигел по окремих

регіонам поширені нерівномірно

Патогенез. Шигели через рот потрапляють у шлунково-кишковий тракт та досягають товстої кишки. Маючи тропізм до її епітелію, за допомогою пилок і білків зовнішньої мембрани збудники прикріплюються до клітин. Завдяки інвазивному фактору вони проникають усередину клітин, розмножуються там, у результаті клітини гинуть. У стінці кишечника утворюються виразки, дома яких потім формуються рубці. Ендотоксин, що звільняється при руйнуванні бактерій, викликає загальну інтоксикацію, посилення перистальтики кишечника, пронос. Кров із виразок, що утворилися, потрапляє у випорожнення. Внаслідок дії екзотоксину спостерігається більш виражене порушення водно-сольового обміну, діяльності ЦНС, ураження нирок.

Клінічна картина.Інкубаційний період триває від 1 до 5 днів. Захворювання починається гостро з підвищення температури тіла до 38-39 ° С, з'являються біль у животі, пронос. У стільці виявляють домішку крові, слиз. Найважче протікає дизентерія Григор'єва-Шигі.

Імунітет. Після перенесеного захворювання імунітет як видо-, а й вариантоспецифичен. Він нетривалий і неміцний. Нерідко захворювання перетворюється на хронічну форму.

Мікробіологічна діагностикаЯк досліджуваний матеріал беруть випорожнення хворого. Основою діагностики є бактеріологічний метод, що дозволяє ідентифікувати збудника, визначити його чутливість до

антибіотикам, провести внутрішньовидову ідентифікацію (визначити біохімічний варіант, сірковар або коліциногеновар). При затяжному перебігу дизентерії можна використовувати як допоміжний серологічний метод, що полягає у постановці РА, РНГА (за наростанням титру антитіл при повторній постановці реакції можна підтвердити діагноз).

Лікування.Хворих на важкі форми дизентерії Григор'єва-Шиги та Флекснера лікують антибіотиками широкого спектру дії з обов'язковим урахуванням антибіотикограми, так як серед шигел нерідко зустрічаються не тільки антибіотикоустой-

чіві, але й антибіотикозалежні форми. При легких формах дизентерії антибіотики не використовують, оскільки їх застосування призводить до дисбактеріозу, що ускладнює патологічний процес, та порушення відновлювальних процесів у слизовій оболонці товстої кишки.

Профілактика. Єдиний препарат, який може бути використаний в осередках інфекції з профілактичною метою, – дизентерійний бактеріофаг. Основну роль відіграє неспецифічна профілактика.